摘要: 目的 观察 N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸(Ac-SDKP)对实验性矽肺纤维化进程中肺泡 II 型上皮细胞细胞衰老的作用及其机制。 方法 SPF 级 Wistar 大鼠分组为对照组、矽肺模型组和 Ac-SDKP 治疗组。肺泡 II 型上皮 MLE-12 细胞分组为空白对照组、SiO2 组、Ac-SDKP 组和 SiO2+Ac-SDKP 组。天狼星红染色显示胶原分布与沉积,免疫荧光染色检测肺组织及 MLE-12 细胞中 p21 的定位与表达;免疫印迹法检测 I 型胶原蛋白(Col I) 、p-毛细血管扩张性共济失调(ATR) 、p-p53、p-毛细血管扩张性共济失调突变激酶(ATM) 、矽肺模型组大鼠肺组织形成典型的矽结节伴胶原沉积;与矽肺模型组相比较,Ac-SDKP 治疗组大鼠肺内矽结节数量和面积显著减少。免疫荧光染色结果显示 p21 蛋白主要定位于肺泡 II 型上皮细胞。 与对照组比较,矽肺模型组肺组织内 Col I、p-ATM、p-ATR、p-p53、p21、p16 蛋白表达水平上调,而 Ac-SDKP 治疗组肺组织内 Col I、p-ATM、p- ATR、p-p53、p21、p16 蛋白表达水平下调(P<0.05) 。与空白对照组比较,SiO2 组的 MLE-12 细胞 Col I、p-ATM、p- ATR、p-p53、p21、p16 蛋白表达水平上调;与 SiO 组比较, SiO2+Ac-SDKP 组 Col I、p-ATM、p-ATR、p-p53、p21、p16 蛋白表达水平下调(P<0. 05) 。 结论 Ac-SDKP 能够通过抑制肺泡 II 型上皮细胞衰老信号的活化从而抑制胶原沉积。

摘要: 目的 研究七叶皂苷钠( SA) 通过 p38MAPK 通路减少大鼠心肌梗死面积和无复流面积的作用。 方法 成年雄性 SD 大鼠随机分为对照组、缺血再灌注(I/ R)组、I/ R+SA 组、空白腺病毒+I/ R 组、p38MAPK 腺病毒 +I/ R 组、空白腺病毒+I/ R+SA 组、p38MAPK 腺病毒+I/ R+SA 组,采用左冠状动脉前降支结扎的方式建立心肌 I/ R 模型,给予腹腔注射 SA 或心肌局部多点注射腺病毒干预,硫黄素 S 染色检测心肌无复流面积、氯化硝基四氮唑蓝染色检测心肌梗死面积、TUNEL 染色检测心肌细胞凋亡率,酶联免疫吸附法(ELISA)检测白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的含量,Western blot 检测 bcl-2 相关 X 蛋白(Bax)、裂解型含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved caspase-3)、p-p38MPAK 的表达量。 结果 与 I/ R 组比较,I/ R+SA 组大鼠心肌无复流面积、梗死面积明显缩小,细胞凋亡率、 IL-1β、TNF-α、 ICAM-1 的含量、Bax、Cleaved caspase-3、 p- p38MPAK 的表达量明显减少(P<0. 05);与空白腺病毒+I/ R 组比较,p38MAPK 腺病毒+I/ R 组大鼠心肌无复流面积、梗死面积明显增加,细胞凋亡率、IL-1β、TNF-α、ICAM-1 的含量、Bax、Cleaved caspase-3、p-p38MPAK 的表达量明 显增加(P<0. 05);与空白腺病毒+I/ R+SA 组比较,p38MAPK 腺病毒+I/ R+SA 组大鼠心肌无复流面积、梗死面积明显增加,细胞凋亡率、IL-1β、TNF-α、ICAM-1 的含量、Bax、Cleaved caspase-3、p-p38MPAK 的表达量明显增加( P< 0. 05)。 结论 SA 能够减少大鼠心肌 I/ R 后梗死面积和无复流面积,抑制 p38MAPK 通路介导的炎症反应及细胞凋亡是 SA 发挥上述改善作用相关的分子机制。

