摘要:目的 观察民族药五宝胶囊对卵清白蛋白 ( ovalbumin,OVA) 所致的哮喘小鼠肺泡灌洗液 (bronchoalveolar lavage fluids,BALF) 中 Th1 / Th2、Th17 / Treg 失衡及趋化因子 Eotaxin、IL-8、MCP-1 的影响。 方法 BALB/ c 小鼠随机分为 5 组(正常组、模型组、地塞米松组、五宝胶囊低、高剂量组),采用 OVA 致敏和激发的方法复制哮喘模型。 HE、PAS 染色观察小鼠肺组织病理学变化,快速瑞氏-吉姆萨染色法观察 BALF 中各类炎症细胞数 目,ELISA 测定小鼠 BALF 中 IFN-γ、IL-4、IL-17A、IL-10、Eotaxin、IL-8、MCP-1 的含量。 结果 五宝胶囊能够显著减轻哮喘小鼠肺组织炎症浸润和黏液的分泌,降低各类炎症细胞数目及 BALF 中 IL-4、IL-17A、Eotaxin、IL-8、MCP-1 的生成(P<0. 01,P<0. 05),并能明显升高 IFN-γ、IL-10 的含量(P<0. 01,P<0. 05)。 结论 五宝胶囊可能通过调节 BALF 中 Th1 / Th2、Th17 / Treg 相关细胞因子平衡及抑制趋化因子 Eotaxin、IL-8、MCP-1 的生成来发挥防治哮喘的作用。

摘要:目的 观察新鲜山药提取物对胃溃疡小鼠溃疡指数、黏膜形态结构,及血清超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)表达的影响,探讨其防治胃溃疡的作用机制。 方法 将 100 只小鼠随机分为空白对照组、模型组、施维舒组、鲜山药提取物高剂量、鲜山药提取物低剂量共 5 组;空白对照组和模型组灌胃生理盐水,其余 3 组灌胃实验药物,灌胃 45 d。之后对除空白对照组外的其他 4 组用消炎痛(2. 5 mg / mL)进行一次性灌胃建立胃溃疡模型,7 h 后处死全部小鼠。取血检测血清 SOD、GSH-Px 活性及 NO、MDA 蛋白表达;测定溃疡指数,计算溃疡抑制率;取全胃制备胃组织病理切片,HE 染色,观察黏膜组织形态改变。 结果 与模型组比较,鲜山药提取物高剂量组、低剂量组和施维舒组均可减轻消炎痛所致的胃溃疡,胃组织炎细胞浸润及腺体破坏程度较轻;鲜山药提取物高剂量组可降低血清 MDA、NO 表达,增加 SOD、GSH-Px 表达含量 (均 P<0. 05)。 结论 鲜山药提取物具有预防急性胃溃疡保护胃黏膜的作用,其机制可能与减少 MDA、NO 含量, 增加 SOD、GSH-Px 表达,发挥抗氧化应激作用有关。

摘要:目的 采用非开胸式主动脉弓狭窄术(transverse aortic constriction,TAC)建立稳定可靠的小鼠心力衰竭模型,并对小鼠心力衰竭的的病理进程进行分析观察。 方法 采用非开胸式 TAC 术建立 C57BL/ 6J 小鼠心力衰竭模型,通过心动超声成像,左心室质量指数,病理组织学检查来评价心脏功能及心衰程度。 结果 左心室质量指数随时间逐渐升高,与假手术组比,术后 4 周、8 周、12 周均有非常显著性差异(P<0. 01)。 心动超声显示,与假手术组相比,TAC 术后 4 周左心室前壁厚度、左心室校正重量(LV mass corrected),心率( heart rate,HR),心输出量 (cardiac output,CO)显著增加(P<0. 01)。 术后 8 周左心室壁厚度、左心室校正重量和左心室收缩末期容积(LV Vol;s)显著增加(P<0. 01),射血分数(ejection fraction,EF)和短轴率( fractional shortening,FS)显著减小(P<0. 01)。 TAC 术后 12 周,左室舒张末期内径(LVID;d)、左室收缩末期内径(LVID;s)、左心室舒张末期容积(LV Vol;d)和左心室收缩末期容积(LV Vol;s)显著增加(P<0. 01),射血分数和短轴率进一步降低(P<0. 01),同时病理学检查显示心肌纤维不同程度异常或病变。 结论 实验结果表明,采用非开胸式 TAC 术建立小鼠心衰模型稳定可行,能够模 拟的人类压力超负荷导致的左心室肥厚到心力衰竭的病理生理过程

