摘要: 目的　探讨中药松弛膏联合跑台运动康复干预方案对关节挛缩大鼠关节纤维化中ROM、IL-6、IL-17和TGF-β1 表达的影响。 方法　44 只Wistar 大鼠,随机取8 只大鼠为正常对照组(NC 组),其余36 只大鼠建立关节挛缩模型。将32 只造模成功的大鼠分为模型对照组(MC 组)、中药松弛膏干预组(SC 组)、跑台运动康复干预组(RE 组)、中药松弛膏+跑台运动康复干预组(SR 组),每组8 只。MC 组不进行任何干预;SC 组给予药物涂抹按摩;RE 组给予跑台训练;SR 组给予跑台训练后再进行药物涂抹按摩,干预均为每天1 次,每周6 d。于干预前、干预42 d 后测量所有大鼠ROM;干预42 d 后采用ELISA 法检测大鼠IL-6、IL-17 含量及TGF-β1 含量。 结果　干预前模型组大鼠ROM 与NC 组相比显著降低(P<0. 05);干预42 d 后,与MC 组ROM 相比,SR 组ROM 和SC 组ROM 显著增加,差异均具有统计学意义(P<0. 05)。干预后与MC 组比,SC 组、RE 组及SR 组IL-6、IL-17 含量显著降低,其中SR 组显著低于SC 组及RE 组(P<0. 05);SR 组TGF-β1 含量均较MC 组、SC 组及RE 组显著降低(P<0. 05)。 结论 中药松弛膏联合跑台运动康复干预能协同改善关节挛缩大鼠的关节活动度,减轻炎症因子释放,减少与纤维化有关的TGF-β1 的分泌,从而改善关节挛缩大鼠关节纤维化的程度。

摘要: 目的　观察自噬激活剂———雷帕霉素对缺氧缺糖/ 复氧复糖HT22 细胞焦亡的影响。 方法　取对数生长期的HT22 细胞,随机分为4 组:正常组、模型组、溶剂对照组、雷帕霉素组,除正常组外,其余各组细胞均进行缺氧缺糖6 h、复氧复糖24 h 处理。倒置显微镜观察细胞形态,CCK-8 法检测细胞活性,LDH 法检测细胞损伤情况,免疫荧光染色法观察细胞内NLRP3 阳性表达,Western blot 法检测细胞内NLRP3、Cleaved Caspase-1、IL-18、IL-1β 蛋白表达。 结果　正常组细胞胞体饱满、折光性强,细胞突触较多且相互间连接成网状;模型组及溶剂对照组细胞皱缩、变圆,大量脱落、漂浮,细胞间连接大幅减少;雷帕霉素组细胞损伤情况较模型组显著缓解。与正常组比较,模型组细胞活力显著降低,LDH 漏出率、NIRP3 阳性率、细胞内NLRP3、Cleaved Caspase-1、IL-18、IL-1β 蛋白表达均显著升高(P<0. 01);与模型组比较,雷帕霉素组细胞活力显著升高,LDH 漏出率、NIRP3 阳性率、细胞内NLRP3、Cleaved Caspase-1、IL-18、IL-1β 蛋白表达均显著降低(P<0. 01)。溶剂对照组与模型组比较无显著差异(P>0. 05)。 结论　雷帕霉素可能通过抑制细胞焦亡发挥对缺氧缺糖/ 复氧复糖HT22 细胞的保护作用。

摘要: 目的　探讨牙本质基质蛋白1 糖基化形式(proteoglycan form of dentin matrix protein 1,DMP1-PG)在下颌骨骨损伤中的重要作用。 方法　分别构建对照组野生型(wild type,WT)小鼠及实验组牙本质基质蛋白1 糖基化点突变(S89G-DMP1)小鼠下颌骨骨缺损模型。模型构建完成后7 d、14 d 及28 d 收取样本,显微计算机断层micro-CT 扫描,组织切片及染色,观察二者之间组织愈合差异;通过免疫荧光染色,观察成骨相关蛋白在组织损伤区的表达变化差异;应用实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)技术,对比实验组与对照组在术后成骨相关基因表达变化情况;分别提取实验组与对照组颌骨骨髓间充质干细胞,进行成骨诱导分化,观察二者之间成骨分化能力差异。 结果　同对照组相比,实验组小鼠下颌骨损伤愈合能力明显减弱,骨损伤区成骨相关蛋白表达减低,术后7 d 及14 d 成骨相关基因表达水平较对照组明显下调。通过提取两组小鼠下颌骨骨髓间充质干细胞进行成骨诱导分化,结果显示同对照组相比,实验组小鼠骨髓间充质干细胞成骨向分化能力明显减弱。 结论　DMP1-PG 参与颌骨损伤修复,缺乏DMP1-PG 可导致小鼠颌骨缺损愈合延迟。

