摘要: 目的　探讨甲基苯丙胺(methamphetamine,METH)损伤不同类型神经细胞双链DNA 的情况。 方法 体外实验,分别培养原代皮质神经元、HT-22 细胞、BV2 细胞、HMC3 细胞和U-87 MG 细胞,分别给予METH 后,观察细胞形态和用Western blot 检测各组细胞表达γ-H2AX 的水平。体内实验,建立METH 腹腔注射小鼠模型,应用旷场实验进行小鼠行为学分析。HE 染色观察小鼠前额叶皮质和海马内神经细胞的形态变化,用IF 观察两个脑区内双链DNA 损伤情况,用Western blot 检测两个脑区表达γ-H2AX 的水平。 结果　体外实验,给予METH 后,原代皮质神经元、HT-22 细胞、BV2 细胞、HMC3 细胞和U-87 MG 细胞形态发生明显变化,细胞突触变短或消失,胞体皱缩,间隙增宽。各组细胞表达γ-H2AX 水平明显升高。体内实验,给予METH 后,与生理盐水组相比,小鼠运动极其活跃,运动轨迹和路程明显增加。HE 染色结果显示前额叶皮质和海马内神经元明显水肿,嗜酸性增强,部分神经元变性改变。IF结果显示,与生理盐水组相比,METH 组前额叶皮质和海马内神经细胞发生双链DNA 损伤的数量明显增多,且荧光强度明显增强。Western blot结果显示,与生理盐水组相比,METH 组前额叶皮质和海马组织表达γ-H2AX 水平明显升高。 结论　METH 可损伤神经系统双链DNA。METH 可诱导原代皮质神经元、HT-22 细胞,BV2细胞、HMC3 细胞和U-87 MG 细胞以及小鼠前额叶皮质和海马组织表达γ-H2AX 水平明显增高。该研究可为阐明METH 诱导神经毒性作用机制提供理论依据。

摘要: 目的　通过复合过敏性鼻炎和慢性咽炎动物模型建立模拟腺样体肥大大鼠模型,并评价模拟模型的可行性。 方法　通过卵白蛋白腹腔注射基础致敏及滴鼻强化致敏制造过敏性鼻炎大鼠模型,同时予氨水进行大鼠咽喉部喷雾制造慢性咽炎模型,复合成模拟腺样体肥大大鼠模型。造模结束后通过动物行为学评分评估模型动物症状表现;将鼻、咽黏膜及鼻咽淋巴结组织HE 染色后观察其组织病理形态学改变;造模结束取大鼠全血检测嗜酸性粒细胞百分比,ELISA 法检测大鼠血清及粘膜组织IL-4、IgE 水平。 结果　两组模型组动物行为学评分、嗜酸性粒细胞百分比、血清及组织IL-4、IgE 水平均较空白对照组上调(P<0. 01);与模型A 组对比,模型B 组嗜酸性粒细胞百分比、血清及组织IgE 水平上调更加明显(P<0. 01);两组模型组鼻、咽黏膜及鼻咽部淋巴结都出现不同程度的疾病相关组织病理改变。 结论　模拟腺样体肥大大鼠模型在症状表现及病理改变上与腺样体肥大类似,可以通过复合过敏性鼻炎和慢性咽炎动物模型模拟腺样体肥大动物模型,但仍需进一步探索完善。

