• 2018年第28卷第8期文章目次
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    • 实验动物设施的职业健康管理体系的建立与实施初探

      2018, 28(8):1-6. DOI: 10.3969/j. issn. 1671 -7856. 2018. 08. 001

      摘要 (1972) HTML (0) PDF 1.62 M (2670) 评论 (0) 收藏

      摘要:职业病已经成为各国经济发展和社会和谐及稳定的巨大挑战?据国际劳工组织统计,全球约有近1. 6 亿人患职业病,花费约1. 25 万亿美金,约占全球总GDP 的4%?在中国,职业病危害的人群已经超过了生产安全事故和交通事故?日益增加的职业病的危害不但损害了劳动者的健康,而且给用人机构和国家造成严重的经济负担?国际发达国家对职业病及职业健康非常重视,关注度高,有成熟的管理体系?相对来说,我国职业健康起步晚,与欧美国家相比差距较大?近年来,随着我国经济水平的提高和社会发展,人们对职业健康安全的要求和认识也不断深入,国家也开始重视职业健康并在近年来出台了不少法规政策?国家标准委员会及中国合格评定国家认可委员会也对职业健康管理提出了要求?然而,怎样建立一个有效的,可实施的,从运营成本可接受的职业健康体系对许多实验动物机构来讲还是一个难题?本文旨在通过作者多年在实验动物机构建立职业健康体系的经验,分享一些体会,给大家一些相关的建议及参考?

    • 实验动物从业人员环境健康安全管理体系中生物安全培训的重要性

      2018, 28(8):7-10. DOI: 10.3969/j. issn. 1671 -7856. 2018. 08. 002

      摘要 (2352) HTML (0) PDF 878.15 K (2348) 评论 (0) 收藏

      摘要:环境健康安全(environment health and safety, EHS)管理体系是指环境?健康?安全的组织结构,以及相关责任?流程和资源等相结合的统一管理系统,而生物安全是EHS 管理体系中的重要内容之一?本文从实验动物从业人员EHS 管理体系的角度探讨生物安全管理及相关培训在其中的重要作用,拟从EHS 管理体系,实验动物从业人员职业风险分析以及生物安全培训等方面进行简要综述?

    • 化学消毒剂在实验动物设施中的应用及职业健康防护

      2018, 28(8):11-15. DOI: 10.3969/j. issn. 1671 -7856. 2018. 08. 003

      摘要 (2469) HTML (0) PDF 787.08 K (2962) 评论 (0) 收藏

      摘要:选择良好有效的化学消毒剂,不仅能够严格控制实验动物设施环境中的微生物数量,保证实验结果的真实可信,而且能够提高工作效率?降低生产成本?实验动物从业人员在消毒剂日常使用过程中,由于没有掌握正确的消毒剂使用方法,导致消毒效果不够好甚至对自身的健康造成了不良影响,本文通过比较不同种类化学消毒剂在实验动物设施中的应用,为化学消毒剂在实验动物设施中的科学合理使用提供参考?

    • 使用动物垫料添加机或垫料倾倒机时人员呼吸防护用品的评估

      2018, 28(8):16-20. DOI: 10.3969/j. issn. 1671 -7856. 2018. 08. 004

      摘要 (2141) HTML (0) PDF 3.00 M (2034) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 通过检测分析垫料装填倾倒和过程中工作区域内空气粉尘以及氨气的浓度,来评估工作环境的气体危害,以帮助实验动物机构选择合适的呼吸防护用品?方法 选定有垫料的工作区域,连续采样3 次?自检了工作状态时垫料倾倒工作区域空气中的氨浓度并委托第三方检测公司检测了垫料装填和倾倒过程中的空气粉尘浓度?结果 检测结果发现,工作状态时垫料倾倒工作区域空气中的平均氨浓度为0. 19 mg/ m3 , 垫料分装过程中的平均空气粉尘浓度为0. 55 mg/ m3 ,倾倒过程中的平均粉尘浓度为0. 27 mg/ m3 ?上述结果均远远小于国家标准规定的工作场所有害物质浓度?结论 根据GBT18664?2002 的标准,判定理论上使用动物垫料添加机或垫料倾倒机的实验动物机构,在操作时无需使用N95 口罩?建议实验动物生产或使用单位配备动物垫料添加机或垫料倾倒机并按照国标做职业健康检测及风险评估以保护工作人员及环境,并根据具体情况配备不同的呼吸防护用品?

