摘要:心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI)已经成为影响心血管疾病患者临床转归的最严重并发症之一,巨噬细胞的免疫炎症反应与 MIRI 的发生发展密切相关。 目前已有多项研究表明,通过影响巨噬细胞的极化和炎症状态、焦亡、浸润等功能,NF-κB 信号通路可参与 MIRI 调节,是 MIRI 治疗的潜在靶点。 因此,本文将对巨噬细胞功能与 MIRI 调节作用之间的 NF-κB 信号通路研究进展进行综述。

摘要: 目的　探讨环状RNA 凌乱样激酶1(circTLK1)在心肌缺血再灌注损伤(MIRI)中的作用和潜在机制。 方法　48 只C57BL/6 小鼠分为假手术组(Sham 组)、MIRI 组、sh-NC 组、sh-circTLK1 组、sh-circTLK1+antagomir-NC 组、sh-circTLK1+antagomir-miR-26a-5p 组,每组8 只;采用结扎左冠状动脉前降支(LAD)建立MIRI 小鼠模型。超声心动图检测小鼠左心室射血分数(EF)、左心室缩短分数(FS)、左心室舒张末期内径(LVEDD)和收缩末期内径(LVESD)以评估心脏功能,ELISA 检测血清乳酸脱氢酶(LDH)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CKMB)水平,苏木精-伊红(HE)染色检测心肌组织病理学变化,TUNEL 染色检测心肌细胞凋亡,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹(Western blot)检测心肌组织中circTLK1、miR-26a-5p、YES1 mRNA 和蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验、RNA 结合蛋白免疫沉淀(RIP)验证circTLK1/ YES1 和miR-26a-5p 之间的相互作用。 结果　与Sham 组相比,MIRI 组小鼠EF、FS、心肌组织miR-26a-5p 水平显著降低,LVEDD、LVESD、血清LDH、CK-MB 活性和cTnI 水平、心肌细胞凋亡率、心肌组织circTLK1、YES1 mRNA 和蛋白水平显著升高(均P<0. 05),心肌细胞排列紊乱,细胞间质有炎性细胞浸润;circTLK1 敲低可显著上调miR-26a-5p,抑制YES1 表达,改善上述指标变化(均P<0. 05),减轻心肌损伤;抑制miR-26a-5p 可通过上调YES1,显著减弱circTLK1 敲低对MIRI 的保护作用。双荧光素酶报告基因实验和RIP 证实了circTLK1 和miR-26a-5p 之间的直接相互作用,YES1 是miR-26a-5p 的靶标。 结论　敲低circTLK1 可能通过调节miR-26a-5p / YES1 轴在MIRI 中发挥保护作用,circTLK1 可能是MIRI 的潜在治疗靶点。

摘要: 目的 探讨玉朗伞查尔酮(yulangsan chalcone,YLSC)对心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury,MI/ RI)大鼠核因子 κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路的影响。 方法 通过结扎大鼠冠状动脉左前降支制备 MI/ RI 模型,伊文思蓝/ TTC(2,3,5-三苯基氯化四氮唑)双重染色法观察大鼠心肌梗死范围,取血清测定 MB 型肌酸激酶(creatine kinase-MB,CK-MB)、肌酸激酶(creatine kinase,CK)、羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)水平, 免疫组化法和 Western blot 法检测 NF-κB 信号通路中核因子 κB 诱导激酶(NF-κB-inducing kinase,NIK)、IκB 激酶 (IκB kinase,IκK)、κB 抑制蛋白(inhibitory κB,IκB)、NF-κB 蛋白的表达。 结果 YLSC 能缩小 MI/ RI 大鼠心肌梗死范 围;能降低 MI/ RI 所致的 CK、CK-MB 及 Hyp 水平的升高;能减少 NIK、IκK 及 NF-κB 蛋白的表达,降低 NIK 和 IκK 的 酶活性,能减慢 IκB 的降解并使其表达增多。 结论 YLSC 对 MI/ RI 大鼠具有保护作用,其保护机制可能跟 YLSC 缩小心肌梗死范围、减少心肌酶的漏出、调节炎症通路 NIK/ IκK/ IκB/ NF-κB 的表达、减少炎症反应等有关。

