摘要: 目的 构建 Sirt3 基因 RNA 干扰慢病毒载体,建立 Sirt3 基因稳定干扰的人神经母细胞瘤细胞 SH- SY5Y 细胞株。 方法 从 Genbank 中检索到 Sirt3 基因序列,根据此序列设计 Sirt3 基因的 4 条 siRNA 干序列和 1 条阴性对照序列,将它们分别与含绿色荧光蛋白(GFP)编码基因的线性化慢病毒载体连接,获得 4 种重组慢病毒质粒。 将 4 种重组的干扰病毒质粒分别与慢病毒包装质粒共转染 293T 细胞,测定病毒滴度。 将 4 种构建的慢病毒载体感染 SH-SY5Y 细胞,采用 Real-time PCR 和 Western blot 检测 Sirt3 的沉默效果,筛选出最有效干扰 Sirt3 基因表达组。 结果 测序证实成功构建了 4 种 Sirt3 基因 RNA 干扰慢病毒载体,病毒滴度分别为:LV-Sirt3-RNAi-1 8× 10⁸ TU/ mL、LV-Sirt3-RNAi-2 3×10⁸ TU/ mL、LV-Sirt3-RNAi-3 8×10⁸ TU/ mL、LV-Sirt3-RNAi-4 8×10⁸ TU/ mL。 与空白对照组(CON)和阴性对照组(NC) 相比,LV-Sirt3-RNAi-3 组 mRNA 表达水平及蛋白表达水平显著下降(P< 0. 001, P<0. 001)。 结论 成功构建 Sirt3 基因 RNA 干扰慢病毒载体,并筛选出最佳干扰序列组,获得稳定沉默 Sirt3 表达的 SH-SY5Y 细胞株,为后续研究 Sirt3 在帕金森病细胞模型中的作用奠定了基础。

摘要: 目的 探究下调 miR-128-3p 缓解脓毒症大鼠急性肺损伤的炎症反应和肺组织形态学的影响。 方法 选取 60只健康 3 周龄 SD 大鼠,采用随机分组法将大鼠分为:假手术组、脓毒症模型组、空白转染组和 miR-128-3p沉默组,每组 15 只。除假手术组外各组大鼠采用盲肠结扎穿孔法制备大鼠脓毒症模型;空白转染组构建空白质粒并转染大鼠;miR-128-3p 沉默组构建慢病毒质粒并转染大鼠。 RT-PCR 检测 miR-128-3p 表达,确定干扰成功;检测各组大鼠静息通气量、气道阻力改变和肺容积变换情况;采用 ELISA 检测外周血清 IL-6、TNF-α、iNOS 的含量;采用 HE 染色观察肺上皮组织纤维化情况及病理损伤情况;采用 TUNEL 染色结合蛋白质印记检测肺组织中 Caspase-3 和 Caspase-9 的表达;采用 MASSON 染色结合蛋白质印记检测 TGF-β 和 α-SMA 的表达情况。 结果 HE 染色结果显示:miR-128-3p 沉默组细胞分布较为均匀,且坏死细胞较少。 MASSON 染色果显示:脓毒症模型组肺组织出现严重纤维化和损伤,miR-128-3p 沉默组肺组织纤维化程度得到改善。相比假手术组,脓毒症模型组大鼠 miR-128-3p 表达、气道阻力、IL-6 含量水平、iNOS 含量水平、TNF-α 含量水平、肺组织细胞凋亡率、 cleaved cas3 / Caspase-3、 cleaved cas9 / Caspase-9、TGF-β 蛋白相对表达和 α-SMA 蛋白相对表达均显著升高(P<0.05),静息通气量、气道阻力改变和肺容积变换显著降低(P<0.05)。 相比空白转染组,miR-128-3p 沉默组 miR-128-3p 表达、气道阻力、IL-6 含量水平、iNOS 含量水平、TNF-α 含量水平、肺组织细胞凋亡率、cleaved cas3 / Caspase-3、cleaved cas9 / Caspase-9、TGF-β 蛋白相对表达和 α-SMA 蛋白相对表达均显著降低(P<0.05),静息通气量、气道阻力改变和肺容积变换显著升高 (P<0.05)。 结论 下调 miR-128-3p 可以缓解脓毒症大鼠急性肺损伤,其作用机制可能与降低大鼠体内炎症反应并抑制肺组织细胞的凋亡相关。