摘要: 目的　比较香烟烟雾(cigarette smoke,CS)、肺炎克雷伯杆菌(Klebsiella pneumoniae,KP)和CS 联合KP(CS+KP)三种方法建立的慢性阻塞性肺疾病(COPD)小鼠模型肺小血管重塑变化,为进一步研究提供依据。 方法　将72 只雄性小鼠随机分为正常组(Normal 组)、细菌组(KP 组)、香烟烟雾组(CS 组)、香烟烟雾联合细菌组(CS+KP 组),每组18 只。CS 组采用CS 暴露(3000±500 ppm),KP 组采用KP 稀释液(5×109 CFU/ L,每7 d 一次)滴鼻,CS+KP 组给予联合处理,Normal 组给予生理盐水滴鼻,共8 周。停止刺激后观察至第16 周,分别于第4、8、16周结束后取材。检测肺功能呼气中期流速(50% expiratory flow,EF50)、潮气量(tidal volume,TV),观察肺组织病理及肺小血管结构,包括管壁厚度百分比(WT%)、管腔面积百分比(LA%)和管壁面积百分比(WA%)变化,免疫组化法检测肺组织血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达。 结果　与Normal 组比较,CS 组TV 第8~12 周降低,EF50 第8~16 周降低(P<0. 05),WT%第8~16 周升高,WA%及VEGF 蛋白表达仅第8 周升高、LA%仅第8 周降低(P<0. 05);KP 组肺功能无显著变化,WT%仅第8 周升高,LA%第8 周降低(P<0. 05);CS+KP 组TV 第4~12 周降低,EF50 第8~16 周降低(P<0. 05),WT%、WA%、VEGF 蛋白表达在第4~16 周升高,LA%第4~16周降低(P<0. 05)。与CS 组比较,CS+KP 组WT%及VEGF 蛋白表达第8~16 周升高,WA%第16 周升高,LA%第16周降低(P<0. 05)。与KP 组比较,CS+KP 组WT%、WA%及VEGF 表达第8~16 周升高,LA%第4~16 周降低(P<0. 05);CS 组WT%第8 周升高、LA%第8 周降低,VEGF 蛋白表达第16 周升高(P<0. 05)。 结论　CS、KP 及其联合刺激8 周小鼠均出现肺泡破裂、炎性细胞浸润、肺血管重塑等COPD 病理特征,但各有特点:CS 组第8 周出现肺功能下降、肺泡结构断裂融合增厚,并在第16 周仍存在,但肺血管重塑仅第8 周明显;KP 组肺功能下降不明显,肺组织炎症细胞浸润明显并持续存在,肺泡结构改变及肺血管重塑仅第8 周存在;CS+KP 组第4 周即出现肺功能下降、肺泡结构的破坏及肺血管重塑,第16 周仍持续存在。

摘要: 目的　从氧化损伤途径及组织病理学层面评价小肠缺血时间对小肠缺血再灌注模型的影响,为该疾病的研究提供建模条件及基础数据。 方法　24 只雄性SD 大鼠随机分为假手术组、缺血30 min 组、缺血1 h 组、缺血2 h 组,各造模组结扎肠系膜上动脉使缺血一定时间后,再灌注4 h 诱导缺血再灌注损伤模型。恢复供血4 h后大鼠安乐死,取10%肠组织匀浆后通过试剂盒对应检测,比较小肠组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽(GSH)水平,HE 染色观察肠组织形态,并测量小肠绒毛高度及黏膜厚度。 结果　与假手术组比较,缺血30 min 组及缺血1 h 组的SOD、GSH-Px、MDA 水平显著升高(P<0. 05),缺血30 min、1 h 及2 h 均可使炎性细胞浸润加重,病理Chiu’s 评分显著升高(P<0. 05),此外,缺血1 h 及2 h 还可显著降低小肠绒毛高度及黏膜厚度(P<0. 01)。但缺血2 h 可引起动物死亡(死亡率33. 3%)。 结论　缺血1 h 再灌注4 h 建立的小肠缺血再灌注模型的氧化指标及肠道组织形态最为理想,该条件下建立的小肠缺血再灌注模型适用于疾病研究及药物开发。