摘要:目的 探讨 METH 和 HIV-1Tat 蛋白协同诱导树鼩中脑神经元自噬的可能机制。 方法 本文以树鼩原代中脑神经元为模型,采用 Western blot 和 Real-time PCR 法测定 METH 和 HIV-1Tat 蛋白治疗细胞后,细胞中 ATG5 / 7 蛋白和基因的表达。 结果 METH 和 HIV-1Tat 蛋白能够诱导树鼩原代中脑神经元自噬,两者具有协同效应,且通过调节 ATG5/7 基因表达上调 ATG5 / 7 蛋白,进而调控自噬。 结论 ATG5/7 基因参与了 METH 和 HIV-1Tat 蛋白诱导的树鼩中脑神经元自噬,这一结论为研究艾滋病脑病和自噬之间的关系提供了新的理论依据。

摘要:目的 评估登革病毒实时荧光定量 RT-PCR 方法,应用于登革热小鼠模型关键指标的检测。 方法 首先,选择合适的特异引物和探针,分子生物方法制备质粒标准品,优化 PCR 体系和反应条件;其次,评估该实时荧光定量 RT-PCR 方法的灵敏性、特异性及稳定性;最后,验证该方法对登革病毒感染小鼠血清和组织样本的适用性。 结果 成功确定一步法实时荧光定量 RT-PCR 方法;该方法较为灵敏,最低检测线为 49. 6 Copies/ μL;方法特异性好,未见非特异性扩增;方法稳定性好,样本 Ct 值标准差均小于 0. 5,且 CV ﹤ 5%;登革病毒感染小鼠模型样品的检测结果符合实验预期。 结论 该 qRT-PCR 方法可作为关键指标检测方法,用于登革热小鼠模型病毒的定量检测及评估。

摘要:目的 构建 Luc-GFP 标记的高转移性人肝癌细胞株,两种方法建立方便观察且自发转移的裸鼠原位肝癌模型。 方法 构建 pCDH-CMV-Luc-EF1-GFP-Puro 重组慢病毒表达载体,并转染人肝癌细胞株 HCCLM3,通 过细胞悬液肝左叶注射法或皮下移植瘤组织块肝内植入法构建裸鼠原位肝癌模型,利用活体成像技术和组织病理 学比较两种方法肿瘤的生长和转移情况。 结果 构建稳定表达荧光素酶(Luc)和绿色荧光蛋白(GFP)的高转移性 人肝癌细胞株 HCCLM3-Luc-GFP,裸鼠活体成像和病理学结果发现,两种方法建立的原位肝癌模型成瘤率均为 100%。其中细胞悬液法建模周期短,对宿主肝的损伤小,更能模拟出肝癌患者的微环境,转移率高;而肿瘤组织法的成瘤大小和位置较易控制,但转移率较低。结论 成功构建 Luc-GFP 标记的高转移性人肝癌细胞系 HCCLM3- Luc-GFP,细胞悬液法和肿瘤组织块转接法分别建立了自发转移且便于观察的裸鼠原位肝癌模型,为连续、直观地监测肿瘤的生长转移,评价抗肝癌生长转移药物的疗效奠定了基础。

摘要:目的 研究马鹿茸组合物抗体力疲劳的作用及其机制。 方法 NIH 小鼠和 SD 大鼠随机分为空白对照组、奕华胶囊组(600 mg / kg)、马鹿茸组合物低、中、高剂量组(135、270、810 mg / kg),各组动物分别灌胃给予相应溶液,每天 1 次,连续 30 d。末次灌胃 30 min 后检测各组动物的负重游泳时长、肝糖原含量及游泳后血清尿素氮、血乳酸浓度。 结果 与阴性对照组比较,马鹿茸组合物组动物的游泳时长增加(P<0. 05)、肝糖原含量升高(P< 0. 05)、血乳酸曲线下面积降低(P<0. 05)。 结论 马鹿茸组合物具有抗体力疲劳作用,其机制可能与增加机体肝 糖原储备和降低运动所引起的血乳酸堆积有关。