摘要: 目的 本文旨在探讨胍基丁胺对丙泊酚诱导的新生大鼠的神经毒性的影响。 方法 通过腹腔注射丙泊酚诱导神经损伤模型将大鼠分为 5 组:Control 组、Propofol 组、Propofol +Agmatine 1. 25 mg / kg 组、Propofol + Agmatine 2. 5 mg / kg 组和 Propofol+Agmatine 5 mg / kg 组。 跳台实验检测犯错次数,2,3,5-三苯基氯化四氮唑法检测脑含水率、脑指数,Longa 法评价神经功能缺陷评分、姿势反射评分 HE 染色检测海马区病理损伤程度,Nissl 染色检测海马区组织凋亡,蛋白免疫印迹检测各组大鼠脑组织 BDNF、NGF、Bax、Bcl-2、Nrf2、p-Nrf2、HO-1 蛋白表达水平。 结果 结果表明,与 Control 组相比较,Propofol 组犯错次数显著升高(P<0. 05),脑含水率、脑指数显著升高(P< 0. 05),神经功能缺陷评分、姿势反射评分显著升高(P<0. 05),呈现明显病理损伤,BDNF、NGF 蛋白水平显著降低 (P<0. 05),Nissl 小体数目明显减少,Bax / Bcl-2 比值显著升高(P<0. 05),p-Nrf2 / Nrf2 比值和 HO-1 蛋白水平显著降 低(P<0. 05)。 与 Propofol 组相比较,Propofol+Agmatine 2. 5、5 mg / kg 组犯错次数显著降低(P<0. 05),脑含水率、脑指数显著降低(P<0. 05),神经功能缺陷评分、姿势反射评分显著降低(P<0. 05),病理损伤程度明显改善,BDNF、 NGF 蛋白水平显著升高(P<0. 05),Nissl 小体数目明显增多,Bax / Bcl-2 比值显著降低(P<0. 05),p-Nrf2 / Nrf2 比值和 HO-1 蛋白水平显著升高(P<0. 05)。 结论 胍基丁胺通过调节 Nrf2 / HO-1 信号通路减轻丙泊酚诱导的新生大鼠的神经毒性。

摘要: 目的 采用 CRISPR/ Cas9 系统敲除肝癌细胞系 HepG2 的高迁移率蛋白 A2(HMGA2) 基因,探讨 HMGA2 敲除对于肝癌细胞生长、增殖、迁移以及侵袭的影响。 方法 根据 GenBank 数据库搜索人 HMGA2 序列,利用在线 sgRNA 设计软件针对 HMGA2 的第一外显子以及第二外显子各设计一条 sgRNA,构建靶向 HMGA2 的 sgRNA 重组敲除载体 sgE1 和 sgE2,将 sgRNA 载体转染细胞,通过有限稀释法筛选得到 HMGA2^{- / -}细胞株。 通过 CCK8 实验以及平板克隆形成实验检测 HMGA2 敲除对于 HepG2 细胞生长以及克隆形成能力的影响;采用 Transwell 实验检测 HMGA2 敲除对于 HepG2 细胞迁移与侵袭的影响。 结果 相比于野生型,HMGA2^{- / -}细胞株的生长速率减慢,克 隆形成能力(121. 83 ± 21. 68 vs 59. 50 ± 20. 68,P< 0. 01)、迁移(359. 67 ± 32. 53 vs 245. 61 ± 24. 23,P< 0. 05)与侵袭(251. 33 ± 43. 43 vs 47. 00 ± 10. 00,P< 0. 01)能力显著下降。 结论 HMGA2 敲除降低了肝癌细胞 HMGA2 的体外生存能力以及转移能力,HMGA2 基因可以作为一个肝癌治疗的潜在靶点。