摘要: 目的　采用网络药理学和分子对接的研究方法,预测肾衰方慢性肾病(chronic kidney disease,CKD)心肌损伤的作用机制。 方法　利用TCMSP 数据库、Herb 本草组鉴数据库(http:/ / herb. ac. cn/ )和SWISS Target prediction 数据库筛选活性成分靶点信息,然后通过Uniprot 数据库筛选出人类靶点和规范基因名;使用Cytoscape 3. 7. 2 软件作药物-有效成分-靶点网络图;选用GeneCards 数据库收集疾病相关靶点;利用Venny 2. 1 建立“肾衰方”抗CKD 心肌损伤的基因靶点数据库;利用String 数据库构建主要成分靶点互作网络并筛选关键靶点;然后导入Cytoscape 3. 7. 2 软件进行拓扑分析和构建PPI 网络图,最后用DAVID 平台进行Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG)通路富集分析(P<0. 05)和Gene Ontology(GO)生物学功能注释。 结果　经过筛选,肾衰方活性化合物为252 个;肾衰方与CKD 心肌损伤共同靶点649 个,其中AKT1、TNF、MAPK3、VEGFA 可能是肾衰方治疗CKD 心肌损伤的重要靶点;进行GO 分析,得到Biological precess(BP)1485 条目,Celler component(CC)176 条目,Molecular function(MF)386 条目,其中富集基因数量最多的条目为plasma membrane、cytosol、cytoplasm,分别分布了313、304、276 个基因;进行KEGG 分析,肾衰方治疗CKD 心肌损伤参与的通路可能有HIF-1α 通路、Lipid and atherosclerosis 通路、AGE-RAGE signaling pathway in diabetic complications 通路、PI3K-AKT 通路、Insulin resistance 通路等。 结论　肾衰方可能通过参与改善胰岛素抵抗,改善脂质代谢、抗动脉粥样硬化,调节炎性因子和血管内皮生长因子等的表达等多重机制发挥心肾保护作用,其中PI3K/ AKT 和MAPK 可能是重要的调节通路。

摘要: 目的　模拟人类饮酒习惯,参考现有的利用酒精灌胃建立酒精性肝损伤模型的报道,探究影响模型成功的关键因素并优化小鼠酒精性肝损伤模型的构建方法。 方法　将150 只SPF 级ICR 小鼠分为三个实验组讨论造模的周期和频率,造模剂的种类和用量及造模剂给予的时间间隔对实验动物的生化和生理指标所产生的影响差异。三组实验分别对小鼠进行不同剂量、不同频率、不同间隔时间的60%乙醇和53°白酒灌胃,最后计算各组小鼠的死亡率,检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的活性及肝组织匀浆样本中丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、甘油三酯(TG)的含量,并进一步对小鼠肝进行HE 染色及油红染色。 结果　1 d 造模组死亡率为20%,两次不同剂量白酒造模组死亡率为40%,4 h、6 h、8 h、12 h 白酒间隔造模组死亡率依次为40%、20%、10%、0%;对血清样本中ALT 和AST 的含量及肝组织匀浆中MDA、GSH、TG 的含量、病理学检测指标等方面进行比较发现,缩短灌胃时间间隔及增加灌胃剂量会加剧小鼠肝受损情况。 结论　在建立酒精性肝损伤的小鼠模型时,酒精灌胃的剂量、周期和频率会影响模型的成功率,比较而言,20 mL/ kg 和10 mL/ kg 的剂量,间隔6 h 灌胃53°白酒的方法更适合用于酒精性肝损伤动物模型的构建。

摘要: 目的　探讨HIV 对大脑颞叶皮层神经元中次黄嘌呤核苷酸脱氢酶II(inosine monophosphate dehydrogenase 2,IMPDH2)蛋白表达的影响。 方法　应用MoCA 分数和磁共振成像手段评估HIV 感染者轻度认知障碍情况。利用中国恒河猴SHIV KU-1 神经艾滋病模型,HE 染色观察猴颞叶皮层细胞结构的变化;采用免疫组化方法和Western blot方法检测IMPDH2 在猴颞叶皮层神经元内的表达;以及借助在线数据库预测IMPDH2 相关信号通路的关键信号分子。 结果　HIV 感染者颞叶皮质较健康对照萎缩。与健康对照相比,SHIV KU-1 感染恒河猴颞叶皮层神经元中IMPDH2 蛋白表达显著降低(P<0. 0001)。HNRNPA1 等8 个基因与IMPDH2 有潜在的相互作用。 结论　IMPDH2 在HIV 患者颞叶皮层神经元中的表达下调,其可能参与了HIV 相关神经认知障碍发生。