摘要: 目的 建立长爪沙鼠 Pnpla3 基因敲减的肝原代细胞的脂变模型,并用于评价灵芝三萜酸的降脂效果。 方法 分离培养长爪沙鼠肝原代实质细胞,以棕榈酸(PA)诱导成肝脂变模型,根据 Pnpla3 三个外显子序列设计、合成三对 Pnpla3 基因的干扰 RNA 载体,并通过 qPCR 及 Western blot 法检测 Pnpla3 的表达量及干扰效率筛选出一对稳转肝实质的干扰载体。以高(1 μmol / L)、中(0. 1 μmol / L)、低(0. 01 μmol / L)三个剂量的灵芝三萜酸培养细胞,并以阳性药物蛋氨酸(7 μmol / L)为对照,检测干扰 Pnpla3 基因后的细胞甘油三酯(TG)的含量以进行降脂效果观察。 结果 诱导 24 h 内,长爪沙鼠肝脂变细胞脂滴增加的较多且大多数细胞形状正常的 PA 400 μmol / L 为造模的合适浓度,以 Pnpla3 的第二外显子为靶点设计的 siRNA2 组敲低效果最好,干扰效率高于 70%。 干扰 Pnpla3 基因可以起到降低细胞内 TG 的作用,单独加入中高剂量的灵芝三萜酸有明显的降脂效果(P< 0. 01),干扰 Pnpla3 基因与加入灵芝三萜酸的降脂效应具有累积作用(P< 0. 01)。 结论 建立了长爪沙鼠肝实质原代细胞的脂变模型,灵芝三萜酸对干扰 Pnpla3 基因后的长爪沙鼠肝实质细胞中 TG 的含量有明显的抑制或减轻作用,灵芝三萜酸降脂效应与磷脂代谢相关 2 个通路(ko00561,ko00564)中 Pnpla3 基因的表达相关。

摘要: 目的 观察绞股蓝总皂苷(GYPs)对脓毒症大鼠脑损伤的影响,并初步探究其作用机制。 方法 将 SD 大鼠分为 Sham 组、脓毒症脑损伤(SAE)组、GYPs 组、GNE-317 组、GYPs+GNE-317 组,12 只/ 组,除 Sham 组外均采用盲肠结扎穿孔术制备 SAE 模型,造模后 2 h,分别给予生理盐水、生理盐水、200 mg / kg GYPs 溶液、40 mg / kg GNE-317 溶液、200 mg / kg GYPs+40 mg / kg GNE-317 溶液灌胃,灌胃体积 2 mL/ d,连续给药 3 d。 采用反射实验评估 大鼠神经行为,之后处死大鼠取海马组织,苏木素伊红(HE)染色观察海马组织病理损伤,TUNEL 实验检测海马中细胞凋亡,试剂盒检测 MDA 水平和 SOD 活性,免疫印迹法(Western blot)检测磷脂酰肌醇 3 激酶(PI3K)、蛋白激酶 B(Akt)、p-Akt、凋亡调节因子 Bax、Bad 及半胱氨酸蛋白酶-3( caspase-3)蛋白表达。 结果 Sham 组大鼠一般情况良好,海马神经元形态、结构正常;SAE 组大鼠出现嗜睡、自发活动缺乏等症状,可见弥漫性神经元损伤;GYPs 组大鼠活动及神经元形态趋于正常;GNE-317 组大鼠活动及神经元形态比 SAE 组差;GYPs+GNE-317 组同 SAE 组相近。相较于 Sham 组,SAE 组大鼠凋亡细胞比例、MDA 水平、cleaved-caspase-3、Bax 及 Bad 蛋白表达增高(均 P<0. 05); GYPs 组上述指标相较于 SAE 组均降低(均 P<0. 05);GYPs+GNE-317 组上述指标相较于 GYPs 组均增高,相较于 GNE-317 组均降低(均 P<0. 05)。相较于 Sham 组,SAE 组大鼠神经行为评分、SOD 活性、PI3K 蛋白及 p-Akt 水平降低(均 P<0. 05);GYPs 组上述指标相较于 SAE 组均增高(均 P<0. 05);GYPs+GNE-317 组上述指标相较于 GYPs 组均降低,相较于 GNE-317 组均增高(均 P<0. 05)。 结论 GYPs 可促进海马 PI3K/ Akt 通路活化,抑制下游促凋亡因子释放,降低氧化应激,改善 SAE 大鼠脑损伤。