    • 一种实验动物设施废气处理装置的研制和初步应用

      2018, 28(8):21-25. DOI: 10.3969/j. issn. 1671 -7856. 2018. 08. 005

      摘要 (2317) HTML (0) PDF 2.02 M (2067) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 开发一种适合实验动物设施废气处理的设备,并通过实地应用验证效果?方法 研发制造基于MnOx?TiO 2 光催化和气液扰流工艺的废气处理设备,安装于西安某实验动物设施楼面,按照国家标准规定的方法,选取氨?硫化氢?臭气浓度三个指标,对比处理前后污染物的厂界浓度?排风口浓度和排放量?结果 经过光催化和气液扰流处理后,氨?硫化氢?臭气的厂界浓度明显降低,清除率分别为96. 9%?95. 8%?94. 0%;污染物排气口浓度和排放量明显降低,所测指标均低于《恶臭污染物排放标准》(GB14554?93)相应限值规定?结论 基于新型光催化和气液扰流技术的废气处理设备,可以有效清除实验动物设施排放的主要恶臭污染,减少对周边环境的影响?

    • 京尼平对ob/ ob 小鼠肝部分切除术后肝再生的影响

      2018, 28(8):26-31. DOI: 10.3969/j. issn. 1671 -7856. 2018. 08. 006

      摘要 (2107) HTML (0) PDF 9.87 M (4045) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 探讨瘦素基因遗传缺陷ob/ ob 小鼠肝部分切除术后肝再生功能的变化以及京尼平对其肝再生的影响?方法 20 只ob/ ob 小鼠按处理方式不同随机分为京尼平组(obG)和溶媒组(obP),再依据肝切除术后时间的不同随机分为肝切除术(partial hepatectomy, PH)后2 d 组和10 d 组?C57BL/6J 小鼠作为同期对照组?收集血清和肝脏标本?计算肝脏再生率;用免疫组织化学染色法检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)阳性表达率;用Feulgen 染色法检测肝细胞DNA 含量;用Western Blot 法检测信号转导和转录活化因子3(signal transducer and activator of transcription 3, STAT3) 的表达;血清生化检测肝功能指标?结果 与C57BL/6J 小鼠比较,ob/ ob 小鼠肝细胞内充满大小不等的脂滴?肝细胞气球样变及小灶性坏死;肝脏再生率( P <0. 05)?PCNA 阳性细胞数( P < 0. 01)和肝细胞DNA 含量( P < 0. 01)显著降低?与溶媒组比较,京尼平组肝细胞病变减轻?双核肝细胞明显增多;肝脏再生率( P < 0. 05)?PCNA 阳性细胞数( P < 0. 01)和肝细胞DNA 含量( P <0. 01)增高;血清ALT?AST?LDH 水平降低( P < 0. 05);p?STAT3 表达增加( P < 0. 05)?结论 脂肪肝ob/ ob 小鼠肝部分切除术后肝再生延迟;京尼平可促进ob/ ob 小鼠的肝再生?改善肝功能?

    • 聚吡咯/ 聚乳酸生物材料联合骨髓基质细胞移植治疗脊髓损伤的基础研究

      2018, 28(8):32-37. DOI: 10.3969/j. issn. 1671 -7856. 2018. 08. 007

      摘要 (2163) HTML (0) PDF 7.84 M (1307) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 研究聚吡咯(polypyrrole,PPy) / 聚乳酸(PLA) / 骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells, BMSCs)复合治疗脊髓损伤的可行性,并探讨其可能机制?方法 制备聚吡咯/ 聚乳酸支架材料?从大鼠骨髓中分离?培养BMSCs;制作大鼠脊髓全横断模型,在T8 水平脊髓头尾端完全横断脊髓,用虹膜剪刀去除长度约2. 5 mm的脊髓组织?根据植入材料的不同将实验分为PPy/ PLA 组?PPy/ PLA/ BMSCs 组及损伤组,损伤组无材料及细胞植入?术后6 周处死大鼠,观察不同移植组体内轴突和血管生长情况?结果 免疫荧光?电镜及qPCR 结果证实复合移植可以显著促进轴突和血管生长,同时也提供了神经保护作用?结论 PPy/ PLA/ BMSCs 可以促进大鼠脊髓损伤修复,其机制可能包括材料支架作用和BMSCs 在体内促进血管生成,改善局部的微环境,因此促进新轴突生长而保护局部的神经元?