摘要:目的 传递窗作为实验动物屏障设施内物品传递的通道,主要是通过紫外灯照射物品表面达到消毒目的。针对其照射时间长、使用频率高、影响因素复杂、且消毒效果不稳定等问题,本研究对比了紫外传递窗和 高通量氙光传递窗在不同时间点的杀菌效果。 方法 比较分析两种传递窗在不同的时间点对 5 种标准菌株(金黄 色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、白色念珠菌、枯草芽孢杆菌)的杀菌效果。 结果 高通量氙光传递窗 1 min 杀菌 率达 99. 85%,5 min 可达 100%;紫外传递窗 5 min 达不到杀菌效果,对不同菌种灭菌效率差异大,照射 30 min 杀菌率方可达 99. 91%。 结论 与传统的紫外传递窗相比,高通量氙光传递窗 5 min 即可达到杀菌效果,它有望替代紫外传递窗。

摘要:目的 分析 D-半乳糖作用下,树鼩肠组织 IL-18 的表达和肠道菌群的变化情况。 方法 10 只雄性树鼩随机分为正常组和 D-半乳糖组(n = 5)。 处理组腹腔注射 D-半乳糖(0. 6 g / kg)8 周;正常组按相同操作注射生 理盐水。 分离回肠、盲肠和结肠并收集其内容物,免疫组化检测 IL-18 表达情况;16S rDNA 高通量测序分析肠内容物细菌 DNA 序列。 结果 D-半乳糖组的回肠、盲肠和结肠的 IL-18 表达均显著性升高(P<0. 05)。 D-半乳糖组盲肠、结肠的肠杆菌科和结肠气单胞菌科丰度显著性升高;结肠双歧杆菌科丰度下降。 结论 D-半乳糖增加肠道炎症因子 IL-18 表达和肠道菌群紊乱,推测树鼩肠道菌群失调引起 IL-18 表达升高,促进肠道炎症反应

摘要:目的 探讨脐带间充质干细胞对卵巢早衰家兔性激素、CYR61 和 CTGF 表达的影响,揭示其治疗作 用及其内在机制。 方法 将 10 只家兔随机分为模型组和治疗组各 5 只,均采用腹腔注射 CTX(50 mg / ( kg·d),连 续 2 d)建造 POF 模型,其中治疗组采用耳缘静脉注射 UCMSCs(5×106 / mL,每次 2 mL,连续 3 d)治疗,模型组注射等量的灭菌用水。分别在 UCMSCs 治疗后 0 d、7 d、14 d 和 28 d 抽取静脉血,分析血清激素水平变化;在 UCMSCs 治疗 28 d 后取卵巢组织标本,检测卵巢组织内 CYR61 和 CTGF 蛋白及其 mRNA 的表达。 结果 1、模型组和治疗组 在未治疗前血清 E2 和 FSH 水平无差异,有可比性(P>0. 05)。 治疗后家兔血清 E2 水平上升,FSH 水平下降,与模 型组相比,差异具有统计学意义(P<0. 05),并且随着时间出现周期性波动;而模型组家兔一直处于低 E2 和高 FSH 水平,随着时间未出现周期性的波动。 2、与模型组相比,治疗组 CYR61 和 CTGF 蛋白表达明显增多,差异均有统计学意义(t_CYR61 = 8. 688,P<0. 05;t_CTGF = 10. 142,P<0. 05)。 3、与模型组相比,治疗组 CYR61 和 CTGF mRNA 表达水平明显升高,差异均有统计学意义(t_CYR61 = 38. 156,P<0. 05;t_CTGF = 14. 646,P<0. 05)。 4、CYR61 和 CTGF 主要表达在颗粒细胞和卵泡细胞膜,与模型组相比,治疗组表达明显增多,差异均有统计学意义( t_CYR61 =3.981,P<0. 05;t_CTGF = 4. 111,P<0. 05)。 结论 脐带间充质干细胞治疗能改善 POF 家兔性激素水平,上调 CYR61 和 CTGF 的表达,从而 激活休眠卵泡生成、恢复卵巢功能,对 POF 起到治疗作用。

摘要:目的 探讨促血小板生成素(TPO)对阿霉素致心力衰竭(CHF)大鼠抗心肌细胞凋亡的作用以及其对 TGF-β1 / Smad3 信号的调控机制。 方法 将大鼠随机分为对照组、模型组、治疗组、抑制剂组;模型组、治疗组、抑 制剂组采用腹腔注射阿霉素构建心衰模型,治疗组每日腹腔注射 5 μg / kg TPO; 抑制剂组每日腹腔注射 1. 2 mg / kg SB431542、TUNEL 染色、免疫荧光、Western blot 检测大鼠心肌细胞的凋亡、Caspase-3、TGF-β1 及 p-Smad3 的表达水平。 结果 与对照组相比,模型组心肌细胞凋亡率、TGF-β1、p-Smad3、Caspase-3 的表达明显升高,与模型组相比,治疗组、抑制剂组心肌细胞凋亡率、TGF-β1、p-Smad3、Caspase-3 的表达明显降低,差异均具有统计学意义( P< 0. 05)。 结论 TPO 能够降低由阿霉素导致 CHF 大鼠的心肌细胞凋亡率,其机制可能与抑制 TGF-β1 / Smad3 信号有关