摘要: 目的 研究薯蓣皂苷(dioscin)对肝癌细胞 Bel-7402 及正常人肝细胞 LO2 增殖和凋亡的影响及其可能机制。 方法 将 0. 5~ 16 μmol / L 薯蓣皂苷干预 Bel-7402 肝癌细胞和 LO2 肝细胞 24 h,使用 MTT 法检测细胞增殖抑制作用,倒置显微镜观察细胞形态变化,Hoechst33258 染色法观察细胞凋亡的形态学变化,JC-1 染色法检测线粒体膜电位水平变化;Western blot 蛋白质印迹法观察薯蓣皂苷对两种细胞中 Bcl-2、Bax 蛋白表达的影响。 结果 与阴性对照组比较,薯蓣皂苷各剂量组可显著抑制 Bel-7402 肝癌细胞和 LO2 肝细胞增殖,并呈剂量依赖性,其作用于 Bel-7402 肝癌细胞的 IC50 为 2. 04 μmol / L,作用于 LO2 肝细胞的 IC50 为 2. 76 μmol / L;与阴性对照组比较,1 μmol / L、2 μmol / L 薯蓣皂苷组 Bel-7402 肝癌细胞及 LO2 肝细胞分布密度降低,细胞出现变圆脱落死亡,细胞边界模糊,并诱导细胞发生凋亡。 JC-1 染色结果显示,薯蓣皂苷作用于两种细胞后线粒体膜电位均显著降低( P< 0. 01)。 Western blot 蛋白质印迹法检测结果显示,薯蓣皂苷均可抑制两种细胞中 Bcl-2 蛋白的表达,上调 Bax 蛋白的表达(P<0. 05,P<0. 01)。 结论 薯蓣皂苷能够抑制 Bel-7402 肝癌细胞和 LO2 肝细胞的体外增殖,其机制可能是降低线粒体膜电位,抑制 Bcl-2 蛋白表达,上调 Bax 蛋白的表达,诱导细胞发生凋亡。 提示薯蓣皂苷在发挥抗肝癌作用的同时亦对肝细胞具有损伤作用。

摘要: 目的 探讨熊果酸通过调节 miR-373-3p 对肺癌 A549 细胞凋亡和迁移的影响。 方法 MTT 法检测熊果酸对肺癌 A549 细胞的毒性作用;AnnexinⅤ- FITC/ PI 双染法、流式细胞术检测熊果酸作用于转染 miR-373-3p 的 A549 细胞后对 A549 细胞凋亡影响;实时荧光定量 PCR 法分别检测熊果酸加药组和转染 miR-373-3p mimics 组中 A549 细胞 miR-373-3p 表达程度;RT-PCR 和免疫印迹法检测熊果酸作用下 miR-373-3p 调控的下游靶基因 TXNIP mRNA 及蛋白的表达;细胞划痕愈合实验检测 miR-373-3p 细胞迁移能力。 结果 熊果酸显著降低肺癌 A549 细胞的生长活力(P<0. 05),IC 50 为 60 μmol / L;瞬时转染 miR-373-3p mimics 可以上调 A549 细胞中 miR-373- 3p 的表达(24 h,11. 367±2. 120;48 h,12. 167±1. 108);熊果酸作用于转染 miR-373-3p mimics 的 A549 细胞后,能够显著提高细胞中 miR-373-3p mimics 的表达水平( 24 h,16. 787 ± 3. 109;48 h,16. 980 ± 3. 106);并且 miR-373-3p mimics 下游预测的目标基因 TXNIP mRNA(10. 757±0. 79)及蛋白表达量(0. 8210±0. 043)均明显上升;FCM 结果显示:miR-373-3p 能够促进肺癌 A549 细胞凋亡(46. 20±5. 970)。 细胞转染 miR-373-3p mimics 后,迁移能力明显受到抑制(P<0. 001)。 结论 熊果酸能够通过促进肺癌 A549 细胞凋亡抑制其迁移,其作用机制可能是通过上调 miR- 373-3p 表达来完成的。

摘要: 目的 建立一种可快速诊断鹅源星状病毒的荧光定量 PCR 方法。 方法 分析比对 NCBI 下载的鹅源星状病毒全基因组序列,在其 ORF1a 保守区设计一对特异性引物及 TaqMan 探针,优化反应条件,建立标准曲 线,并验证其特异性,敏感性和稳定性。 结果 该方法最低检测线限为 1. 50×10² copies/ μL,批内和批间检测变异系数分别小于 0. 5%和 4%,且对其他常见水禽病毒无特异性扩增。 临床应用结果显示检出率明显高于常规 RT-PCR 方法。 结论 建立了一种鹅源星状病毒的 TaqMan 荧光定量 PCR 方法,该方法特异性强,灵敏度高且重复性良好, 适用于鹅源星状病毒的早期检测和定量分析。