    • 三种小鼠肠道病毒核酸检测技术在小鼠健康监测中的应用

      2018, 28(8):38-42. DOI: 10.3969/j. issn. 1671 -7856. 2018. 08. 008

      摘要 (1969) HTML (0) PDF 930.34 K (1849) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 应用核酸检测技术检测小鼠盲肠内容物中MHV?Reo?3?MNV 三种肠道病毒,并与血清学检测结果相比较,分析核酸检测在小鼠健康监测中的适用性?方法 随机选取本实验室接收的小鼠盲肠内容物样品,提取核酸,应用荧光定量PCR 技术检测MHV?Reo?3?MNV 三种肠道病毒;并与其血清学抗体检测结果做关联分析?结果 在272 份样品中,MHV?Reo?3?MNV 三种肠道病毒检出率分别为17. 3%,18. 8%,16. 9%;MHV?Reo?3核酸检出量多呈低拷贝状态;与血清学抗体检测结果的关联分析表明3 种病毒的核酸检测结果与抗体检测结果不完全相关?结论 实验动物小鼠群体中存在携带MHV,Reo?3,MNV 三种病毒的可能,作为血清学抗体检测技术的补充,核酸检测可作为高敏感性的方法应用于实验动物群体的健康监测?

    • 雪貂微卫星DNA 遗传多样性分析

      2018, 28(8):43-48. DOI: 10.3969/j. issn. 1671 -7856. 2018. 08. 009

      摘要 (2125) HTML (0) PDF 3.48 M (2419) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 筛选?优化雪貂微卫星DNA 引物,评估?分析雪貂种群的遗传多样性?方法 采用21 个雪貂微卫星位点,对随机抽取的30 只雪貂血液样本进行基因组DNA 提取及PCR 扩增,PCR 产物经2%Agrose 电泳和6%PAGE 电泳鉴定后进行STR 扫描检测,用Popgene1. 32 软件对STR 扫描结果进行数据处理和分析?结果 21 个微卫星标记均呈现出遗传多样性,共检测到49 个等位基因,观测等位基因数1 ~4 个,平均2. 3 个;有效等位基因数1. 000 ~3. 750 个,平均1. 6685 个;观察杂合度0 ~0. 7333,平均0. 3216;期望杂合度0 ~0. 6424,平均0. 3394;香隆指数0 ~1. 1773,平均1. 0768;多态信息含量0 ~0. 6100,平均0. 5485?结论 本文筛选的21 对雪貂微卫星引物,通过微卫星扫描分析验证,具有稳定的PCR 扩增,微卫星标记均表现为多态性,并处于期望数值范围,没有显著地偏离Hardy?Weinberg 平衡期望值?

    • 辛伐他汀PLGA 缓释微球对大鼠椎间盘退变的影响

      2018, 28(8):49-55. DOI: 10.3969/j. issn. 1671 -7856. 2018. 08. 010

      摘要 (1935) HTML (0) PDF 4.10 M (2053) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 探讨辛伐他汀PLGA 缓释微球局部注射治疗大鼠椎间盘退变的疗效?方法 通过复乳法制备辛伐他汀PLGA 缓释微球,观察微球的表征及体外释药情况?将SD 大鼠椎间盘退变模型分为对照组(注射生理盐水)及实验组(注射辛伐他汀PLGA 微球),注射2?4 周后处死实验动物,通过影像学?组织学及分子生物学进行评估?结果 辛伐他汀PLGA 缓释微球呈球形?形状规则,表面光滑,平均粒径为(1. 52 ±0. 54)μm,载药率为(23. 3± 1. 3)%,包封率为(90. 4 ±2. 6)%?体外药物释放试验显示在最初24 h 内释放率为45%,而在随后144 h 内累计释放率超过81. 2%?实验组治疗后椎间盘退变程度有所减轻,与对照组同时间点比较,椎间隙高度指数?MRI 评分?HE 染色及甲苯胺蓝染色评分差异均有显著性( P < 0. 05)?实验组中骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein?2,BMP?2)?II 型胶原?蛋白多糖及缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor?1α,HIF?1α))的mRNA 表达较对照组明显增加( P < 0. 05)?结论 制备的辛伐他汀PLGA 缓释微球可达到较好的药物缓释效果?局部注射辛伐他汀PLGA 缓释微球可以改善椎间盘退变程度,促进髓核组织中II 型胶原及蛋白多糖表达,其机制可能与HIF?1α及BMP?2 表达增加有关?

