摘要: 目的 建立封闭群实验用鹌鹑微卫星 DNA 遗传检测方法。 方法 通过文献检索,筛选鹌鹑微卫星位点,利用种间转移法,在鹌鹑近缘物种—鸡和鸭筛选适合鹌鹑的微卫星 DNA 位点。 提取鹌鹑肝组织 DNA 作为模板,并通过 PCR 扩增以及琼脂糖凝胶电泳技术,对相应的位点进行筛选。 最后根据所选微卫星位点扩增情况、等位基因数目和多态性等,筛选出适用于鹌鹑遗传质量检测的微卫星位点组合并建立检测方法。 结果 初步确定适用于封闭群实验用鹌鹑遗传检测的 23 个微卫星位点组合。 结论 初步建立了实验用鹌鹑的遗传质量检测方法。

摘要:在实验动物福利伦理实践中,3R 原则是其核心内容。作为这一实践活动主体的实验动物工作者在其中发挥主导作用,应承担起相应的主体责任。本文从主体责任的提出、贯彻福利原则的需要、福利伦理技术方法的需要、开发福利新产品的需要、福利伦理相关政策执行的需要以及设立实验动物纪念日和纪念碑以体现主体责任等几个方面阐述了主体责任在实验动物福利伦理实践中的作用、实现途径和意义。

摘要:目的 利用基因组数据筛选更多有效的长爪沙鼠微卫星位点用于近交系和封闭群遗传质量分析,丰富长爪沙鼠遗传数据?方法 通过对长爪沙鼠全基因组测序结果分析,选出符合微卫星标准的重复序列357 个,根据每个位点的侧翼序列设计并合成相应引物?提取长爪沙鼠基因组DNA 进行PCR 扩增,经引物序列和PCR 条件优化以及凝胶电泳实验分析,对成功扩增的位点通过不同近交系和封闭群长爪沙鼠进行验证和优化,筛选出适于遗传质量分析的位点?结果 在357 个微卫星位点引物中,135 个位点引物成功扩增PCR 产物?分析结果显示,其中10 个位点可以将长爪沙鼠脑缺血和糖尿病模型近交系区分开?在12 只封闭群长爪沙鼠中,23 个位点呈现出多态性?结论 成功筛选出了135 个长爪沙鼠微卫星位点,部分位点可用于近交系和封闭群长爪沙鼠遗传质量分析?

摘要:目的 建立封闭群实验用鸽微卫星DNA 遗传检测方法?方法 通过文献检索和SSR Hunter 软件筛选,选取和设计了鸽微卫星位点共61 个?利用鸽基因组样本进行PCR 扩增及条件优化?利用琼脂糖凝胶电泳结果进行初筛,获得等位基因丰富?扩增条带清晰的20 个微卫星位点?通过STR 扫描比较分析,选取适用于实验用鸽遗传质量检测的位点共16 个并应用于两个封闭群鸽群体?结果 利用筛选出的16 个微卫星DNA 位点,初步建立封闭群实验用鸽的遗传检测方法?结论 初步建立了基于微卫星DNA 的封闭群实验用鸽遗传检测方法,为封闭群实验用鸽种群遗传质量控制奠定基础?

摘要:目的 探讨长爪沙鼠糖尿病近交系培育过程中血液生理生化指标动态变化及其规律?方法 参考前期的研究方法,应用生化分析仪?血细胞分析仪,检测糖尿病长爪沙鼠近交系F9 ~ F14 代繁殖动物17 项血液生化和22 项血常规指标,并绘制其动态曲线?结果 从检测结果和动态曲线变化看,F9 ~ F14 代动物的尿酸 (URIC)?乳酸脱氢酶(LD)?肌酸激酶(CK)?淀粉酶(AMY)?血糖(GLU)?单核细胞百分数(MON%)?平均血红蛋白含量(MCH)?平均血红蛋白浓度(MCHC)?平均血小板体积(MPV)随代数增加呈现上升趋势;总胆固醇(CHOL)?嗜酸性粒细胞直接计数(EOS)?嗜酸性粒细胞百分数(EOS%)?红细胞(RBC)?红细胞压积(HCT)?血红蛋白 (HGB)呈现下降趋势;白蛋白(ALB)?总蛋白(TP)?甘油三酯(TG)?高密度脂蛋白(HDL)?尿素氮(BUN)?总胆红素(TBIL)?肌酐(CRE)?碱性磷酸酶(ALP)?谷草转氨酶(AST)等其余指标总体趋势比较平稳?结论 糖尿病近交系动物培育中血液生理生化随着近交代数的增加会发生变化,尤其是糖代谢和脂代谢相关指标高于其他动物,提示其糖尿病动物的疾病特征,也说明定向的近亲繁殖和培育对其血液生理生化指标具有一定的影响?