摘要: 目的 探讨西咪替丁对坏死性小肠结肠炎(NEC)肠上皮完整性及钙调蛋白依赖性蛋白激酶 IV (CaMKIV) / 环磷酸腺苷反应元件调节蛋白(CREM)通路的影响。 方法 实验分为对照组、模型组、西咪替丁组和 CaMKIV 抑制剂组。 除对照组外,其余各组出生 1 d 缺氧+复氧+冷刺激建立 NEC 新生大鼠模型,连续 3 d。 每天刺激后西咪替丁组静脉注射 30. 5 mg / kg 西咪替丁,CaMKIV 抑制剂组插管灌胃 0. 72 mg / kg CaMKIV 抑制剂 KN62,对照组和模型组静脉注射和灌胃生理盐水处理相同天数。 观察大鼠临床情况;异硫氰酸荧光素-葡聚糖( FITC- Dextran)示踪法检测肠道通透性;苏木精-伊红(HE)染色观察肠道组织病理学变化;酶联免疫吸附(ELISA)检测大鼠肠组织中血小板活化因子(PAF)、肿瘤坏死因子 α(TNF-α) 水平;蛋白免疫印迹检测大鼠肠组织中 CaMKIV、 CREM 蛋白水平。 结果 模型组出现活动减少、反应迟钝现象,喂养时出现不耐受现象,大便形状改变;肠壁充气扩张、弹性差,部分出现穿孔现象,显微镜下观察到黏膜下层或固有层分离严重,绒毛脱落、腺体紊乱。 西咪替丁组和 CaMKIV 抑制剂组较模型组活动量有所增加,喂养状态缓和;肠壁充气扩张,显微镜下观察黏膜下层或固有层部分分离,出现部分绒毛脱落现象。与对照组相比,模型组肠道 FITC-Dextran 水平,组织学评分,肠组织中 PAF、 TNF-α水平,CaMKIV、CREM 蛋白水平升高(P<0. 05);与模型组相比,西咪替丁组、CaMKIV 抑制剂组肠道 FITC- Dextran 水平,组织学评分,肠组织中 PAF、TNF-α 水平,CaMKIV、CREM 蛋白水平降低(P<0. 05)。 结论 西咪替丁可能通过抑制 CaMKIV/ CREM 通路缓解 NEC 中炎症进而改善肠上皮,从而实现对 NEC 新生大鼠的保护。

摘要: 目的 探讨红景天苷(SDS)对 2 型糖尿病骨质疏松(DOP)大鼠的保护作用及叉头框转录因子 O 亚族 1(FoxO1) / β-连环蛋白(β-catenin)通路的影响。 方法 高糖高脂饲养 8 周,8 周后腹腔注射 30 mg / kg 链脲佐菌素(STZ),第 10 周无菌条件下去除卵巢构建 DOP 大鼠模型,建模成功后随机分为模型组、SDS 组、FoxO1 激动剂组, 每组 8 只;正常组 8 只大鼠常规饲料正常饲养相同时间。造模成功后第 2 天予 SDS 组灌胃 36 mg / ( kg·d) SDS, FoxO1 激动剂组灌胃 40 mg / (kg·d) 白藜芦醇(Res),连续 11 周。血糖仪检测空腹血糖水平;苏木精-伊红(HE)检测大鼠股骨组织形态;双能 X 射线吸收法测定股骨组织骨密度情况;活性氧(ROS)试剂盒、超氧化物歧化酶( SOD) 试剂盒、丙二醛(MDA)试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)试剂盒检测血清中 ROS、SOD、MDA、GSH-Px 水平; 蛋白免疫印迹检测股骨组织中 FoxO1、β-catenin 蛋白水平。 结果 建模后给药前,与正常组相比,模型组、SDS 组、 FoxO1 激动剂组空腹血糖水平升高(P<0. 05)。给药后,模型组骨小梁出现明显断裂、破坏严重、数量减少;SDS 组、 FoxO1 激动剂组骨小梁明显断裂,但空隙间隔有所缓解,数量有所增加。与正常组相比,模型组空腹血糖水平,血清中 ROS、MDA 水平升高(P<0. 05);股骨组织骨密度,血清中 SOD、GSH-Px 水平,股骨组织中 FoxO1、β-catenin 蛋白水平降低(P<0. 05)。 与模型组相比,SDS 组、FoxO1 激动剂组空腹血糖水平,血清中 ROS、MDA 水平降低(P< 0. 05);股骨组织骨密度,血清中 SOD、GSH-Px 水平,股骨组织中 FoxO1、β-catenin 蛋白水平升高(P<0. 05)。 结论 SDS 可激活 FoxO1 / β-catenin 通路,增强抗氧化应激作用,实现对 DOP 大鼠的保护。