摘要: 目的 探讨自噬在五参顺脉胶囊改善大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用。 方法 建立心肌缺血再灌注损伤模型,随机法,将其分为假手术组、模型组、五参顺脉胶囊组、自噬抑制剂组(五参顺脉胶囊+LY294002), 每组 15 只。酶联免疫吸附试验(ELISA) 检测血清心肌肌钙蛋白 I( cTnI)、肌酸激酶同工酶 MB(CK-MB) 浓度, 2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色测定心肌梗死体积,原位末端标记(TUNEL)法检测心肌细胞凋亡,电镜下计数大鼠心肌细胞自噬体数量,Western blot 检测总 PI3K、Akt、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及其磷酸化蛋白表达,自噬标记物微管相关蛋白 1 轻链 3(LC3)蛋白表达。 结果 与假手术组比较,模型组大鼠血清 cTnI、CK-MB 浓度、心肌梗死区比例、凋亡指数、自噬体数量、心肌组织 LC3-II/ LC3-I、caspase3、Bax 增加( P< 0. 05),心肌组织 p-PI3K/ PI3K、p-Akt / Akt、p-mTOR/ mTOR、Bcl2 水平降低(P<0. 05);与模型组比较,五参顺脉胶囊组大鼠血清 cTnI、 CK-MB 浓度、心肌梗死区比例、凋亡指数、自噬体数量、心肌组织 LC3-II/ LC3-I、caspase3、Bax 降低(P<0. 05),心肌组织p-PI3K/ PI3K、p-Akt / Akt、p-mTOR/ mTOR、Bcl2 水平增加(P<0. 05);与五参顺脉胶囊组比较,自噬抑制剂组大鼠血清 cTnI、CK-MB 浓度、心肌梗死区比例、凋亡指数、自噬体数量、心肌组织 LC3-II/ LC3-I、caspase3、Bax 增加(P< 0. 05),心肌组织 p-PI3K/ PI3K、p-Akt / Akt、p-mTOR/ mTOR、Bcl2 水平降低(P<0. 05)。 结论 五参顺脉胶囊抑制心肌细胞过度自噬,对心肌缺血再灌注损伤大鼠发挥保护作用。

摘要:目的 探讨参附注射液对大鼠心肌缺血再灌注期间的心电图演变过程的影响及作用机制。 方法 取 50 只大鼠,按体重排序随机分为 5 组,各 10 只,除假手术组外均采用冠状动脉左前降支结扎法建立缺血再灌注模型;假手术组:左冠状动脉前降支穿线、不接扎,穿线前 10 min 股静脉推注 2 mL/ 100 g 注射用生理盐水;模型组: 缺血前 10 min 股静脉推注 2 mL/ 100 g 注射用生理盐水;参附低、中、高剂量组分别在缺血前 10 min 股静脉推注 1、 2、4 mL/ 100 g 参附注射液。灌注结束后取心肌组织,检测心肌细胞凋亡情况及心肌组织中蛋白激酶 B(Akt)、磷酸化 Akt(p-Akt)、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、磷酸化 GSK-3β(p-GSK-3β)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化 mTOR(p-mTOR)蛋白表达情况。 结果 与假手术组比较,模型组缺血后 10 min、30 min 及再灌注 10 min、90 min 心电图 ST 段明显抬高(P <0. 05);与模型组比较,参附低、中、高剂量组缺血后 10 min、30 min 及再灌注 10 min、 90 min 心电图 ST 段明显降低(P <0. 05);与参附低、中剂量组比较,参附高剂量组缺血后 10 min、30 min 及再灌注 10 min、90 min 心电图 ST 段明显降低(P <0. 05);参附低剂量组与中剂量组比无明显差异(P >0. 05)。 缺血后30 min 参附中、高剂量组 VT、VF 发生率均低于模型组(P <0. 01);再灌注 90 min 参附高剂量组 VT、VF 发生率均低于模型 组(P <0. 01)。 与假手术组比较,模型组心肌细胞凋亡指数、p-Akt、p-GSK-3β、p-mTOR 蛋白相对表达量均升高(P < 0. 001);与模型组比较,参附低、中、高剂量组心肌细胞凋亡指数、p-Akt、p-GSK-3β、p-mTOR 蛋白相对表达量均降低 (P <0. 001);与参附低剂量组比较,参附中、高剂量组心肌细胞凋亡指数、p-Akt、p-GSK-3β、p-mTOR 蛋白相对表达 量均降低(P <0. 05),且参附高剂量组低于参附中剂量组(P <0. 05)。 结论 参附注射液可有效改善心肌缺血再灌 注损伤心电图变化,降低心律失常发生率,抑制心肌细胞凋亡,可能与抑制 Akt / GSK-3β 信号通路激活有关。