摘要:目的 分析糖尿病长爪沙鼠Rxra基因在6种组织中的表达水平，以期探索长爪沙鼠糖尿病发生的分子机制。方法 选取糖尿病长爪沙鼠和正常沙鼠各6只，分别采集动物的骨骼肌、肝脏、脂肪、肾脏、心脏和脑组织，用Real-time PCR和Western blotting检测Rxra基因在各组织中mRNA和蛋白表达水平。结果Real-time PCR的结果表明，Rxra基因的mRNA水平在糖尿病组动物骨骼肌和脂肪中显著降低，在肝脏中无差异，而在肾脏、心脏和脑组织中则有高表达趋势。Western blotting结果显示，糖尿病组RXRA的蛋白水平在骨骼肌组织中显著降低，在脂肪组织几乎检测不到，在其他各组织表达情况有所不同，但没有统计学差异。结论　Rxra在糖尿病长爪沙鼠骨骼肌和脂肪组织中低表达，在其他４种组织中表达水平无差异，说明Rxra对长爪沙鼠糖尿病的影响主要发生在骨骼肌和脂肪组织中。

摘要:目的：应用巢式PCR方法通过胃液活体检测长爪沙鼠幽门螺杆菌感染, 从而建立可以持续监测长爪沙鼠幽门螺杆菌感染的检测技术。方法：体外培养幽门螺旋杆菌并接种至长爪沙鼠体内，在感染后第10周使用普通PCR方法检测长爪沙鼠胃液，使用巢式PCR方法对长爪沙鼠胃液、胃组织、十二指肠内容物、结肠粪便进行检测；同时还利用快速尿素酶试验和血清Elisa方法等对比分析巢式PCR方法的准确性,上述PCR产物均经过测序验证。结果：普通PCR方法检测胃液、巢式PCR方法检测胃液、胃组织、十二指肠内容物结肠粪便以及快速尿素酶试验、血清Elisa检测方法检验结果阳性率分别为30%、100%、100%、90%、10%、100%和0%。比较不同检测方法的检测结果发现，胃液巢式PCR、胃组织巢式PCR和快速尿素酶试验均有100%的检测率，普通PCR检测胃液的方法、结肠粪便巢式PCR方法及血清学Elisa检测方法检测率均比较低。结论：胃液巢式PCR检测方法由于其特异性、准确性及灵敏性较高等特点可以用于长爪沙鼠幽门螺旋杆菌的长期检测，特别是对于预防和治疗幽门螺旋杆菌感染的实验具有重要价值。

摘要:目的 利用微卫星位点对国内24种近交系小鼠进行遗传状况分析。 方法 用前期筛选的富含多态性和等位基因数多的30个小鼠微卫星位点，合成荧光标记引物，对近交系小鼠基因组DNA进行PCR的扩增，经STR扫描对各近交系小鼠品系进行基因分型。 结果 在24个近交系小鼠品系中，有15个品系在品系内在30个位点上均具有相同基因型。而在不同品系间同一位点具有多态性，可初步对不同品系进行鉴别。其余9个品系内个别动物存在多态性。 结论 所选位点可以用于近交系小鼠遗传质量检测分析，并进行初步品系鉴定。

摘要:目的 利用微卫星位点对国内24种近交系小鼠进行遗传状况分析。方法 用前期筛选的富含多态性和等位基因数多的30个小鼠微卫星位点，合成荧光标记引物，对近交系小鼠基因组DNA进行PCR的扩增，经STR扫描对各近交系小鼠品系进行基因分型。结果 在24个近交系小鼠品系中，有16个品系在品系内在30个位点上均具有相同基因型。而在不同品系间同一位点具有多态性，可初步对不同品系进行鉴别区分。其余品系内个别动物存在多态性。结论 所选位点可以参考用于近交系小鼠遗传质量检测分析，并进行初步品系检测鉴定。

摘要:目的 分析糖尿病长爪沙鼠Rxra基因在6种组织中的表达水平，以期探索长爪沙鼠糖尿病发生的分子机制。方法 选取糖尿病长爪沙鼠和正常沙鼠各6只，分别采集动物的骨骼肌、肝脏、脂肪、肾脏、心脏和脑组织，用Real-time PCR和Western blotting检测Rxra基因在各组织中mRNA和蛋白表达水平。结果 Real-time PCR的结果表明，Rxra基因的mRNA水平在糖尿病组动物骨骼肌和脂肪中显著降低，在肝脏中无差异，而在肾脏、心脏和脑组织中则有高表达趋势。Western blotting结果显示，糖尿病组RXRA的蛋白水平在骨骼肌组织中显著降低，在脂肪组织几乎检测不到，在其他各组织表达情况有所不同，但没有统计学差异。结论 Rxra在糖尿病长爪沙鼠骨骼肌和脂肪组织中低表达，在其他4种组织中表达水平无差异，说明Rxra对长爪沙鼠糖尿病的影响主要发生在骨骼肌和脂肪组织中。