摘要: 目的 观察脑卒中慢性应激大鼠抑郁样行为、海马氧化应激及海马 CA1 区脑源性神经营养因子 (BDNF)表达的变化和中等强度跑台运动的干预作用,探讨跑台运动影响卒中后抑郁(PSD)大鼠抑郁行为的可能机制。 方法 将 44 只大鼠随机分为 4 组:即假手术组(sham)、卒中组(MCAO)、卒中抑郁组(PSD)及 PSD 运动组 (PSD+E)。 采用大脑中动脉栓塞法制备大鼠缺血性卒中模型,随后慢性不可预见性应激(CUMS)4 周制备 PSD 大鼠模型,同时 PSD+E 组大鼠进行 4 周中等强度跑台运动。运动及 CUMS 结束后,蔗糖水偏好实验( SPT)及强迫游泳实验(FST)评估大鼠的行为学变化,行为学测试结束后试剂盒法检测海马组织中超氧化物歧化酶(SOD)及过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量,免疫组化法测量大鼠海马 CA1 区 BDNF 的表达。 结果 与 sham 组比较, PSD 大鼠 FST 中大鼠不动时间延长,SPT 中糖水摄入量及糖水偏爱百分比均显著减少;海马 SOD 及 CAT 活性显著下降,MDA 含量增加,海马 CA1 区 BDNF 数目显著减少。跑台运动干预后与 PSD 组大鼠比较,PSD+E 组大鼠不动时间缩短,糖水摄入量及糖水偏爱百分比均显著增多;大鼠海马 SOD 及 CAT 活性增强,MDA 含量减少,海马 CA1 区 BDNF 个数显著增多。 结论 跑台运动可以改善 PSD 大鼠抑郁样行为,可能与此运动增强 PSD 大鼠海马组织抗氧化能力及海马 CA1 区 BDNF 表达,从而对 PSD 大鼠起到保护作用有关。

摘要: 目的 检测自发性高血压大鼠(SHR)并高尿酸血症降低尿酸干预血脂水平变化。 方法 动物实验分组:(1)对照组(A1 )(单纯 SHR 组) n= 20 雌雄各半用等体积 0. 5% 羧甲基纤维素钠(CMC-Na)灌胃两周。(2) SHR 并高尿酸血症组(B1)n= 30 雌雄各半用腺嘌呤(150 mg / kg 溶于 0. 5%CMC-Na)和乙胺丁醇(250 mg / kg 溶于 0. 5%CMC-Na)灌胃两周;(3)继续造模对照组(A2) (单纯 SHR 组) n= 10(从对照组 A1 随机选取),雌雄各半,在 A1 组干预完成后,再用等体积 0. 5%CMC-Na 灌胃,继续灌胃 5 周。 (4) SHR 并高尿酸血症继续造模组(B2) n= 10 (从 SHR 并高尿酸血症组 B1 随机选取),雌雄各半,在 B1 组干预完成后,再用腺嘌呤(150 mg / kg 溶于 0. 5%CMC- Na)和乙胺丁醇(250 mg / kg 溶于 0. 5%CMC-Na)继续灌胃 5 周。 (5)SHR+高尿酸血症+尿酸降低组(B3) n= 10(从 SHR+高尿酸血症组 B1 随机选取),雌雄各半,在 B1 组干预完成后,再用腺嘌呤(150 mg / kg 溶于 0. 5%CMC-Na)和乙胺丁醇(250 mg / kg 溶于 0. 5%CMC-Na)和别嘌呤醇(10 mg / kg 溶于 0. 5%CMC-Na)继续灌胃 5 周。在动物实验前,在动物实验 2 周,4 周,7 周。用酶标仪分别测定血中尿酸(UA)、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、极低密度脂蛋白(VLDL)。 结果 实验组与对照组相比,血中尿酸水平、血脂水平有显著差异 P<0. 05。 结论 SHR 并高尿酸血症降低尿酸血脂水平有改变。