    • 金黄色葡萄球菌致急性与慢性输卵管炎性不孕症大鼠模型的建立

      2018, 28(8):56-61. DOI: 10.3969/j. issn. 1671 -7856. 2018. 08. 011

      摘要 (1926) HTML (0) PDF 4.73 M (2359) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 利用金黄色葡萄球菌建立大鼠急性与慢性输卵管炎性不孕症模型?方法 制备4 × 10 9 / mL金黄色葡萄球菌悬液?将108 只大鼠随机分为正常组?模型组?假手术组,每组36 只?模型组经输卵管注入金葡菌悬液,假手术组经输卵管注入生理盐水;于术后第7?14?21?28 天肉眼观察输卵管形态改变,行金黄色葡萄球菌培养及病理学检查?结果 经输卵管注射金黄色葡萄球菌,可在术后第7 天形成急性输卵管炎性模型,第21 天形成慢性输卵管炎性模型,第28 天形成输卵管炎性不孕症模型?结论 采用浓度为4 ×10 9 / mL 金黄色葡萄球菌,注入大鼠输卵管,可成功建立急性输卵管炎与慢性输卵管炎性不孕症大鼠模型?

    • CRISPR/ Cas9 介导的小鼠BRCA1/ BRCA2/ CDH1基因乳腺特异性修饰研究

      2018, 28(8):62-69. DOI: 10.3969/j. issn. 1671 -7856. 2018. 08. 012

      摘要 (2718) HTML (0) PDF 8.26 M (1599) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 应用CRISPR/ Cas9 系统构建BRCA1?BRCA2 和CDH1 三基因乳腺特异性修饰小鼠模型?方法 针对小鼠BRCA1?BRCA2 和CDH1 基因分别设计并合成sgRNA,构建pX330?spCas9?U6?gRNA 共表达载体,将共表达载体中CBh 启动子替换为乳腺组织特异性启动子WAP?利用小鼠受精卵原核注射的方法制备转基因小鼠?结果 共注射受精卵190 枚,得到活性受精卵130 枚,移植4 只受体鼠?产下F0 代仔鼠42 只,鉴定出11 只转基因阳性小鼠,阳性率为26. 19%?F0 代阳性鼠繁育后得到39 只F1 代仔鼠,其中9 只为F1 代转基因阳性鼠?结论 通过构建乳腺组织特异表达Cas9 载体成功制备了转基因阳性鼠?

    • 肾复康Ⅵ号方对阿霉素肾病大鼠模型肾小球电荷屏障的影响

      2018, 28(8):70-76. DOI: 10.3969/j. issn. 1671 -7856. 2018. 08. 013

      摘要 (1818) HTML (0) PDF 17.20 M (1452) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 通过观察肾复康Ⅵ号方联合泼尼松对阿霉素肾病大鼠模型疗效及肾小球电荷屏障影响,探讨肾复康Ⅵ号方治疗阿霉素肾病大鼠模型的机制?方法 将大鼠随机分为五组:正常组?模型组?中药组?泼尼松组?结合组?除正常组外,给予尾静脉注射阿霉素建立肾病大鼠模型,并对应给予药物干预?每周测定各组大鼠24h 尿蛋白定量,给药4 周后检测各组大鼠血清白蛋白?肾脏组织病理变化及足细胞特异性蛋白足盂蛋白(PCX)?硫酸乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)?乙酰肝素酶(HPA)的表达水平?结果 每周模型组的24 h 尿蛋白定量比正常组均明显增高( P < 0. 05);药物干预组的24 h 尿蛋白定量与模型组比较均降低( P < 0. 05);光镜下模型组肾组织内可见系膜细胞及基质轻度增生,肾小管内可见蛋白管型,肾间质严重水肿?各治疗组肾组织病变程度与模型组比较明显减轻?模型组PCX 在肾小球基底膜上表达断裂不连续,HPA 在肾小球内皮及上皮细胞大量表达;与模型组比较,各药物干预组的肾组织PCX 表达增多( P < 0. 05),HSPG 表达无明显变化( P > 0. 05),HPA 表达减少( P <0. 05)?结论 肾复康Ⅵ号方能够降低24 h 尿蛋白定量,减轻肾脏病理改变,其机制可能与降低HPA 表达水平,上调PCX 蛋白的表达水平有关?