摘要: 目的　探讨甘松新酮(nardosinone, Nar)通过调控PI3K/ Akt/ mTOR 通路对低氧诱导H9c2 心肌细胞凋亡的影响及机制。 方法　采用氯化钴(CoCl2 ) 制备心肌细胞低氧损伤模型,CCK-8 试剂盒检测细胞活性;Hoechst 33342 进行细胞染色,激光共聚焦显微镜下观察细胞凋亡现象;网络药理学预测Nar 治疗IHD 相关信号通路;Western blot 检测凋亡、自噬和PI3K/ Akt/ mTOR 通路相关蛋白表达。 结果　PI3K/ Akt/ mTOR 通路是Nar 治疗IHD 关键信号通路之一;与对照组比,CoCl2(400 μmol/ L)组细胞活性降低,细胞核碎片增多,凋亡蛋白Cleaved-Caspase-3 表达升高、Bcl-2/ Bax 比降低,PI3K、Akt 和mTOR 磷酸化水平降低;P62 表达降低,LC3II/ LC3I 比和Beclin-1 表达升高(P<0. 05)。与CoCl₂ 组比,Nar(50 μmol/ L)预处理显著增加了细胞活性、减少细胞核凋亡碎片,降低Cleaved-Caspase-3 表达,升高Bcl-2/ Bax 比值,增加了PI3K、Akt 和mTOR 磷酸化水平及P62 表达,降低LC3II/ LC3I比和Beclin-1 表达(P<0. 05)。PI3K 特异性抑制剂LY294002 预作用后抵消了Nar 对CoCl₂ 引起的以上凋亡、PI3K/Akt/ mTOR 通路相关蛋白和P62 蛋白的影响,但没有抵消对LC3II/ LC3I 比和Beclin-1 表达的影响。 结论　Nar 激活PI3K/ Akt/ mTOR 通路抑制了CoCl₂ 诱导的H9c2 心肌细胞低氧凋亡,但可能通过其他途径缓解了过度自噬对细胞造成的损伤。

摘要: 目的　建立2,4-二硝基氯苯诱发的Brown Norway(BN)大鼠特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)模型,并评估验证其在药效试验中的应用。 方法　BN 大鼠随机分为对照组、模型组、他克莫司组。分别于1、3、7、9、12、14、16、19、21、23 和25 d 对模型组和他克莫司组BN 大鼠双耳涂布0. 5% 2,4-二硝基氯苯(DNCB)溶液,每耳40 μL。对照组在相同时间给予等容积的基质溶液。他克莫司组在造模期间给予他克莫司软膏涂抹右耳,连续25 d。试验期间对耳部皮肤进行炎症评分和耳厚度测定;造模26 d 后取耳片进行称重;部分耳片组织行苏木素-伊红染色和甲基胺蓝染色,剩余耳片匀浆测定IgE 含量。 结果　模型组自造模9 d 起耳厚度明显增加,12 d 出现明显的耳组织炎症症状,16~25 d 处于高峰阶段;造模26 d,模型组耳重量明显增加,IgE 含量明显升高,耳组织呈表皮增厚、表皮内和真皮层炎细胞浸润、肥大细胞浸润等病理改变。他克莫司软膏明显改善上述指标。 结论　DNCB 诱导BN 大鼠发展出稳定的AD 样症状,适用于药物药效作用评价。