摘要: 目的 探究姜黄素对高糖诱导的人视网膜色素上皮(RPE)细胞中 microRNA-125b(miR-125b)表达及细胞损伤的影响。 方法 体外培养 ARPE-19 细胞,分为对照组、高糖组、高糖+姜黄素组、高糖+miR-125b 抑制物 (inhibitor)组、高糖+抑制物阴性对照(inhibitor-NC)组,MTT 检测 ARPE-19 细胞活性,Annexin V-FITC/ PI 双染法检测 ARPE-19 细胞凋亡情况,2′-7′-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)探针负载法检测细胞内活性氧(ROS)水平,酶 联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)水平,RT-qPCR 检测细胞中 miR-125b 表达水平。 结果 MTT 实验结果显示,姜黄素可显著提高高糖环境下 ARPE-19 细胞活性。姜黄素可显著降低高糖环境下 ARPE-19 细胞凋亡率及 ROS 生成,增加 SOD 表达。 RT-qPCR 实验结果显示,姜黄素可显著降低 miR-125b 表达水平。 结论 姜黄素可能通过下调 miR-125b 表达降低 ROS 生成及增加 SOD 表达,提高 ARPE-19 细胞抗氧化能力保护其免受高糖诱导的细胞损伤。

摘要: 目的 探讨细胞液泡分选蛋白 4B(VPS4B)对人牙髓干细胞( hDPSCs)成牙本质分化及 Notch 通路的影响。 方法 hDPSCs 分正常组、矿化组、阴性对照组、VPS4B-siRNA 组,除正常组(正常培养,不做任何处理)外, 其余各组添加矿化液(0. 785 g / L 地塞米松、0. 05 g / L 维生素、2. 16 g / L β-甘油磷酸钠),同时阴性对照组和 VPS4B- siRNA 组均用脂质体 Lipofectamine 2000 分别和阴性对照 siRNA、VPS4B-siRNA 共转染。 CCK8 检测细胞增殖情况; 蛋白免疫印迹检测细胞中 VPS4B、Notch 受体释放其胞内结构域(NICD)、hairy 相关转录因子 1(Hey1)蛋白水平;茜素红染色观察细胞矿化情况;钙浓度检测试剂盒检测细胞钙浓度;实时荧光定量 PCR 检测细胞 Runx2、骨桥蛋白 (OPN)、牙本质涎磷蛋白(DSPP)mRNA 水平。 结果 正常组茜素红染色较浅,面积较小;矿化组、阴性对照组染色较深,且面积较大;VPS4B-siRNA 组染色颜色有所减轻,面积减少。与正常组相比,矿化组、阴性对照组 OD₄₅₀水平, NICD、Hey1 蛋白水平降低(P<0. 05),矿化结节相对数量,VPS4B 蛋白水平,钙浓度,Runx2、OPN、DSPP mRNA 水平 升高(P<0. 05);VPS4B-siRNA 组矿化结节相对数量,OPN、DSPP mRNA 水平升高(P<0. 05);OD₄₅₀水平,NICD、Hey1 蛋白水平降低(P<0. 05)。分别与矿化组、阴性对照组相比,VPS4B-siRNA 组 NICD、Hey1 蛋白水平升高(P<0. 05); OD₄₅₀水平,VPS4B 蛋白水平,矿化结节相对数量,钙浓度,Runx2、OPN、DSPP mRNA 水平降低(P<0. 05)。 结论 干扰 VPS4B 后可抑制 hDPSCs 牙本质分化,并初步探究可能是通过激活 Notch 通路实现的。

摘要: 目的 应用微卫星标记比较两个实验小鼠群体的遗传结构组成。 方法 应用 36 个微卫星标记分 析两个实验小鼠群体的遗传结构组成。从两个群体中各提取 38 份基因组 DNA,进行 PCR 扩增和基因测序,应用统计分析软件 PopGen1. 32 和 Littleprogram0. 6 计算两个群体的遗传结构参数。 结果 A 群的平均等位基因数为 2. 4839,平均杂合度为 0. 3376,平均多态性信息含量为 0. 2875。 B 群的平均等位基因数为 3. 4839,平均杂合度为 0. 4806,平均多态性信息含量为 0. 4088。 结论 两个实验小鼠群体的遗传结构组成存在差异,长期封闭繁育导致群体遗传结构发生改变。 建议对封闭群实验动物种群进行定期的遗传结构监测,确保实验动物的遗传质量。