    • 四种开窍药对急性不完全性脑缺血再灌注损伤模型大鼠的脑保护作用

      2018, 28(8):77-82. DOI: 10.3969/j. issn. 1671 -7856. 2018. 08. 014

      摘要 (2481) HTML (0) PDF 814.82 K (1808) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 单味开窍药均有一定的脑保护作用,但还缺乏系统的对比研究?因此,本实验通过对比β?细辛醚?冰片?麝香酮及苏合香挥发油对急性不完全性脑缺血再灌注模型大鼠的作用,探讨四种开窍药的脑保护作用及其作用机制?方法 建立颈动脉结扎致大鼠急性不完全性脑缺血再灌注损伤模型,经四种开窍药物干预后,取全脑检测各组大鼠脑含水量,血清测定超氧化歧物酶(SOD)?丙二醛(MDA)?谷胱苷肽过氧化物酶(GSH?PX)?内皮素(ET?1)?降钙素基因相关肽(CGRP),脑组织检测B 淋巴细胞瘤基因(bcl?2),bcl?2 相关x 蛋白(bax)?结果 与模型组比较,β?细辛醚组?冰片组?苏合香组大鼠脑含水量均明显降低,冰片组SOD 含量显著增高,麝香酮组及苏合香组MDA 含量显著降低;各药物组与模型组相比GSH?PX 含量显著增高?ET?1 含量显著降低,脑组织内bcl?2 蛋白的含量升高,bax 蛋白含量下降,bcl?2/ bax 较模型组增高?结论 四种开窍药均能不同程度改善缺血再灌注造成的脑损伤情况,冰片在降低脑含水量方面效果最佳,苏合香挥发油能有效减少氧化应激损伤作用,麝香酮可明显增加bcl?2 蛋白,降低bax 蛋白,从而抑制脑细胞凋亡,β?细辛醚作用居中,但整体上四种开窍药有效成分/ 部位对脑缺血损伤均有一定的保护作用?

    • 小儿热速清糖浆抗流感病毒和抗菌作用研究

      2018, 28(8):83-89. DOI: 10.3969/j. issn. 1671 -7856. 2018. 08. 015

      摘要 (2182) HTML (0) PDF 5.36 M (2047) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 检测小儿热速清糖浆的抗病毒及抗菌作用?方法 采用细胞培养法计算小儿热速清糖浆对病毒的半数抑制率,建立肺炎动物模型计算小儿热速清糖浆对肺炎小鼠肺指数和肺抑制率影响?采用试管二倍稀释法测定小儿热速清糖浆体外对大肠埃希菌?金黄色葡萄球菌?铜绿假单胞菌?肺炎克雷伯菌?乙型溶血性链球菌和表皮葡萄球菌最小抑菌浓度和累积抑菌率;体内实验检测小儿热速清糖浆对金黄色葡萄球菌感染小鼠死亡率的影响?结果 小儿热速清糖浆体外抗病毒实验表明在稀释32 倍时能完全抑制流感病毒?呼吸道合胞病毒致细胞病变;体内研究表明流行性感冒病毒所致肺炎小鼠20 mL/ kg?40 mL/ kg 给药治疗作用明显( P < 0. 05)?体外抗菌实验研究表明小儿热速清糖浆2 倍稀释对6 种细菌抑制率可达90% 以上;金黄色葡萄球菌感染小鼠40 mL/ kg 给药能完全抑制其死亡?结论 小儿热速清糖浆在体内外均具有一定的抗病毒及抑菌作用,能同时达到抗病毒及抗菌效果?