摘要:目的 研究银杏叶提取物 50 在高糖环境下对血管内皮细胞(HUVECs)的保护作用。 方法 通过 MTT 法研究了 GBE50 对 HUVECs 细胞活性的影响,通过荧光反应法研究了谷胱甘肽的含量变化,通过流式细胞实验研究了 HUVECs 中活性氧含量和 GBE50 对细胞自噬的影响。 结果 MTT 实验结果显示 GBE50 可显著提高高糖 环境下 HUVECs 细胞活性。 在流式细胞实验中,高糖环境下 HUVECs 中 ROS 阳性细胞比率明显升高,而 GBE50 可显著降低 ROS 生成。并且 GBE50 可显著升高高糖环境下 HUVECs 中 GSH 含量,降低 MDA 阳性细胞比率。 免疫荧光实验和蛋白印迹实验结果显示,GBE50 可显著降低 HUVECs 中的自噬水平。 结论 GBE50 可通过降低细胞自噬水平、降低 ROS 产物含量降低高糖环境对血管内皮细胞细胞活性的影响。

摘要:目的 快速建立免疫力低下的 KM 小鼠动物模型,用简单快速的方法鉴定动物模型成立。 方法 环磷酰胺经口灌胃,剂量为 100 mg / kg;氢化可的松经口灌胃,剂量为 80 mg / kg;60%乙醇溶液经口灌胃,剂量为 20 mL/ Kg;UVA 紫外线皮肤照射(长波),剂量为 10 J/ cm2 ,各组连续 3 d 给药处理。 分别测定小鼠试验前后体重,测定小鼠血清中的 IgG、IgA、IgM 的含量,用流式细胞仪测定小鼠外周血 B 淋巴细胞 CD19、T 淋巴细胞 CD3 的含量,用 全自动血液分析仪分析小鼠外周血血细胞情况。 结果 环磷酰胺组和氢化可的松组的 KM 小鼠免疫力低下模型 成立;60%乙醇组和紫外线照射组免疫力低下模型不成立,需进一步试验探索。测定小鼠体重,检测小鼠血清中的 IgG、IgA、IgM 的含量和小鼠外周血 B、T 淋巴细胞以及小鼠血常规分析,可以做为 KM 小鼠免疫力低下的模型成立的参考检测指标。 结论 连续经口灌胃 3 d 100 mg / Kg 的环磷酰胺建立的 KM 小鼠免疫力低下的动物模型是成立的。 从各种检测指标简易程度上来看,体重、血清免疫球蛋白含量、血常规这三个指标简单易得,检测成本低廉且时间周期短,检出有效率高,可作为日常检测工作的动物模型建立确认的指标

摘要:目的 评价基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)检测实验动物病原菌的效果。 方法 使用德国 Bruker Biotyper 系统对 40 株标准菌株及 384 株实验动物分离菌进行鉴定。 结果 Bruker Biotyper 检测标准菌株和分离株的准确率分别为 90. 0%和 80. 0%。 对鼠伤寒沙门氏菌( Salmonella typhimurium)、假结核耶尔森氏菌(Yersinia pseudotuberculosis)、志贺菌( Shigella spp.)、肺炎克雷伯杆菌(Klebsiella pneumoniae)、嗜肺巴斯德杆菌 Heyl 生物型 ( Rodentibacter heylii) 和 支 气 管 鲍 特 杆 菌 ( Bordetella bronchiseptica) 的 鉴 定 存 在 偏 差。 结论 MALDI-TOF MS 方法高效、准确率高,可用于实验动物病原菌的快速鉴定