摘要: 目的 探究石榴补血糖浆对 Wistar 大鼠贫血症的影响。 方法 通过喂食 Wistar 大鼠低铁饲料并辅以少量尾静脉放血建立血虚模型。 造模成功后大鼠随机分为模型组,石榴补血糖浆高、中、低剂量组和阳性药物组,另设空白对照组,各组给予相应的干预措施。 在第 10 天和第 20 天采血测定血常规;在第 20 天处死大鼠,采集血液和骨髓,测量血清中促红细胞生成素(EPO)含量,检测骨髓内有核细胞数量和有核细胞中干细胞因子( SCF)、 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的核酸和蛋白表达。 结果 各石榴补血糖浆组相较于模型组临床症状有所缓解,死亡率降低,外周血细胞增多,血清中 EPO 含量降低。 中剂量组与模型组相比,骨髓有核细胞数增加,且有核细胞中 SCF、GM-CSF 的核酸和蛋白表达水平升高。 结论 石榴补血糖浆对 Wistar 大鼠贫血症有明显的缓解作用。

摘要: 目的 比较分析不同月龄 SD 大鼠外周血和免疫器官的免疫细胞分型指标性别差异。 方法 选用 12 月龄 SD 大鼠和 2 月龄 SD 大鼠,雌雄各半,检测外周血细胞计数及分类、脏器指数、外周血和脾免疫细胞分型、 脾 T 细胞 P16 表达量,并对结果进行性别差异比较。 结果 年轻大鼠的各项检测指标未见性别差异。 外周血计数与分类结果显示,与青年大鼠比较,老年雌性大鼠白细胞下降;老年雄性大鼠和老年雌性大鼠红细胞上升,两项指标均具有性别差异;老年雄性大鼠和老年雌性大鼠均表现为中性粒百分比上升、淋巴细胞百分比下降、嗜酸性粒细胞百分比升高,未见性别差异;外周血其他指标未见明显改变。 老年雌性大鼠胸腺指数低于老年雄性大鼠;老年雄性大鼠脾指数升高,并高于老年雌性大鼠。 外周血免疫细胞流式分析结果显示,老年雌性大鼠辅助 T 细胞、调节 T 细胞和细胞毒性 T 细胞上升;老年雌性大鼠 B 细胞下降;老年雄性大鼠自然杀伤细胞升高;这几项指标均具有性别差异。 脾淋巴细胞分型结果显示,老年雌性大鼠 CD3+升高,CD45RA+下降。 脾 T 细胞 P16 表达量老年大鼠 P16 均升高,未见性别差异。 结论 本研究各项指标在青年组大鼠未见性别差异,老年大鼠在外周血白细胞、红细胞计数,中性粒、单核细胞百分比;免疫脏器指数;免疫细胞分型分析中调节 T 细胞,细胞毒 T 细胞,自然杀伤细胞,B 细 胞,CD3 阳性细胞等指标改变均存在性别差异。 提示老年大鼠的免疫系统的内稳态(homeostasis)平衡失调,在老年性改变中的一些指标出现性别差异。 本研究结果为研究老年疾病及衰老动物模型提供了性别对老龄化影响的基础数据。

摘要: 目的 对能力验证计划中的血清样本进行稳定性检验。 方法 依据 CNAS-CL04,对样本进行保藏稳定性检验,加速稳定性检验,运输稳定性检验以及最终稳定性验证。 结果 该样本在-20℃ 和 4℃ 条件下可以稳定保存 50 d;该样本在 37℃和室温(19. 5℃ ~ 21. 5℃ )条件下可以稳定保存 27 d;在运输条件下,样本可以稳定保存;样本通过最终稳定性验证。 结论 该样本能够满足能力验证计划的要求,酯酶-1 血清样本是开展能力验证计划的理想样本。