摘要: 目的 探讨转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、克拉拉细胞分泌蛋白 16( clara cell secretory protein, CC16)、Ⅱ 型肺泡细胞表面抗原 6 ( krebs yon denlungen-6, KL-6) 在支气管肺发育不良 (bronchopulmonary dysplasia, BPD)大鼠肺组织中的表达,以及这些蛋白的表达与肺细胞凋亡的关系。 方法 按随机数字表法随机将 SD 新生鼠随机分为对照组、模型组,模型组持续暴露在 80% ~ 85%氧中构建 BPD 模型,对照组始终暴露在空气中。每组在 7 d,14 d,21 d 时(简称为 7 d 模型组、14 d 模型组、21 d 模型组)随机选出 8 只新生鼠处死,留取 5 mL 血清。 HE 染色观察各组肺组织病理学改变,并分析辐射状肺泡计数( radial alveolar count, ROC), 肺泡平均截距(mean linear intercept, MLI)。 TUNEL 染色检测各组肺组织中的细胞凋亡。 ELISA 检测各组新生鼠的血清中 TGF-β1、CC16、KL-6 的水平。 Western blot 检测各组肺组织中 TGF-β1、CC16、KL-6 的表达水平。同时分析肺组织中 TGF-β1、CC16、KL-6 的表达与肺组织细胞凋亡率的关系。 结果 与正常组相比,模型组肺组织随暴露氧时间的延长 BPD 损伤加剧,RAC、血清中 CC16 的水平以及肺组织中 CC16 的表达明显减少,MLI、细胞凋亡率、血清中 TGF-β1、KL-6 的水平,肺组织中 TGF-β1、KL-6 的表达明显增加,差异均具有统计学意义(P<0. 05)。 相关性分 析显示,模型组新生鼠肺组织中 TGF-β1、KL-6 的表达与肺组织的细胞凋亡率呈正相关( r= 0. 977、0. 970, 均 P= 0. 000),CC16 的表达与细胞凋亡率呈现负相关( r= -0. 982, P= 0. 000)。 结论 肺组织中 TGF-β1、CC16、KL-6 的表达与 BPD 肺组织的细胞凋亡密切相关。

摘要: 目的 研究 miR-572 对胃癌细胞增殖、凋亡的影响和机制。 方法 Real-time PCR 方法测定 miR-572 在胃癌细胞和正常胃黏膜细胞中的表达差异。胃癌细胞 NCI-N87 中转染 miR-572 inhibitor,MTT 测定细胞增殖,PI 单染法测定细胞周期分布,Annexin V-FITC/ PI 法测定细胞凋亡变化,Western blot 检测细胞周期依赖性蛋白激酶 4 (CDK4)、p21、B 细胞淋巴瘤/ 白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2 相关 X 蛋白(Bax)蛋白表达。在线靶基因预测软件发现含 WW 域的氧化还原酶(WWOX)可能为 miR-572 的靶基因,荧光素酶报告系统鉴定靶向关系。将 WWOX siRNA 和 miR-572 inhibitor 共转染到胃癌细胞中,利用上述方法测定细胞增殖、周期和凋亡变化。 结果 miR-572 在胃癌细胞中的表达水平明显高于正常胃黏膜细胞。 miR-572 inhibitor 转染后的胃癌细胞增殖能力下降,细胞 G1 期比例升高,细胞凋亡率升高,细胞中 CDK4、Bcl-2 蛋白表达减少,p21、Bax 蛋白表达增多。 miR-572 靶向负调控 WWOX 蛋白表达。 WWOX siRNA 可以逆转 miR-572 inhibitor 对胃癌细胞增殖抑制、周期阻滞和凋亡促进作用。 结论 下调 miR-572 靶向负调控 WWOX 抑制胃癌细胞增殖,阻滞细胞周期并诱导细胞凋亡。

