摘要: 目的 探讨维生素 D(VD)对自发性糖尿病大鼠肠道菌群的影响。 方法 自发性肥胖型 2 型糖尿病( ZDF)大鼠随机分为正常对照(Con)组、VD 对照(VD)组、模型( T2DM)组和 VD 干预(VD+T2DM)组。 检测各组大鼠空腹血糖情况和口服糖耐量水平。 采用 16S rDNA 测序技术检测大鼠肠道菌群变化,进行 OTU 分析( 韦恩图) 、α多样性分析 ( chao1、observed species、PD whole tree、 shannon 和 simpson ) 、 β 多样性分析(主坐标分析( PCoA) ) 、菌群结构及菌群物种差异性分析( 线性判别分析及影响因子( LEfSe) 分析) 。 结果 VD 干预显著改善了 T2DM 大鼠的空腹血糖水平和胰岛素抵抗情况( P< 0. 05) 。 α 多样性结果表明 T2DM组和 VD + T2DM组的chao1、observed species、PD whole tree、shannon 和 simpson 指数无显著差异 ( P> 0. 05) ;β 多样性分析结果显示,与T2DM 组相比,VD+T2DM 组与 Con 组 的 物 种 相 似 度 更 高。各组大鼠肠道菌群的优势菌具有显著差异相较于T2DM 组,VD+T2DM 组的 Bacteroidetes 丰度下降、Firmicutes 和 Clostridium XIVa 丰度增加。 结论 VD 可改善 T2DM大鼠的空腹血糖升高和胰岛素抵抗情况;VD可改善T2DM 大鼠的肠道菌群结构,降低 Bacteroidetes 丰度,升高Firmicutes 和 Clostridium XIVa 丰度。

摘要:低氧/缺血预适应(hypoxic/ischemic preconditioning,H/IPC)可诱导内源性保护机制使神经细胞增加对低氧/缺血的耐受,这种保护机制是细胞在生死抉择时基因表达的变化。DNA甲基化作为基因表达调控的重要机制,在低氧/缺血耐受中发挥着至关重要的作用。DNA甲基化转移酶(DNA methyltransferases,DNMTs)通过调控DNA甲基化水平影响基因表达,从而对神经保护产生重要作用。因此,DNMTs在低氧/缺血预适应诱导的神经保护中具有重要功能。本文对DNMTs在此过程中的作用进行了综述,为以DNMTs为靶点的神经保护研究提供了一定思路。

摘要: 目的　探讨甲基苯丙胺(methamphetamine,METH)损伤不同类型神经细胞双链DNA 的情况。 方法 体外实验,分别培养原代皮质神经元、HT-22 细胞、BV2 细胞、HMC3 细胞和U-87 MG 细胞,分别给予METH 后,观察细胞形态和用Western blot 检测各组细胞表达γ-H2AX 的水平。体内实验,建立METH 腹腔注射小鼠模型,应用旷场实验进行小鼠行为学分析。HE 染色观察小鼠前额叶皮质和海马内神经细胞的形态变化,用IF 观察两个脑区内双链DNA 损伤情况,用Western blot 检测两个脑区表达γ-H2AX 的水平。 结果　体外实验,给予METH 后,原代皮质神经元、HT-22 细胞、BV2 细胞、HMC3 细胞和U-87 MG 细胞形态发生明显变化,细胞突触变短或消失,胞体皱缩,间隙增宽。各组细胞表达γ-H2AX 水平明显升高。体内实验,给予METH 后,与生理盐水组相比,小鼠运动极其活跃,运动轨迹和路程明显增加。HE 染色结果显示前额叶皮质和海马内神经元明显水肿,嗜酸性增强,部分神经元变性改变。IF结果显示,与生理盐水组相比,METH 组前额叶皮质和海马内神经细胞发生双链DNA 损伤的数量明显增多,且荧光强度明显增强。Western blot结果显示,与生理盐水组相比,METH 组前额叶皮质和海马组织表达γ-H2AX 水平明显升高。 结论　METH 可损伤神经系统双链DNA。METH 可诱导原代皮质神经元、HT-22 细胞,BV2细胞、HMC3 细胞和U-87 MG 细胞以及小鼠前额叶皮质和海马组织表达γ-H2AX 水平明显增高。该研究可为阐明METH 诱导神经毒性作用机制提供理论依据。

摘要: 目的 探索恒古骨伤愈合剂对db/ db 小鼠血糖和肠道微生物的影响。 方法 　将野生型小鼠作为对照组,db/ db 小鼠随机分为模型组和恒古骨伤愈合剂治疗组;灌胃给药12 周后,检测空腹血糖、血清糖化血红蛋白和胰岛素含量,使用16S rDNA 技术分析小鼠肠内容物菌群变化及预测菌群功能。 结果　与模型组比较,恒古骨伤愈合剂降低db/ db 小鼠空腹血糖(P<0. 01)、血清糖化血红蛋白(P<0. 01)、胰岛素抵抗指数(P<0. 01),升高胰岛素含量(P<0. 01);恒古骨伤愈合剂增加db/ db 小鼠盲结肠有益菌丰度,降低害菌丰度,其中马文氏菌属的丰度显著升高(P<0. 01);恒古骨伤愈合剂抑制了db/ db 小鼠菌群D-精氨酸和D-鸟氨酸代谢、鞘脂代谢、半乳糖代谢的降低及赖氨酸降解、硫中继系统、丙酸代谢的升高(P<0. 05)。 结论 　恒古骨伤愈合剂具有降血糖功效和调节db/ db 小鼠肠道微生态平衡的作用。