摘要: 目的 观察小鼠异氟醚麻醉前接受咪达唑仑联合布托啡诺给药后的麻醉效果、内环境稳定,评价安全性。 方法 选择 75 只小鼠随机分为 3 组,分布为:对照组,仅予以小鼠异氟醚麻醉;观察组,小鼠异氟醚麻醉前 接受咪达唑仑联合布托啡诺给药;空白组,不予以小鼠任何麻醉处理。 每组 25 只。 分别于诱导即刻及诱导后 1 h 内每 5 min 测定心率及血氧饱和度(SpO₂ )。 比较麻醉前、麻醉中各组小鼠血清血糖(Glu)及皮质醇(Cor)水平。 比较各组小鼠诱导和恢复时间、镇痛镇静效果等指标的差异。 比较诱导过程中各组不良反应发生率差异。 结果 与对照组相比,观察组诱导时间、镇静起效时间与疼痛消失时间显著较低(P<0. 05),而恢复时间无差异(P>0. 05)。 空白组心率高于对照组和观察组(P<0. 05);诱导后 5~ 35 min 时刻,对照组心率高于观察组(P<0. 05);诱导后 35~ 60 min 时刻,对照组心率低于观察组(P<0. 05)。 诱导后 1 h 对照组 SpO₂ 低于观察组及空白组(P<0. 05);观察组 及空白组 SpO₂ 无显著差异(P>0. 05)。 三组心率的变化趋势有差别(F= 15. 215,P= 0. 000)。 三组 SpO₂ 的变化趋势无差别(F= 1. 015,P= 0. 180)。 麻醉前三组 Cor、Glu 水平无统计学差异(P>0. 05);麻醉中对照组 Cor、Glu 水平高于空白组和观察组(P<0. 05),而空白组和观察组 Cor、Glu 水平无统计学差异(P>0. 05)。 对照组术中 Cor、Glu 较术前升高(P<0. 05),而空白组和观察组 Cor、Glu 水平无统计学差异(P>0. 05)。 对照组和观察组不良反应总发生率 无显著差异(P= 0. 626)。 结论 异氟醚麻醉前接受咪达唑仑联合布托啡诺给药后的麻醉效果确实,麻醉诱导平稳,呼吸抑制减轻,且安全性高。

摘要: 目的 观察腺嘌呤诱发大鼠慢性肾病模型中肾 c-Myc、RhoA 和 YAP 蛋白的表达及其与肾小管间质纤维化的关系。 方法 将 30 只大鼠随机分为对照组(Con 组)和模型组(CKD 组,腺嘌呤灌胃诱导的 CKD 大鼠模型),分别于第 4、6、8 周处死大鼠。 检测两组大鼠肾功及 24 h 尿蛋白水平;HE 染色观察肾病理改变并进行肾间质损伤程度评分;天狼星红染色观察肾小管间质纤维情况并判断其纤维化程度;免疫组化染色观察肾组织中 c-Myc、 RhoA 和 YAP 蛋白的表达情况;RT-PCR 检测大鼠肾 c-Myc、RhoA、YAP 和 Vimentin、Col1、α-SMA mRNA 水平,分析 c-Myc、RhoA 和 YAP 表达程度与肾小管间质纤维化的关系。 结果 与 Con 组比较,CKD 组大鼠各时间点肾功能和 24 h 尿蛋白水平均明显升高(P<0. 05),HE 染色可见肾组织中肾小管明显扩张,天狼星红染色见肾间质内胶原纤维明显增多。 免疫组化显示 CKD 组大鼠各时间点肾小管上 c-Myc、RhoA、YAP 和 Col1、α-SMA 蛋白表达明显高于 Con 组,差异具有统计学意义(P< 0. 05)。 c-Myc、RhoA、YAP mRNA 水平与 Col1 mRNA( r= 0. 927 P= 0. 001; r= 0. 988 P= 0. 001; r= 0. 745 P= 0. 013)和 α-SMA mRNA 的表达均呈正相关关系(r= 0. 988; P= 0. 001; r= 0. 818;P= 0. 004; r= 0. 770 P= 0. 009)。 此外,c-Myc 和 RhoA mRNA、RhoA 和 YAPmRNA 之间也明显正相关( r= 0. 721 P= 0. 019;r= 0. 661 P= 0. 038)。 结论 在腺嘌呤诱发大鼠肾小管间质纤维化模型中,c-Myc、RhoA 和 YAP 呈现高表达且与肾小管间质纤维化程度密切相关。