    • 瑰及乳膏对大鼠III 期压疮模型纤维结合蛋白及碱性成纤维细胞生长因子的影响

      2018, 28(8):90-94. DOI: 10.3969/j. issn. 1671 -7856. 2018. 08. 016

      摘要 (1784) HTML (0) PDF 891.65 K (1855) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 本研究旨在探讨瑰及乳膏对压疮模型大鼠压疮肉芽组织中纤维粘连蛋白(fibonectin,FN)及碱性成纤维细胞生长因子(Basic fibroblast growth factor,BFGF)水平的的影响机制?方法 在128 只SD 大鼠中随机取32 只设为假手术组,另96 只均在大鼠双侧臀肌下埋置磁片外加磁铁片循环压迫缺血?再灌注的方法建立大鼠III 期压疮模型,4 d 后随机分为模型组?阳性对照组及瑰及乳膏组?假手术组和模型组外敷生理盐水纱布,阳性对照组外敷水胶体敷料,瑰及乳膏组在压疮部位外敷瑰及乳膏纱布?在治疗结束时统计压疮创面显效时间?压疮愈合速度和愈合率,并分别于治疗的第3?7?14?21 天时检测大鼠尾静脉血的血清炎症介质白介素?1β(interleukin?1β, IL?1β)?白介素?6(interleukin?6,IL?6)及C 反应蛋白(C?reactive protein,CRP)的水平,采用固相夹心法酶联免疫吸附实验检测压疮肉芽组织中FN 及BFGF 水平?结果 瑰及乳膏组显效时间和愈合时间较阳性对照组缩短,创面愈合率和愈合速度较阳性对照组提高,两组比较差异有显著性( P < 0. 05)?在治疗第14?21?28 天时,瑰及乳膏组静脉血CRP 及IL?1β?IL?6 均明显低于模型组和阳性对照组同期水平( P < 0. 05),BFGF 及FN 均明显高于模型组和阳性对照组同期水平( P < 0. 05)?结论 瑰及乳膏可能通过抑制压疮创面炎症介质IL?6?IL?1β 引起的炎症反应来减轻创面损伤,并提高BFGF 及FN 的合成来促进间质细胞的增殖和细胞外基质的合成,从而促进创面肉芽组织新生而加速创面组织修复?

    • miR⁃206 过表达靶向VEGFA 对人肝癌HepG2 细胞侵袭和迁移的抑制作用

      2018, 28(8):95-100. DOI: 10.3969/j. issn. 1671 -7856. 2018. 08. 017

      摘要 (2093) HTML (0) PDF 2.37 M (1812) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 探究miR?206 过表达对人肝癌HepG2 细胞侵袭和迁移的影响及其分子机制?方法 HepG2细胞分为四组:HepG2 空白对照组,miR?206 mimic 组,pc?VEGFA 组和miR?206 mimic + pc?VEGFA 组?qRT?PCR 检测miR?206 表达和VEGFA 的mRNA 水平?荧光素酶实验确认miR?206 与VEGFA 的靶向关系?Western blot 检测VEGFA,抗波形蛋白,N?钙粘蛋白和纤维连接蛋白的表达?Transwell 检测细胞侵袭?划痕实验分析细胞迁移?结果 转染miR?206 mimic 后HepG2 细胞中miR?206 表达显著上升,VEGFA 的mRNA 水平显著下降( P < 0. 001)?miR?206 与VEGFA 存在直接靶向关系?与对照组相比,miR?206 mimic 组VEGFA 的蛋白水平,每个视野下的侵袭细胞数目,痕愈合率显著下降( P < 0. 01)?pc?VEGFA 组VEGFA 的蛋白水平,每个视野下的侵袭细胞数目,痕愈合率显著高于对照组( P < 0. 01)?与pc?VEGFA 组相比,miR?206 mimic + pc?VEGFA 组VEGFA 的蛋白水平,每个视野下的侵袭细胞数目,痕愈合率显著降低( P < 0. 01)?miR?206 mimic 组vimentin, N?cadherin 和Fibronectin 表达低于对照组( P < 0. 01)?pc?VEGFA 组vimentin, N?cadherin 和Fibronectin 表达高于对照组( P < 0. 01)?与pc?VEGFA 组相比,miR?206 mimic + pc?VEGFA 组vimentin, N?cadherin 和Fibronectin 表达降低( P < 0. 01)?结论 miR?206过表达通过靶向VEGFA 抑制人肝癌HepG2 细胞侵袭和迁移?