摘要: 目的　探究miR-486-5p 对子宫内膜癌(EC)细胞恶性生物学行为的影响及对PTEN 的靶向调节作用。 方法　qRT-PCR 检测EC 组织和细胞中miR-486-5p、PTEN mRNA 表达水平,分析EC 组织中miR-486-5p、PTEN mRNA 表达与患者临床特征的相关性。双荧光素酶报告基因实验验证miR-486-5p 与PTEN 的靶向关系。Ishikawa细胞分为NC 组、NC inhibitor 组、miR-486-5p inhibitor 组、miR-486-5p inhibitor+si-NC 组、miR-486-5p inhibitor+si-PTEN 组,Western blot 检测细胞中PTEN 蛋白及PI3K/ AKT 通路相关蛋白表达,CCK-8 检测细胞活力,集落形成实验检测细胞集落形成能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,划痕愈合实验、Transwell 实验检测细胞迁移、侵袭能力。 结果　EC 组织和细胞中miR-486-5p 高表达,而PTEN mRNA 低表达(P<0. 05)。EC 组织中miR-486-5p、PTEN mRNA 表达均与患者肿瘤大小、分化程度、国际妇产科联盟(FIGO)分期、淋巴结转移有关(P<0. 05)。经验证,Ishikawa 细胞中miR-486-5p 可能负靶向调节PTEN 表达。与NC 组、NC inhibitor 组比较,miR-486-5p inhibitor 组Ishikawa 细胞的48 h、72 h 细胞活力、划痕愈合率及p-PI3K/ PI3K、p-AKT/ AKT 比值降低(P<0. 05),集落形成数、迁移细胞数和侵袭细胞数减少(P<0. 05),凋亡率升高(P<0. 05);与miR-486-5p inhibitor 组、miR-486-5p inhibitor+si-NC 组比较,miR-486-5p inhibitor+si-PTEN 组Ishikawa 细胞的48 h、72 h 细胞活力、划痕愈合率及p-PI3K/ PI3K、p-AKT/ AKT 比值升高(P<0. 05),集落形成数、迁移细胞数和侵袭细胞数增加(P<0. 05),凋亡率降低(P<0. 05)。 结论　抑制miR-486-5p 可能通过负靶向调节PTEN 抑制PI3K/ AKT 通路活化,进而抑制EC 细胞增殖、迁移和侵袭,并诱导其凋亡。

摘要: 目的　探究miR-34a-5p 通过靶向胰岛素样生长因子Ⅱ mRNA 结合蛋白3(IMP3)、程序性死亡配体-1(PD-L1)表达对乳腺癌细胞生物学行为的影响。 方法　利用Human Protein Atlas 和GEPIA 在线分析TCGA 数据库和GTEx 项目中乳腺癌及正常组织IMP3、PD-L1 的表达水平、患者的预后生存期;qRT-PCR、Western blot 检测160例患者乳腺癌组织及癌旁正常组织中miR-34a-5p、IMP3 、PD-L1 mRNA 与蛋白表达;Pearson 检验分析miR-34a-5p分别与IMP3 mRNA、PD-L1 mRNA 的相关性;免疫组化检测患者乳腺癌及正常组织IMP3、PD-L1、白细胞分化抗原44 变异体6(CD44v6)的表达,分析IMP3、PD-L1 表达水平与患者临床病理参数的关系;靶基因预测、双荧光素酶报告实验验证miR-34a-5p 对IMP3、PD-L1 的靶向调控作用。MCF7 细胞分为control 组、miR-NC 组、miR-34a-5p 组、miR-NC+pcDNA-NC 组、miR-NC+IMP3 组、miR-NC+PD-L1 组、miR-34a-5p+pcDNA-NC 组、miR-34a-5p+IMP3 组和miR-34a-5p+PD-L1 组,采用MTT 法、克隆形成、划痕、Transwell 小室实验测定细胞增殖活力、迁移、侵袭能力;Western blot 检测IMP3、PD-L1、CD44v6、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平。 结果　生物数据库显示乳腺癌组织IMP3、PD-L1 表达水平越高,患者生存期越短(P<0. 05);qRT-PCR、Western blot结果显示,乳腺癌组织miR-34a-5p 表达水平明显低于正常组织,IMP3、PD-L1 mRNA 与蛋白表达水平明显高于正常组织,miR-34a-5p 表达分别与IMP3 mRNA、PD-L1 mRNA 呈明显负相关(P<0. 05);免疫组化结果显示,乳腺癌组织IMP3、PD-L1、CD44v6 呈阳性表达,且IMP3、PD-L1 表达越高,TNM 分期越晚,肿瘤分化程度越低、越容易发生淋巴结和远处转移(P<0. 05);双荧光素酶实验验证了miR-34a-5p 对IMP3、PD-L1 的靶向调控作用;与control 组和miRNC组相比,miR-34a-5p 组的细胞活力、单克隆形成数目、划痕愈合率、细胞侵袭数目、IMP3、PD-L1、CD44v6、MMP-2、MMP-9 蛋白表达明显降低,E-cadherin 蛋白表达明显升高,与miR-NC+pcDNA-NC 组相比,miR-NC+IMP3 组和miR-NC+PD-L1 组细胞活力、单克隆形成数目、划痕愈合率、细胞侵袭数目、IMP3、PD-L1、CD44v6、MMP-2、MMP-9 蛋白表达明显升高,E-cadherin 蛋白表达明显降低,与miR-34a-5p+pcDNA-NC 组相比,miR-34a-5p+IMP3 组和miR-34a-5p+PD-L1 组细胞活力、单克隆形成数目、划痕愈合率、细胞侵袭数目、IMP3、PD-L1、CD44v6、MMP-2、MMP-9 水平升高,E-cadherin 水平降低(P<0. 05)。 结论　miR-34a-5p 能够通过靶向调控IMP3、PD-L1 表达抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭和上皮间质化(EMT)。