摘要:目的 综合评估大鼠心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusion injury,MIRI)模型建立的改良方法。 方法 将 45只SD大鼠随机分 3组:快速操作组、常规开胸组和改良组,每组15只。 分别采用快速 操作、常规开胸造模及改良方法进行大鼠心肌缺血再灌注手术造模,收集大鼠心脏进行TTC+伊文思蓝染色观察, 分别从造模成功率、大鼠存活率、心肌损伤情况三方面进行分析比较。 结果 与快速造模和开胸造模组相比,改良方法造模的成功率、成活率均有所提高,且心肌梗死面积厚度统一。 结论 心肌缺血再灌注损伤模型构建方法改良后的可行性较高,可推广应用。

摘要:目的 观察冠心宁片（GXNT）对心肌缺血再灌注损伤（MI/RI）大鼠心肌梗死和心脏自主神经功能的影响。方法 SD大鼠70只，随机分为7组，即伪手术组、MI/RI组、GXNT 75 mg/kg，150 mg/kg，300 mg/kg，600 mg/kg剂量组和300 mg/kg复方丹参片（DST）组，每组10只。所有大鼠均预防性经口灌胃给药7 d后，采用结扎大鼠左冠状动脉前降支法，建立MI/RI大鼠模型。期间记录大鼠心电图并分析心电图J点和心率变异性（HRV）指标，并用伊文思蓝（EB）和2，3，5-氯化三苯基四氮唑蓝（TTC）双重染色心肌并分析心肌梗死面积以及行HE染色观察心肌病理学改变，测定血浆乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、丙二醛（MDA）和一氧化氮（NO）水平。结果 与MI/RI组比，冠心宁片组和复方丹参片组能明显减轻心肌梗死面积和抑制LDH和CK活性的升高（P< 0.05， P< 0.01），并能降低再灌注期大鼠∑-J值和J点平均值（P< 0.05，P< 0.01），显著提高HRV和血浆NO水平以及降低血浆MDA含量（P< 0.05，P< 0.01），并能改善心肌组织病理。结论 冠心宁片能减轻MI/RI大鼠心肌梗死，并能改善心脏自主神经功能。