摘要: 目的 探讨 miR-377-5p 通过下调 VEGF-C 对结肠癌的血管和淋巴管生成的影响研究。 方法 该实验分为 3 组,miR-377-5p 干扰组、miR-377-5p 阴性对照组和 miR-377-5p 过表达组。采用实时荧光 RT-PCR、Western blot、CCK-8、流式细胞、细胞划痕、Transwell、血管生成实验检测 miR-377-5p mRNA 和蛋白表达、细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭、血管和淋巴管生成。 结果 与正常结肠组织对比,结肠癌组织中 miR-377-5p mRNA 和 miR-377-5p 蛋白的表达明显低于正常结肠组织(均 P<0. 05);与 miR-377-5p 干扰组相比,miR-377-5p 阴性对照组和 miR-377-5p 过表达组中的 mRNA 及蛋白显著升高(均 P<0. 05),与 miR-377-5p 阴性对照组相比,miR-377-5p 过表达组的 mRNA 及蛋白明显增加(P<0. 05);与 miR-377-5p 干扰组相比,miR-377-5p 阴性对照组和 miR-377-5p 过表达组的结肠癌细胞增殖能力明显降低(P<0. 05),与 miR-377-5p 阴性对照组相比,miR-377-5p 过表达组的结肠癌细胞增殖能力显著降低(P<0. 05);与 miR-377-5p 干扰组相比,miR-377-5p 阴性对照组和 miR-377-5p 过表达组的结肠癌细胞增殖凋亡明显升高(P<0. 05),与 miR-377-5p 阴性对照组相比,miR-377-5p 过表达组的结肠癌细胞凋亡能力显著升高(P< 0. 05);伤口愈合实验显示,miR-377-5p 过表达组的结肠癌细胞的迁移能力显著低于 miR-377-5p 干扰组和 miR-377- 5p 阴性对照组(P<0. 05);miR-377-5p 过表达组的结肠癌细胞的侵袭能力也明显低于 miR-377-5p 干扰组和 miR- 377-5p 阴性对照组( P< 0. 05);miR-377-5p 过表达组的 VEGF-A、VEGF-C 和 P-Akt、VEGFR-3 蛋白水平显著低于 miR-377-5p 干扰组和 miR-377-5p 阴性对照组(P<0. 05);miR-377-5p 过表达组的 MVD(微血管密度)和 LMVD(淋巴微血管密度)显著低于 miR-377-5p 干扰组和 miR-377-5p 阴性对照组(P<0. 05)。 结论 miR-377-5p 在结肠癌中低表达,抑制了结肠癌细胞的增殖、细胞迁移和侵袭,促进了结肠癌细胞的凋亡能力,并直接靶向 VEGF-C 抑制肿瘤的血管和淋巴管生成。

摘要: 目的 研究重组人促红细胞生成素( recombinant human erythropoietin,rhEPO)对创伤性脑损伤大鼠炎性因子及线粒体损伤的影响。 方法 将 SPF 级 SD 雄性大鼠随机分为三组,每组 15 只,分别为假手术组( sham 组),模型组、rhEPO 干预组(治疗组),模型组、治疗组采用改良过的 Feeney 自由落体撞击头部来建立创伤性大鼠模型,sham 组大鼠不撞击脑部。造模结束后,治疗组每日定时以 5000 IU/ kg 剂量 rhEPO 进行腹腔注射,sham 组和模型组腹腔注射等剂量生理盐水。连续给药 7 d 后处死大鼠。 罗丹明 123(rhodamine 123,Rh 123)染色检测脑组织线粒体膜电位改变。免疫组化检测脑组织中白细胞介素-1β(interleukin-1β,L-1β),白细胞介素 6( interleukin-6,IL- 6)和肿瘤坏死因子 α( tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达。蛋白免疫印迹检测脑组织中线粒体动力学有关蛋白 (动力相关蛋白 1(Drp-1)、分裂蛋白 1(Fis-1)、融合蛋白 2(Mfn 2)、视神经萎缩蛋白 1 (Opa 1) 的表达水平。 结果 与 sham 组相比,模型组脑组织 Rh123 荧光强度明显减弱,IL-1β、IL-6、TNF-α、Drp-1、Fis-1 蛋白的表达明显升高, Mfn 2、Opa 1 蛋白的表达明显降低(均 P<0. 05)。 与模型组相比,治疗组脑组织 Rh123 荧光强度明显增强,IL-1β、 IL-6、TNF-α、Drp-1、Fis-1 蛋白的表达明显降低,Mfn 2、Opa 1 蛋白的表达明显升高(均 P<0. 05)。 结论 重组人促红细胞生成素可以减轻创伤性脑损伤后的炎性反应及线粒体损伤,从而起到对创伤性脑损伤后脑组织的保护作用。