摘要: 目的　探讨脾肾阳虚模型的中医证候表现并观察当归生姜羊肉汤对脾肾阳虚IBS-D 雌性大鼠中医证候的改善作用。 方法　以腺嘌呤和冰番泻叶联合灌胃制作脾肾阳虚雌性大鼠模型,成模后随机分成5 组,分别为低、中、高3 个剂量的当归生姜羊肉汤组,真武汤为阳性组,脾肾阳虚模型组,另设空白对照正常组。连续给药4周,每天记录各组大鼠的饮水量和摄食量,每周对其体重和肛温进行测量,于实验结束对其中医一般证候进行评价、做旷场实验和在同一光线、同一位置对大鼠的舌、尾、足底进行拍照并分析,综合探讨当归生姜羊肉汤对脾肾阳虚IBS-D 雌性大鼠中医证候的改善作用。 结果　低、中、高3 个剂量组与模型组相比,精神状态、眼睛、耳尾颜色、毛发、粪便都有所改善,其中精神状态、眼睛、毛发、粪便都有显著性差异(P<0. 05),各组的体重和肛温都在逐渐上升,于实验结束时各组之间无显著性差异(P>0. 05),各组(除正常组)大鼠的饮水量趋势线逐渐下降,但与正常组大鼠相比还是明显较高,具有显著性差异(P<0. 05),通过旷场实验发现,低、中、高3 个剂量组在中心区域和周边区域的时间、距离、快速移动时间、慢速移动时间与模型组比较都有明显提高,其中中、高剂量大鼠的在中心区域和周边区域的时间、中心区域移动的距离、在周边休息的时间与模型组都具有显著性差异(P<0. 05),从RGB 值数据来看,低、中、高剂量组大鼠尾部、足底、舌面的R、G、B 值与模型组比较更高,其中尾部的R、B 值具有显著性差异(P<0. 5),高剂量组大鼠的G 值更高,也具有显著性差异(P<0. 5),其中足底的R 值具有显著性差异(P<0. 5),同时,阳性组和中、高剂量组的G 值比模型组更高,具有显著性差异(P<0. 5),中、高两个剂量组大鼠舌面的R 值更高,具有显著性差异(P<0. 05),提示灌胃当归生姜羊肉汤均改善IBS-D 大鼠尾部、足底、舌面的色泽。 结论　当归生姜羊肉汤对脾肾阳虚IBS-D 雌性大鼠中医证候的改善作用,以高剂量当归生姜羊肉汤组的改善作用最强。

摘要: 目的　探讨萆薢分清颗粒对阿霉素肾病大鼠蛋白尿及肾组织足细胞足糖萼蛋白(podocalyxin)、α-辅肌动蛋白-4(α-actinin-4)的影响。 方法　将60 只SPF 级SD 大鼠,随机分为空白组12 只和造模组48 只,造模组大鼠采用分两次尾静脉注射的方法建立阿霉素肾病大鼠模型。造模成功后随机分为模型组、萆薢分清颗粒(6. 56 mL/ kg)组(中药组)、泼尼松组(6. 3 mL/ kg)、萆薢分清颗粒+泼尼松组(结合组)进行灌胃,空白组及模型组予以同等量生理盐水灌胃,每日1 次,连续灌胃4 周。给药结束后检测大鼠24 h 尿蛋白定量(24 h-UTP)、血清总胆固醇(TC),白蛋白(ALB)水平;采用苏木素-伊红(HE)染色、马松(Masson)染色观察肾组织病理形态学变化,应用免疫组化法(IHC)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠肾组织中足细胞相关蛋白podocalyxin、α-actinin-4 表达水平。 结果　空白组比较,模型组大鼠24 h-UTP、血清中TC 显著升高(P<0. 05);ALB 显著降低(P<0. 05);肾小球可见局灶节段性瘢痕形成,系膜细胞及系膜基质增生,肾小管空泡变性,管腔内可见蛋白管型,间质纤维细胞增生伴炎性细胞浸润;podocalyxin 阳性表达明显减弱,α-actinin-4 呈强阳性表达(P<0. 05);podocalyxin 蛋白表达量显著下降 (P<0. 05),α-actinin-4 蛋白表达量显著升高(P<0. 05)。与模型组比较,各治疗组24 h-UTP,血清TC 水平均有不同程度的下降,ALB 升高(P<0. 05);肾小球及小管间质病变较轻,少许肾间质水肿、纤维化,伴有少量炎性细胞浸润;podocalyxin 阳性表达增强,α-actinin-4 阳性表达减弱(P<0. 05);podocalyxin 蛋白表达量显著升高 (P<0. 05),α-actinin-4 蛋白表达量显著降低(P<0. 05)。 结论　萆薢分清颗粒可通过上调podocalyxin、下调α-actinin-4 表达水平,从多靶点修复受损的足细胞,减少尿蛋白排泄量,保护肾。