摘要:目的 观察丹酚酸A（salvianolic acid A，SAA）对心肌缺血再灌注损伤（myocardial ischemia reperfusion injury，MI/RI）大鼠心率变异性（HRV）和心肌损伤的影响。方法 SD大鼠60只，随机分为6组，即伪手术组、MI/RI模型组、SAA低，中，高（0.5 mg/kg，1 mg/kg和2 mg/kg）剂量组和阳性对照（2 mg/kg地尔硫䓬）组，每组10只。采用结扎大鼠左冠状动脉前降支法，建立MI/RI大鼠模型，分别于结扎前给予相应药物。期间观察并分析心电图J点和HRV变化，同时再灌注结束后用伊文思蓝（evans blue，EB）和2，3，5-氯化三苯基四氮唑蓝（tetrazolium chloride，TTC）双重染色法测定心肌梗死面积，并测定血浆谷草转氨酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）及其同工酶（CK-MB）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和一氧化氮（NO）含量。结果 与MI/RI模型组比，SAA低、中、高剂量组和地尔硫䓬组均能显著降低再灌注期大鼠∑-J值和J点平均值（P<0.05，P<0.01），减少心肌梗死面积和抑制AST、CK-MB和CK活性的升高（P<0.05，P<0.01）;显著升高RR间期的标准差（SDNN）、相邻RR间期差值平方和的均方根（RMSSD）、HRV三角函数（tr.Ind）和高频（HFnu），并降低低频（LFnu）和LF/HF比值（P<0.05，P<0.01），还能显著升高NO含量和降低MDA含量（P<0.05）。结论 丹酚酸可增加HRV，减少心肌梗死面积，其作用机制与丹酚酸A的抗氧化作用有关。

摘要:目的 检测大鼠心肌缺血再灌注中诱导CD4+ T细胞趋化的趋化因子的表达.方法建立大鼠心肌缺血再灌注损伤的实验动物模型,冠状动脉左前降支结扎45 min后恢复再灌,在不同的再灌注时间点0、2、6、9、12 h获取心脏组织(每组4只),相应时间点的假手术组作为对照.RT-PCR检测趋化CD4+ T细胞的趋化因子的表达;免疫荧光检测趋化因子诱导的CD4+ T细胞的募集;组织学评价心肌细胞的损伤.结果诱导CD4+ T细胞募集的趋化因子的表达在再灌注2 h即迅速增高,随后出现下降.其中,CXCL-10(IP-10)的表达高峰出现在2 h,与其共用同一受体CXCR3的其它两个趋化因子CXCL9(Mig)和CXCL11(I-TAC)的表达,分别在再灌注12 h和9 h出现另一高峰.受趋化因子的诱导,组织中浸润的CD4+ T细胞逐渐增多;心肌的缺血再灌注损伤也随之不断加重.结论诱导CD4+ T细胞募集的趋化因子,通过CD4+ T细胞介导的免疫损伤作用,最终导致了心肌的梗死.

摘要:目的 观察丹酚酸A（Salvianolic acid A, SAA）对心肌缺血再灌注损伤（myocardial ischemia reperfusion injury, MI/RI）大鼠心率变异性（HRV）和心肌损伤的影响。方法 SD大鼠60只，随机分为6组，即伪手术组、MI/RI模型组、SAA 低，中，高（0.5mg/kg，1mg/kg和2mg/kg）剂量组和阳性对照（2mg/kg地尔硫?）组，每组10只。采用结扎大鼠左冠状动脉前降支法，建立MI/RI大鼠模型，分别于结扎前给予相应药物。期间观察并分析心电图J点和HRV变化，同时再灌注结束后用伊文思蓝（Evans Blue, EB）和2,3,5-氯化三苯基四氮唑蓝（Tetrazolium chloride, TTC）双重染色法测定心肌梗死面积，并测定血浆谷草转氨酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）及其同工酶（CK-MB）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和一氧化氮（NO）含量。结果 与MI/RI模型组比，SAA 低、中、高剂量组和地尔硫?组均能显著降低再灌注期大鼠?-J值和J点平均值（P<0.05，P<0.01），减少心肌梗死面积和抑制AST、CK-MB和CK活性的升高（P<0.05，P<0.01）；显著升高RR间期的标准差（SDNN）、相邻RR间期差值平方和的均方根（RMSSD）、HRV三角函数（tr. Ind）和高频（HFnu），并降低低频（LFnu）和LF/HF比值（P<0.05，P<0.01），还能显著升高NO含量和降低MDA含量（P<0.05）。结论 丹酚酸可增加HRV，减少心肌梗死面积，其作用机制与丹酚酸A的抗氧化作用有关。