摘要:肝是最常见的肿瘤远处转移脏器,miRNAs 的表达对肿瘤肝转移的过程非常重要。本文整理分析了相关miRNAs 调节消化系统中恶性肿瘤发生肝转移起调节作用的研究进展。查阅相关文献介绍miRNAs 在结直肠癌、胃癌、胰腺癌、胆囊癌等几类消化系统肿瘤肝转移过程中发挥的调节作用,为肿瘤肝转移诊断、治疗及研究提供帮助。

摘要:放射治疗是恶性肿瘤治疗的重要手段,但是,肿瘤放射抗拒是限制放疗疗效、肿瘤复发转移的主要因素。在DNA 受损的情况下,细胞内DNA 损伤应答随之被激活。研究发现DNA 损伤应答不仅影响肿瘤发生,还与肿瘤放射治疗敏感性密切相关,这使其成为肿瘤临床治疗极具前景的靶点。一些针对DNA 损伤应答的小分子抑制剂的临床一期实验也正在进行中。本文将对DNA 损伤应答在肿瘤中的作用以及DNA 损伤应答关键基因和重要路径作为生物标志物和治疗靶点在肿瘤放射增敏治疗中的潜在应用作一综述。

摘要:甲状腺疾病是一种临床上常见的内分泌疾病,其病因机制复杂多样。目前关于甲状腺疾病的研究主要局限于临床上的药效评价,对其发病机制研究较少,因此甲状腺疾病动物模型的建立对分析该类疾病的病理机制以及提高临床疗效有着较为重要的意义,成功的实验动物模型不仅能降低实验成本,还具有可行性、重复性高等特点。 本文就近年来关于甲状腺功能减退症、甲状腺功能亢进症、桥本甲状腺炎、甲状腺癌等甲状腺疾病动物模型的建立方法做一总结归纳,并对各类模型的优缺点进行分析,为相关实验的开展提供理论依据。

摘要:目的 建立微滴式数字 PCR 技术(droplet digital PCR,ddPCR)作为关键指标,实现精准检测艾滋病动物模型中细胞及组织中 SIV DNA 载量,用于储存库隐匿病毒实时动态评估。 方法 根据成熟的 qPCR 方法,对微滴式 dPCR 的反应条件进行了优化,确定最适退火温度;通过对 10 倍系列稀释 pGEM-SIVgag477 质粒标准品的检测,确定 ddPCR 检测范围。 并通过对若干 DNA 样品的多次检测,判断该检测方法的稳定性。 结果 ddPCR 的退火 温度为 60℃ ;检测范围是 0. 3~ 3. 96×104 copies/ μL;微滴式 dPCR 与 qPCR 有良好的相关性,相关系数 r = 0. 9981。 结论 本研究建立了基于微滴式 dPCR 的 SIV 病毒 DNA 的绝对定量方法,可有效的对细胞和组织中病毒储存库样 本中病毒 DNA 载量进行动态绝对定量,极大提高了模型应用评价的准确度。

摘要: 目的 研究姜黄素增强 PTEN(磷酸酶和张力蛋白同系物)野生型三阴性乳腺癌细胞对于 PARP1 抑制剂奥拉帕尼(Olaparib)的敏感性及其潜在的作用机制,从而为 PTEN 野生型三阴性乳腺癌病人的临床治疗提供新方案。 方法 使用 PTEN 缺陷三阴性乳腺癌细胞株 BT549 和 PTEN 野生型细胞株 BT549-PTEN 进行实验。 MTT 实验检测两种细胞在奥拉帕尼作用下的存活率。蛋白质印迹实验检测 PTEN 缺陷型和野生型细胞中同源重组修复关键蛋白 RAD51 的表达。彗星实验检测姜黄素及姜黄素与奥拉帕尼联合使用后细胞 DNA 的损伤程度。蛋白质印迹检测姜黄素作用后 RAD51 变化。 结果 PTEN 可通过增加 RAD51 的方式促进 DNA 损伤的修复。与 PTEN 缺陷型细胞相比,野生型细胞对于奥拉帕尼的作用较不敏感。姜黄素能够通过抑制 RAD51 的方式抑制 PTEN 介导的 DNA 修复,并增强 PTEN 野生型三阴性乳腺癌对奥拉帕尼的敏感性。 结论 姜黄素通过抑制 PTEN 介导的 DNA 修复使 PTEN 野生型乳腺癌细胞对 PARP1 抑制剂奥拉帕尼敏感。

摘要:目的 利用基因组数据筛选更多有效的长爪沙鼠微卫星位点用于近交系和封闭群遗传质量分析,丰富长爪沙鼠遗传数据?方法 通过对长爪沙鼠全基因组测序结果分析,选出符合微卫星标准的重复序列357 个,根据每个位点的侧翼序列设计并合成相应引物?提取长爪沙鼠基因组DNA 进行PCR 扩增,经引物序列和PCR 条件优化以及凝胶电泳实验分析,对成功扩增的位点通过不同近交系和封闭群长爪沙鼠进行验证和优化,筛选出适于遗传质量分析的位点?结果 在357 个微卫星位点引物中,135 个位点引物成功扩增PCR 产物?分析结果显示,其中10 个位点可以将长爪沙鼠脑缺血和糖尿病模型近交系区分开?在12 只封闭群长爪沙鼠中,23 个位点呈现出多态性?结论 成功筛选出了135 个长爪沙鼠微卫星位点,部分位点可用于近交系和封闭群长爪沙鼠遗传质量分析?