摘要: 目的　探讨扶正抗癌汤(Fuzheng kangai decoction,FZKAD)含药血清对人卵巢癌HO-8910PM 细胞增殖、凋亡与周期进程的影响。 方法　SD 大鼠40 只随机分为对照组及FZKAD 低(4. 725 g/ kg)、中(9. 45 g/ kg)、高(18. 9 g/ kg)剂量组,灌胃给药7 d 后制备含药血清,用于HO-8910PM 细胞的培养。分别采用噻唑蓝(MTT)实验检测细胞增殖能力,平板克隆形成实验检测克隆形成能力,膜联蛋白V(Annexin V) -异硫氰酸荧光素/ 碘化丙啶(FITC/ PI)双染法流式细胞术检测细胞凋亡,PI 单染法流式细胞术检测细胞周期进程,Western blot 法检测蛋白表达水平。 结果　与对照组比较,除低、中剂量组处理24 h 后的细胞存活率无显著性降低外( P>0. 05),其余各组处理24、48 及72 h 后的细胞存活率均显著性降低(P<0. 05 或P<0. 01),且各剂量组细胞克隆形成能力也显著降低(P<0. 01);与对照组比较,低、中、高剂量组的细胞凋亡率及P53、Bcl-2 相关X 蛋白(Bax)表达水平增加(P<0. 05或P<0. 01),而B 淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白表达水平降低(P<0. 01);与对照组比较,低、中、高剂量组G₀ / G₁ 期细胞百分比增加(P<0. 05 或P<0. 01),而S 期、G2 / M 期细胞百分比及细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)、CDK6 蛋白表达水平降低(P<0. 05 或P<0. 01)。 结论　FZKAD 含药血清对人卵巢癌HO-8910PM细胞的增殖具有抑制作用,该作用与诱导凋亡及周期进程阻滞有关。