摘要: 目的 使用 miR-335-5P 和转化因子-β(TGF-β)处理妊娠期糖尿病(GDM)小鼠,明确 miR-335-5P 调控 TGF-β 通路参与促进胰岛 β 细胞分泌和增强胰岛素抵抗机制,为治疗 GDM 患者开辟新道路。 方法 SPF 级 Balb / c 小鼠以雌性和雄性小鼠 2 ∶1合笼饲养,10 只正常妊娠小鼠作为空白组,48 只成功构建 GDM 模型的小鼠作为 GDM 组并随机分成 A、B、C、D、E、F 组,每组各 8 只小鼠。 A 组(模型组)、B 组(模型组+溶媒)、C 组(模型组+miR- 335-5P 模拟物)、D 组(模型组+miR-335-5P 抑制剂)、E 组(模型组+si-TGF-β)、F 组(模型组+miR-335-5P 抑制剂+ si-TGF-β)。 药物处理后行口服葡萄糖耐量试验(OGTT)检测空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FIRI),计算稳态模型胰岛素抵抗指数(IRI);进行高血糖钳夹试验测定葡萄糖输注速率(GIR),估计胰岛 β 细胞功能;采用 RT-qPCR、蛋白质印迹分析和 ELISA 胰岛素释放测定胰岛 β 细胞中 miR-335-5P、TGF-β 通路关键因子 mRNA 水平。 结果 D、F 组 FBG、FIRI、IRI 低于给药前低于 C、E 组(P<0. 05);D、F 组 GIR、第一时相胰岛素、最大胰岛素高于给药前高于 C、 E 组(P<0. 05);D、F 组 miR-335-5P、TGF-β、c-Myc 表达低于 C、E 组低于 A、B 组(P<0. 05);在胰岛 β 细胞中检测到 miR-335-5P 表达时,TGF-β、c-Myc 均有不同程度的表达;TGF-β 在胰岛 β 细胞胞质内表达,且 D、F 组 TGF-β 表达高于 C、E 组高于 A、B 组(P<0. 05)。 结论 miR-335-5P 可上调 GDM 小鼠 c-Myc 表达,进一步激活 TGF-β 通路,增强胰岛素抵抗并抑制胰岛 β 细胞分泌。

摘要: 目的 研究评价不同的环境丰容方案对大鼠行为和肾上腺皮质激素的影响。 方法 45 只 6 周龄雄性 SD 大鼠,随机分为 4 组,单笼组 9 只,单笼饲养。 新奇组、丰容组和对照组各 12 只,3 只/ 笼饲养。 新奇组提供由筑巢材料、遮蔽物、磨牙棒 3 种丰容材料组成的复合丰容方案,并每周更换不同的组合方案。 丰容组只提供 1 种丰容材料,丰容材料在更换垫料时根据损耗情况及时更新。 对照组和单笼组不提供丰容材料。 连续丰容 9 周,采用瞬时扫描法记录大鼠行为时间分配,利用 ELISA 试剂盒检测血清和尿中促肾上腺皮质激素(ACTH) 及皮质酮 (CORT)浓度。 结果 新奇组探究行为显著高于其他组,单笼组不活跃行为增加,单纯性活动行为极显著增加,丰容组和对照组无显著差异。 血清中 ACTH 和 CORT 的浓度各组间无显著性差异。 尿液中 ACTH 和 CORT 浓度呈现新奇组>单笼组>对照组>丰容组的趋势,但除新奇组 ACTH 极显著高于其他三组,其他差异不显著。 结论 单笼饲养抑制 SD 大鼠行为表达,是对动物福利的损害,而复合新奇的丰容方案虽增加大鼠探究行为等积极行为,但同时对肾上腺皮质激素也有影响,实际应用时应根据具体饲养条件选择简单实用的环境丰容材料和方案。

摘要: 目的 观察利拉鲁肽对糖尿病小鼠肝糖异生关键酶葡萄糖-6-磷酸(G-6-Pase)及磷酸烯醇式丙酮 酸羧化酶(PEPCK)的表达影响及机制探讨。 方法 动物实验设计分 3 组:正常对照组(雄性 C57 小鼠,n= 5),腹腔注射生理盐水;模型对照组(雄性 KK-Ay 糖尿病小鼠,n= 5),腹腔注射生理盐水;利拉鲁肽干预组(雄性 KK-Ay 糖尿病+药物干预小鼠,n= 5),腹腔注射利拉鲁肽。 3 组小鼠均在在相同的饲养环境下饲养。 干预 8 周,检测小鼠的血糖,采用 Western blot 方法检测 FOXO1,隐花色素 1(cryptochrome 1, CRY1),E3 泛素蛋白酶 DDB1,糖异生关键酶葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)及磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPCK)的表达情况。 结果 与模型对照组相比,利拉鲁肽干预组血糖显著下降;利拉鲁肽干预后糖尿病小鼠肝 DDB1,FOXO1,G6Pase 与 PEPCK 的表达减少,而隐花色素 1(cryptochrome 1, CRY1)的表达增加。 结论 利拉鲁肽可以下调糖尿病小鼠肝糖异生关键酶 G6Pase 及 PEPCK 的表达,其作用可能与下调 E3 泛素蛋白酶 DDB1 有关。