摘要: 目的　建立国内外首个比较医学大数据平台服务系统,为研究人员获得有效的实验动物和动物模型科学数据提供服务,为决策者提供数据支撑,解决研究中对于数据的获取及分析问题。 方法　制定元数据和数据采集相关表格,对实验动物相关数据、比较医学相关数据资源进行整合。集成大规模实验动物、动物模型、表型数据、动物实验数据,构建基于PHP(hypertext preprocessor)的比较医学大数据平台。 结果　比较医学大数据平台(https:/ / com-med. org. cn/ )基于国内外比较医学相关研究成果,系统梳理了实验动物、动物模型和动物实验数据,形成多维度跨时空数据比较分析结果。以比较医学科学数据为主体内容,提供实验动物、人类疾病、比较医学、动物实验和相关产品数据。 结论　本文建立了比较医学大数据平台,实现了科学数据资源的统一保存及比较医学大数据的集成共享。

摘要: 目的　研究银耳多糖的急性毒性、遗传毒性及亚慢性毒性,为银耳多糖开发利用提供科学数据。 方法　依据食品安全国家标准,对银耳多糖进行急性经口毒性试验、三项遗传毒性试验和90 d 经口毒性试验。 结果　小鼠急性经口LD50 >12. 0 g/ (kg·bw),属实际无毒级;三项遗传毒性试验结果均为阴性;大鼠90 d 经口毒性实验中,各剂量组动物生长发育良好,体重、增重、进食量、食物利用率、血液学、血生化、尿常规、脏器湿重及脏/体比等指标与阴性对照组比较均无显著性差异(P>0. 05),组织病理学观察未见与试验因素有关的变化,确定该银耳多糖最大未观察到有害作用剂量(NOAEL)为:雄性动物为7. 21 g/ (kg·bw),雌性动物为8. 18 g/ (kg·bw)。 结论　在本次条件下,银耳多糖未见急性毒性、遗传毒性及亚慢性毒性。

摘要: 目的　实验动物质量直接关系着研究和评价数据的准确性和可重复性,亦是公共卫生安全的主要部分。 方法　针对高校动物中心来源复杂、人员流动性大、需求多样等特点,从管理体系建立和病原检测角度提升实验动物质量。 结果　建立并执行了实验动物准入制度、哨兵动物监测制度、动物用品监测制度等系列管理体系,自2018 年以来,检测了1481 批次非活体动物样本,106 批次病原阳性,检测了395 例活体动物样本,38 例病原阳性,检测了363 份动物相关用品。 结论　禁止了数批烈性传染病病原阳性动物的进入、严密监视了条件致病菌阳性动物的来源单位、及时调整和更新了大小鼠监测病原谱,从而提升了实验动物质量。

摘要:本文总结了目前常见的异种蛋白诱导法建立IgA 肾病(IgAN)动物模型的各种造模方法,指出其各自的特色与不足及各模型间的异同点,并提出了模型改良思路,以期为建立更加安全、稳定、成功率高、可重复性强、且与人类更为相似的IgAN 动物模型提供思路。

摘要:骨性关节炎(osteoarthritis,OA)是致残率最高的慢性疾病,由于肥胖率增加和老龄化的到来,OA 对人们的生活和社会资源产生越来越大的负面影响。随着高通量技术的发展,非编码RNA 的研究逐渐成为OA 领域的热点,近来的研究表明软骨细胞凋亡及细胞外基质的降解是OA 主要的病理基础,非编码RNA 与软骨细胞存在密切联系,但其分子机制尚未完全阐明。本文就非编码RNA 对软骨细胞和胞外基质的影响做一综述,以期进一步了解软骨退变的机制,为OA 的早期诊疗提供新思路。