摘要: 目的　观察腺嘌呤诱导慢性肾病大鼠模型肾铁死亡相关因子的变化并探讨铁死亡参与慢性肾病进展的机制。 方法　20 只大鼠随机分为对照组(Con)和模型组(CKD),CKD 组予以2. 5%腺嘌呤灌胃诱导,所有大鼠于6 周末处死。留取大鼠血样检测血清尿素氮(BUN)、肌酐(Scr);HE 染色观察肾病理改变;Masson 染色观察肾小管间质纤维化情况;检测肾组织铁含量、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量;免疫组化染色观察过氧化物酶4(GPX4)以及4-羟基壬烯醛(4-HNE)蛋白的表达;Western blot 法检测铁死亡相关蛋白胱氨酸转运蛋白系统Xc- 亚基SLC7A11、过氧化物酶4(GPX4)以及铁代谢相关蛋白转铁蛋白受体1(TFR-1)、铁蛋白重链(FTH)、铁蛋白轻链(FTL)、膜铁转运蛋白(FPN)的蛋白表达情况。分析铁含量、MDA 含量、GSH 水平与肾间质纤维化的相关性。 结果 与Con 组相比,CKD 组大鼠血清 BUN、Scr 均明显增加(P<0. 05),HE 染色和Masson 染色见明显肾小管扩张及间质纤维化;铁含量以及MDA 含量明显升高(P<0. 05),GSH 含量明显降低(P<0. 05);免疫组化显示,与Con 组相比,CKD 组4-HNE 蛋白表达明显增加,GPX4 蛋白表达明显减少。Western blot结果显示,与Con 组相比,CKD 组的SLC7A11、GPX4、TFR-1、FPN 蛋白表达明显减少,而FTH、FTL 蛋白表达明显增加。相关性分析提示铁含量、MDA含量与肾纤维化相对面积(%)呈正相关、GSH 含量与肾纤维化相对面积(%)呈负相关。 结论　在腺嘌呤诱导的CKD 大鼠模型中存在铁死亡,并可能通过GSH-GPX4 轴参与CKD 肾纤维化进展。

摘要: 目的　探讨熟地黄多糖(RGP)调控长链非编码RNA(lncRNA)母系表达基因3(MEG3)对碘乙酸钠(MIA)诱导的骨关节炎(OA)软骨细胞凋亡的影响。 方法　培养大鼠软骨细胞,不同浓度MIA(0、1、2、4、8 μmol/L)诱导建立软骨细胞损伤模型,并给予不同浓度RGP(50、100、200、400、800 mg/ mL)处理筛选合适的实验浓度。实验分为正常组、MIA 组、RGP 组、RGP+si-NC 组、RGP+si-MEG3 组,Cell Counting Kit-8(CCK-8)检测细胞活力;Hoechst 33258 染色及流式细胞术检测细胞凋亡情况;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测细胞中MEG3、金属蛋白酶13(MMP-13)、Ⅱ型胶原α1(COL2A1)和蛋白聚糖(ACAN)mRNA 水平;蛋白免疫印迹(Western blot)检测细胞中磷脂酰肌醇3 激酶(PI3K)、p-PI3K、丝/ 苏氨酸激酶(AKT)、p-AKT、BAX、BCL-2、caspase3 蛋白表达水平。 结果 MIA 以剂量依赖性方式降低软骨细胞活力,诱导细胞凋亡,并降低MEG3 和COL2A1 mRNA、ACAN mRNA 水平,升高MMP-13 mRNA 水平(P<0. 05)。100、200、400、800 mg/ mL RGP 可升高软骨细胞活力及MEG3 水平(P<0. 05)。与正常组相比,MIA 组细胞活力、MEG3、COL2A1 mRNA、ACAN mRNA 和p-PI3K/ PI3K、p-AKT/ AKT、BCL-2 蛋白水平降低,细胞凋亡率、MMP-13 mRNA 和BAX、caspase3 蛋白水平升高(P<0. 05);与MIA 组相比,RGP 组细胞活力、MEG3、COL2A1 mRNA、ACAN mRNA 和p-PI3K/ PI3K、p-AKT/ AKT、BCL-2 蛋白水平升高,细胞凋亡率、MMP-13 mRNA 和BAX、caspase3 蛋白水平降低(P<0. 05);敲低MEG3 可减弱RGP 对MIA 诱导的软骨细胞损伤的保护作用。 结论　RGP 可促进软骨细胞ECM 合成,并抑制细胞凋亡,减轻MIA 诱导的软骨细胞损伤,其作用机制可能与上调MEG3 表达,诱导PI3K/ AKT 通路活化有关。