摘要:目的 分析哮喘动物模型造模要素,为提高造模成功率及有效评价受试药物提供方法学参考。 方法 以哮喘和动物模型为主题词,搜索中国知网(2009 年 1 月至 2019 年 8 月)相关期刊文献,收集实验动物种 类、激发方式、致敏方法、检测指标等,建立数据库,进行统计分析。 结果 纳入符合标准的期刊文献 118 篇,其中使用最多的实验动物种类为 BALB/ c 小鼠(43 次,36. 4%)和 SD 大鼠(42 次,35. 5%);使用最多激发方式为雾化激 发(102 次,86. 4%);使用最多的致敏方法为卵清白蛋白(OVA)致敏(107 次,90. 6%);检测最多的指标为肺组织病 理(92 次,77. 9%)、血清中生化指标(49 次,41. 5%)、肺泡灌洗液细胞分类计数(42 次,35. 6%)、肺组织免疫组化 (40 次,33. 9%)、肺泡灌洗液上清中生化指标(39 次,33. 1%)等。 结论 建立哮喘动物模型时使用 BALB/ C 小鼠 或 SD 大鼠作为实验动物,采用雾化激发的方式雾化致敏,用 OVA 作为致敏抗原,可以提高模型的成功率,指标选 取建议选取肺组织病理、血清中生化指标、肺泡灌洗液细胞分类计数等以有效的评价受试药物,为更好的进行哮喘 动物实验研究提供依据

摘要:动物生物安全实验室的管理分两条路径进行,一是行政管理路径,由单位授权的部门管理;二是兽医技术路径,是通过兽医巡检管理。 两条路径各负其责,又相互配合,覆盖生物安全所有环节。由于动物感染实验 的活动越来越多,用于病原性研究的动物种类跨度也越来越大,远远超过经典“实验动物”的种类,比如蝙蝠、野鸟、蜱虫和各种患病的源头动物,动物实验生物安全问题伴随而来,使得实验室管理和技术要求难度加大,有时甚至觉 得无从管理。 动物生物安全实验室的管理中,往往发现管理责任和技术要求主体不十分清楚。该文就有关问题进 行了讨论并提出一些建议,供管理人员和使用人员参考

摘要:Graves 病(Graves’ disease,GD)是一种常见的器官特异性自身免疫性疾病,其发病机制及病因尚不 十分明确,目前普遍认为 GD 的发病与免疫学、遗传学、表观遗传学及环境等因素有关,而免疫因素在 GD 的发生发 展中发挥着至关重要的作用。 近年来,研究发现多种免疫细胞参与了 GD 的发病过程,这为 GD 的诊疗提供了新的 思路。 多项研究表明,辅助性 T 细胞和调节性 T、B 细胞的异常表达以及细胞因子的异常分泌与 GD 的发病有关。 因此,本文就辅助性 T 细胞和调节性 T、B 细胞在 GD 中的作用进行综述

摘要:Keap1,Nrf2,p62,NLRP3 炎性小体,自噬

摘要:慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD,以下简称为慢阻肺)是一种气道炎症性疾病,具有较高的发病率及病死率,给患者及社会带来沉重负担,目前对其发病机制及治疗方法仍未研究透彻。尽管动物模型仅能模拟疾病的部分特征,但它们对于进行慢阻肺生理病理、治疗的进一步研究是不可或缺的。本文结合 PubMed 收录的近三年慢阻肺造模相关文献,总结慢阻肺动物模型的模型动物种类、造模方法及测量指标

摘要:心力衰竭是心血管疾病发展的最终阶段,因而针对心力衰竭的精准治疗策略意义重大。 环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸鸟苷(cGMP)是调节信号转导的第二信使,它们在心脏和心肌细胞活动中有着重要意义。 磷酸二酯酶(PDEs)是一组分布和功能各具特点的水解酶,它们能够有效调节 cAMP 和 cGMP 的浓度进而干预细胞活动。 PDE3 和 PDE5 的抑制剂是现在临床常用的针对心血管疾病治疗用药,对于它们的临床和基础研究不断更新。随着人们对这些 PDEs 功能和药理价值不断深入的探索,我们会对相应的心衰治疗策略有更加深入的认识,与此同时,了解这些研究的进展能够帮助我们洞悉心衰治疗的策略以及正性肌力药的发展方向。

摘要:冻结肩是一种肩关节的慢性、自限性疾病,其病因病机至今尚未完全明确。它的主要病理变化为肩关节囊挛缩、增厚、纤维化及慢性滑膜炎。近年来,动物模型在阐述冻结肩的发病机制、治疗、预防中有着重要作用。国内外学者基于大鼠、小鼠、犬类、兔子等不同动物,采用不同的造模方式建立模型用来开展冻结肩方面的研究。然而,出于不同研究目标,目前已发展出的多种冻结肩动物模型分别有自己的优势和局限性。本文将对若干种典型的冻结肩动物模型的造模方法进行详细的研究和讨论,并介绍基于这些方法取得的冻结肩病因病机方面的 研究进展,期望能为基础研究和临床医学探索提供有益的思路。