摘要:动脉粥样硬化是脂质和复合糖类沉积于大中动脉内壁的慢性代谢性疾病,其病机复杂且受多种危险因素影响,是心血管疾病的主要病理基础。近些年研究发现,肠道内的微生物可以通过多种途径如调节宿主代谢和炎症影响动脉粥样硬化进程,通过饮食干预、益生菌、益生元、粪菌移植等方式维持肠道菌群的动态平衡能够有效延缓动脉粥样硬化进展。其中下一代益生菌包括嗜黏蛋白阿克曼菌、小克里斯滕森氏菌、普拉梭菌等非传统肠道菌群及经过基因编辑的设计型益生菌成为新的预防和治疗工具,是防治动脉粥样硬化的潜在的诊断和药理学靶点。

摘要:新型冠状病毒肺炎(corona virus disease,COVID-19)疫情在全球持续蔓延,严重影响了经济发展和人民生活质量,对世界公共卫生安全造成了极大威胁。严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)主要通过飞沫、接触和气溶胶进行传播,此外,流调显示公共卫生间可能是部分确诊病例的风险点,有研究者在COVID-19 患者粪便中检测到病毒,但是SARS-CoV-2 是否存在消化道传播的可能,目前尚无定论。基于此,本文汇总COVID-19 病例的消化道排毒情况,总结SARS-CoV-2 消化道感染动物模型的研究进展,探讨SARS-CoV-2 通过消化道途径传播的可能性,并进行风险评估,为疫情防控提供建议。

摘要:肺癌是世界上发病率和死亡率最高的癌症之一,而非小细胞肺癌则是肺癌中恶性程度和占比相对较高的亚型。近年来,非小细胞肺癌的免疫治疗成为热点方向,涌现出大量的免疫单药及联合治疗方案,这些方案的开展亟需临床前验证。因此,提供可靠的临床前实验动物模型以评估治疗效果、探索最佳用药方案以及推动个体化医疗是目前急需解决的问题。基于免疫系统人源化的异种移植小鼠模型由于同时具有人体免疫系统和肿瘤细胞,能够高度模拟人体内肿瘤免疫微环境,在肿瘤免疫治疗研究中具有广阔的应用前景。本文主要从人源化模型在非小细胞肺癌治疗的应用方面进行综述,为各种非小细胞肺癌免疫治疗方案的临床前实验提供指导,以期推进这些方案的临床试验。

摘要:外泌体是由多种细胞分泌的纳米囊泡,能够传递蛋白质、脂质和核酸等生物活性大分子,在细胞间信息传递中起着重要作用。越来越多的研究表明,某些类型细胞如间充质干细胞、NK 细胞和中性粒细胞等细胞来源的外泌体具有治疗潜力,参与调节免疫系统,能够增强免疫细胞的杀伤能力;另外从感染细胞释放的外泌体也能促进抗原提呈和免疫细胞活化,激活多种细胞免疫因子,介导细胞免疫反应。本文就外泌体在抗病毒感染、细菌感染和真菌感染中的直接或间接作用进行了综述,为临床应用提供依据。

摘要:动物炎症性疾病在疾病中比例最大,无论是传染性疾病还是免疫性疾病在临床上都会有炎症的发生。为了更加深入的了解疾病发生发展的机制以及寻找更好的预防治疗途径,采用体内试验非常必要。小鼠模型因其经济便宜,饲养周期短,操作简单以及与人类基因、生理结构等方面的相似性而广泛运用。本文以此为背景,主要围绕肺炎模型、结肠炎模型以及乳房炎模型的小鼠造模方法研究进展展开综述,以期为后续研究提供便捷。

摘要:非编码RNA(ncRNA)包括微RNA(miRNA)、长链非编码RNA(lncRNA)和环状RNA(circRNA)调控心肌发育、分化、代谢、死亡和重构等病理生理过程,因此可能参与扩张型心肌病(DCM)的发病机制。近年来,关于ncRNA 在DCM 中的研究主要集中于表达谱分析、标志物筛选和作用机制等方面,本文就此做一综述。概括而言,虽然大量研究已从循环血和心肌组织中筛选出一批有潜力的差异表达ncRNA,但目前仅对miRNA 和lncRNA 作为DCM 的诊断和预后标志物及治疗靶点进行了鉴定,迄今对于circRNA 在DCM 中的作用却不明确。考虑到DCM 的病因复杂且具有异质性,今后研究应从更多临床样本中挖掘信息并通过基础研究进一步验证。阐释ncRNA 尤其是circRNA 在DCM 中的潜在作用及机制将可为DCM 的诊疗提供新方法和理论依据。