摘要: 目的　探讨骨痹散对骨关节炎的治疗效果及其机制。 方法　将新西兰大白兔分为空白组、模型组、阳性组(双氯芬酸钾凝胶)与骨痹散组,每组6 只,使用改良Hulth 法构建兔膝骨关节炎模型,造模8 周后给药4 周。对软骨组织进行甲苯胺蓝染色后测量软骨厚度,番红-O 染色后进行Mankin 评分;使用Tunel 荧光染色法检测软骨组织中软骨细胞的凋亡情况;使用免疫组织化学法检测软骨组织中Col Ⅱ与Col X 蛋白的表达水平;使用Western blot 法检测软骨组织中Bax、cleaved-caspase-3、p-ERK、p-p38、p-Smad2、p-Smad3、TGF-β1 的蛋白表达水平。 结果 与空白组相比,模型组软骨组织厚度减少,Mankin 评分升高,软骨细胞凋亡率升高,Col Ⅱ、p-Smad2、p-Smad3、TGF-β1蛋白表达水平减低,Col X、Bax、cleaved-caspase-3、p-ERK、p-p38 蛋白表达升高。与模型组相比,阳性组与骨痹散组软骨组织厚度增加,Mankin 评分降低,软骨细胞凋亡率降低,Col Ⅱ、p-Smad2、p-Smad3、TGF-β1 蛋白表达水平升高,Col X、Bax、cleaved-caspase-3、p-ERK、p-p38 蛋白表达降低。 结论　骨痹散对骨关节炎具有良好的治疗效果,能通过减少软骨细胞凋亡,稳定软骨组织结构,促进软骨组织损伤后再生与修复,其机制可能与抑制ERK/ P38 通路、激活TGF-β/ Smad 通路有关。

摘要: 目的　通过建立大鼠慢性化脓性颌骨骨髓炎模型,探究小柴胡汤对慢性化脓性颌骨骨髓炎愈合的影响。 方法　选用65 只SPF 级SD 大鼠,通过骨钻制备出圆形骨缺损滴入金黄色葡萄球菌建立慢性化脓性颌骨骨髓模型。1 个月后随机抽取5 只检测造模结果。模型建立成功后,将剩余大鼠随机均分为4 组:A 组 清创术+生理盐水;B 组 清创术+小柴胡汤;C 组 清创术+头孢;D 组 清创术+小柴胡汤+头孢。给药后2、4、8 周每组分别处死5只大鼠,CBCT 检测骨缺损范围、酶联免疫吸附法检测炎症因子IL-6、IL-1β 水平和免疫组化检测BMP-2,用统计学分析所得的数据。 结果　CBCT:与A 组比较,B 组、C 组、D 组在给药后2、4、8 周骨缺损范围均减小(P<0. 05),与C组相比,B 组、D 组骨缺损范围减小(P<0. 05),与B 组比较,D 组骨缺损范围减小(P<0. 05)。炎症因子IL-6、IL-1β水平:与A 组比较,B 组、C 组、D 组在给药后2、4、8 周IL-6、IL-1β 水平均降低(P<0. 05),B 组、D 组IL-1β 水平均较低于C 组(P<0. 05),D 组IL-6 水平低于C 组(P<0. 05),但B 组与C 组IL-6 水平虽然有差异但无统计学意义( P>0. 05),与B 组比较,D 组IL-1β、IL-6 水平均低(P<0. 05)。BMP-2 免疫组化检测:A 组、B 组、C 组、D 组均出现阳性表达,与A 组比较,B 组、C 组、D 组在给药后2、4、8 周平均光密度高(P<0. 05),B 组、D 组平均光密度高于C 组(P<0. 05),与B 组比较,D 组较高(P<0. 05)。 结论　1. 用金黄色葡萄球菌在大鼠下颌骨上成功建立慢性化脓性颌骨骨髓炎模型;2. 小柴胡汤对大鼠慢性化脓性颌骨骨髓炎有一定的治疗作用,当与头孢联合应用时治疗效果优于小柴胡汤或头孢单独治疗效果。