摘要: 目的 以猴-人免疫缺陷病毒(simian-human immunodeficiency virus,SHIV)gag 基因为特异性扩增靶标,建立一种快速、灵敏、特异的 TaqMan 实时荧光定量 PCR 法检测猴血浆、外周血单核细胞和淋巴结中的猴免疫缺陷病毒(simian immunodeficiency virus,SIV)和 SHIV。 方法 以 SHIV_SF162p3n gag 基因为模板,用普通 PCR 方法扩增出 109 bp DNA 片段用于克隆构建标准品质粒 pGEM? -T-SHIV gag。 通过对 SHIV 标准品质粒定量分析,优化反 应体系,检测 TaqMan 实时荧光定量 PCR 方法的灵敏度、特异度和重复性。 结果 TaqMan 实时荧光定量 PCR 法能有效地检测出 10² ~ 10⁷ copies/ μL SIV/ SHIV gag 基因 mRNA,线性系数为 R² = 0. 998,slop = -3. 304。 方法重复性检测显示 CV%在 0. 6% ~ 1. 1%之间。 结论 该 TaqMan 实时荧光定量 PCR 法具有快速、灵敏和特异性高的优点,适用于 SIV/ SHIV 感染猴动物模型的研究工作。

摘要: 目的 调查“实验动物学”线上教学的效果,以期为今后的教学活动提供参考。 方法 本研究采用问卷形式,以北京某高校动物医学院“实验动物学”的线上教学活动为基础,调查该课程线上教学情况,及学生关于教学的意见与建议。 结果 动物医学专业“实验动物学”课程线上教学能基本满足教学的目标和效果,但单纯线上教学缺乏实践教学环节,将线上与线下教学相结合,能达到更好的教学效果。 结论 本研究为今后“实验动物学” 教学活动的开展提供了一定的参考和建议,但仍需不断对课程的教学进行思考总结,探索多元化的教学方式,提高课程的教学质量。

摘要:心血管疾病是全球疾病负担之首,其中缺血性心脏病严重危害着人们身心健康,且发病率和死亡率仍在增加。 冠状动脉旁路移植术是治疗缺血性心脏病的方法之一,它有效得重建了心脏血运,但是面临着静脉移植血管远期通畅率不足的问题。 因此,稳定的动物模型能够为研究解决静脉旁路移植疾病提供工具。 本文总结了静脉旁路移植病动物模型的建立及应用,为建立疾病动物模型研究提供新思路。

摘要:宫内感染可由多种病原体侵入妊娠子宫腔内,引起异常妊娠及新生儿疾病等母婴不良结局,但由于发病机制尚未明确,治疗效果欠佳,预后差。 因此,建立稳定、可靠的宫内感染动物模型有助于对其发病机制、药物作用机制及预防等方面进行更深入的研究,对降低母婴不良结局及改善预后有重要的意义。 目前国内外建立宫内感染的动物模型主要有:大肠杆菌或脂多糖诱导的宫内感染模型、解脲支原体宫内感染动物模型、念珠菌宫内感染动物模型、巨细胞病毒宫内感染动物模型等,本文主要从实验动物的选择、不同造模方法的实验设计及其优缺点等方面进行综述。

摘要:作为一种新的程序性细胞死亡方式,越来越多的证据表明铁死亡(ferroptosis)借助于铁代谢紊乱、脂质代谢异常等多种作用机制在呼吸系统疾病发生发展过程中发挥重要作用,其作用不容忽视。 本文总结了目前铁死亡的作用机制及在呼吸系统疾病发生发展过程中的作用研究概况,以期为进一步研究提供理论基础。