摘要:气流组织是影响屏障环境实验动物设施流场的一个重要因素,本文以某屏障环境小鼠饲养室为例, 用 Airpak 软件模拟排风口位置、数量、尺寸以及笼具位置对室内流场的影响。模拟结果表明:房间排风口的数量和位置对小鼠饲养室整体的平均温度、平均风速、平均空气龄以及均方根偏差影响较小,主要影响局部气流分布;笼具沿房间宽度方向布置的平均空气龄比笼具沿房间长度方向布置平均少 25 s。此外,计算分析夏季空调新风冷负荷指标和换气次数呈现一次函数关系,新风冷负荷占总冷负荷比例达 92. 25%。相对于开放式笼具系统,独立通气笼具系统新风冷负荷指标降低 62. 6%。

摘要:长链非编码 RNA (LncRNA)是一类长度超过 200 个核苷酸的非编码 RNA,可在转录、转录后及翻译水平等多个层面调节基因表达,其功能失调与包括神经系统疾病在内的许多疾病的病理过程密切相关。细胞自噬是一种存在于真核细胞内主要依赖溶酶体的降解途径,在细胞的生长发育、衰老以及细胞内环境稳态的维持过程中发挥重要作用。近年来研究证实,LncRNA 在神经系统疾病的发生和发展过程中起到重要作用,同时 LncRNA 调控细胞自噬也是研究的热点问题,但具体的调控机制尚未见详细综述。 本文综述了 LncRNA 在细胞自噬中的调控分子机制及其在神经系统疾病中的相关研究进展,旨在为深入研究神经系统疾病的发病机制及药物治疗策略提供理论和实验依据。

摘要:阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种不可逆的渐进性发展的神经退行性疾病,其发病机制复杂,病理变化主要涉及 β 淀粉样蛋白沉积,Tau 蛋白过度磷酸化,神经炎症和突触异常等。在阿尔茨海默病发病过程中,基质金属蛋白酶家族(matrix metalloproteinases,MMPs)可通过影响 β 淀粉样蛋白的代谢、参与 Tau 低聚 物的形成、破坏脑部屏障功能、促进神经炎症、以及影响突触可塑性等改变阿尔茨海默病的病理进程。 通过对近年来基质金属蛋白酶与阿尔茨海默病的研究作一综述,以期为基质金属蛋白酶作为阿尔茨海默病潜在治疗靶标提供理论依据。

摘要:近年来由于缺血性脑卒中发病率、死亡率不断攀升,治疗性低温被认为最有前景的神经保护方法, 而且低温对脑损伤的保护作用已被众多研究验证并且广泛用于转化研究,但是临床研究始终未发现明确的神经保护作用。局部脑缺血的大动物模型已成为基础科研与临床转化研究间的桥梁,在神经保护研究中具有不可替代的作用。本文总结了多种非人灵长类动物局部脑缺血模型上,治疗性低温的研究进展。 旨在推动治疗性低温治疗尽快用于临床研究。

摘要:癫痫是一种常见的神经疾病,但我们对于其病因知之甚少,因此很难找到有效的治疗方法。在过去的 30 年里,癫痫动物模型在研究癫痫发生机制和确定潜在治疗药物等方面都起着至关重要的作用。但迄今为止, 还没有任何一个理想的单一模型被证实可用于识别潜在的药物和充分解释癫痫的发生原因。本综述对目前制备癫痫动物模型的方法及优化方案进行总结,为癫痫模型的选择提供参考,并提供了未来一些癫痫模型制备方向的见解。

摘要:膝骨关节炎可分为原发性和继发性,病因不明,动物实验是进一步探索其发病机制和防治的重要手段,基于国内外相关文献,经典的造模方式可分为人工诱导和自发造模,与本病相关的主流中医证候是肾阳虚、血瘀和寒湿证,分别对应三种造模方式,而病证结合的动物模型将是未来研究的主流趋势,结合笔者多种造模方式的经验,对其做一综述以供参考。

摘要:CXXC 锌指蛋白 1(CXXC finger protein-1, CFP1)是一种表观遗传调控因子,在哺乳动物细胞内参与 DNA 甲基化和组蛋白修饰。研究表明 CFP1 的失调影响细胞的基因表达、DNA 损伤修复、信号转导、增殖、分裂、分化等,与恶性肿瘤的发生发展、治疗及不良预后密切相关。本文简要综述 CFP1 的基本功能及在恶性肿瘤中的研究进展,以期为后续研究新的肿瘤标志物和潜在的治疗靶点提供依据。