摘要:实验动物屏障环境设施运行过程中的病原微生物污染严重影响研究人员和动物健康或导致生物安全事故,干扰实验结果或导致实验中断。然而,在其长期运行中杜绝污染并非易事,可因管理和操作细节的疏漏而发生。病原微生物污染是长期困扰实验动物管理者的难题。笔者从事实验动物屏障设施运行管理多年,深感细节管理在防止病原体微生物污染中的重要性,为此,根据多年的工作经验,结合设施布局、人员管理等细节问题,加以总结,以供同行探讨和借鉴。

摘要:恶病质是一种涉及多个器官的多因素代谢障碍综合征,是恶性肿瘤患者常见的致死因素。临床最主要的症状为肌肉萎缩和丢失,其机制与蛋白质过度降解及合成障碍相关。近年来中医药凭借副作用少以及多靶点、多通路干预疾病等显著优势,在防治肿瘤恶病质肌肉萎缩的方面具有独特价值。本文主要是从不同信号介导的肌肉蛋白降解及合成对肿瘤恶病质肌肉萎缩的影响及中医药的调节作用展开论述,以期为中医药治疗肿瘤恶病质肌肉萎缩的临床应用和研究提供一定的参考。

摘要:血管内皮细胞是覆盖于血管壁表面的一类薄层扁平上皮细胞,作为一个效应器官,它可以对各种体内外刺激作出反应,释放血管活性物质来调节机体内环境稳定。然而,在多种致病因素的诱导下内皮细胞易发生功能障碍,表现为血管舒缩功能受损、血栓形成和动脉壁增殖等。研究表明,血管内皮功能障碍(vascular endothelial dysfunction,VED)与动脉粥样硬化、心力衰竭等心血管疾病的发生发展密切相关,因此,有效评估内皮功能对心血管疾病的防治至关重要。本文就血管内皮的功能、调控原理及其与心血管疾病的关系进行综述,并对现有内皮评估技术的基本原理和优缺点进行总结,助力于心血管疾病的诊治。

摘要:越来越多的研究表明长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)在内皮细胞损伤、炎症、癌症及自身免疫性疾病中发挥重要作用。系统性硬化症(systemic sclerosis,SSc)是一种发病机制尚未明确的自身免疫性疾病,而研究人员发现lncRNA 可能通过调控免疫失调、微血管病变以及纤维化等过程参与SSc 的发生和发展,还可能作为SSc 的生物标志物来预测疾病的发生、活性程度以及进展阶段,因此可为SSc 提供新的治疗靶点。

摘要:中药毒性问题成为制约中医药国际化的主要障碍。合理的毒性中药分级策略是解决该问题的主要途径之一。现有的中药毒性分级仍沿用传统分级法,该分级法虽对中医临床用药具有合理的指导作用,但缺乏定量数据,不够精准,出现同种药物不同书籍对毒性分级记载不同的现象。毒性分级现代研究主要有以口服生药LD50 值划分、多指标综合分类法、基于“物质-功效-毒性”有毒中药评价模式分级方法、沿用现代毒理研究模式等方法,虽然实现了中药毒性分级的定量标准,但脱离中医药理论指导,且与临床实际相差较大,未能体现中医药临床复方用药的实质。在梳理前人中药毒性研究的基础上,提出基于数据挖掘结合毒理研究的赋值评分分级法。该方法基于数据挖掘(毒性中药的古文献毒性记载、临床报道和体内外实验研究)综合现代毒理研究成果,对各项进行赋值加权评分,提出基于文献发掘的毒性中药分级方法,评分越高,毒性越大,并以附子为例,开展其毒性等级确定。本分级方法注重临床复方用药的优势,对临床具有一定的指导作用,可反映毒性大小,但该分级方法内容仍需进一步细化。随着该毒性中药分级法的逐步完善、细化,以期为临床毒性中药的合理应用及中医药国际化提供一定的参考。