    • 一种快速获得Vav1 基因敲除稳定细胞系的方法

      2018, 28(8):101-107. DOI: 10.3969/j. issn. 1671 -7856. 2018. 08. 018

      摘要 (1990) HTML (0) PDF 6.76 M (1762) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 建立一种快速获得Vav1 基因敲除稳定细胞系的方法?方法 构建针对小鼠Vav1 基因的特异性打靶载体,利用脂质体转染法转染B16 小鼠黑色素瘤细胞,使用流式细胞仪对GFP 阳性单细胞进行分选,对得到的GFP 阳性单克隆细胞使用直接裂解法获取基因组DNA,将其用于荧光PCR,产物通过毛细管电泳和分析后即可快速获知其基因型?结果 使用以上方法在短时间内得到了大量GFP 阳性单克隆细胞,从中随机挑选16 个,通过荧光PCR 检测其基因型,结果表明敲除效率为87. 5%;通过测序对部分荧光PCR 结果进行验证,发现其基因型结果完全正确?结论 将CRISPR/ Cas9 基因编辑系统?流式细胞仪单克隆分选?荧光PCR 和大批量DNA 样本处理技术结合,可以短时间内在B16 小鼠黑色素瘤细胞中获得大量Vav1 基因敲除稳定单克隆细胞?

    • 改良新西兰兔颈总动脉置管固定方法

      2018, 28(8):108-111. DOI: 10.3969/j. issn. 1671 -7856. 2018. 08. 019

      摘要 (2846) HTML (0) PDF 6.43 M (3695) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 探讨一种稳定?不易脱落?可连续定时采血的新西兰兔颈总动脉置管固定方法?方法 动物麻醉后,解剖出左侧颈总动脉,使用BD 密闭式静脉留置针(Y 型)穿刺成功后,慕丝线结扎固定,再于留置针的前中后三点分别缝合胸骨乳突肌与胸骨舌骨肌固定,防止插管脱出?导管紧贴皮肤绕过颈部,缝合固定于颈背部皮肤?结果 对照组颈动脉导管堵塞率35%,改良组为5%;对照组颈动脉导管脱落率30%,实验组无脱落?两组颈总动脉导管堵塞?颈总动脉导管脱落率比较差异有显著性( P < 0. 05)?结论 三点缝合固定新西兰兔左侧颈总动脉BD 针,能限制BD 针的前后左右上下移动,稳定有效,留置时间长,可连续采血,为实验成功奠定基础?

    • ABSL⁃2 实验室相对湿度波动原因的分析与对策

      2018, 28(8):112-117. DOI: 10.3969/j. issn. 1671 -7856. 2018. 08. 020

      摘要 (1735) HTML (0) PDF 4.72 M (2011) 评论 (0) 收藏

      摘要:分析中国疾病预防控制中心实验动物中心ABSL?2 实验室相对湿度波动现象产生的原因,提出解决对策?阐述实验动物中心ABSL?2 实验室系统加湿?除湿?送风?自动控制?湿度传感器的工作原理,论述各实验区域送风?加湿蒸汽供应?除湿时间长短?湿度传感器误差等是影响相对湿度使其产生波动的基本因素,并逐一分析其影响程度,以确定科学有效的稳定相对湿度的方法?通过采取实时调节风阀?持续稳定的蒸汽供应?设置二级表冷器?定期保养更新湿度传感器?科学合理的管理等有效可行的对策,可以减少相对湿度波动现象的发生,提高生物安全动物实验室保障水平,并为今后实验动物中心空调系统的设计和管理提供可借鉴的经验?

    • 延长溶栓时间窗在缺血性脑卒中tPA 治疗的临床前研究进展

      2018, 28(8):118-123. DOI: 10.3969/j. issn. 1671 -7856. 2018. 08. 021

      摘要 (2027) HTML (0) PDF 835.12 K (1985) 评论 (0) 收藏

      摘要:脑卒中(stroke)是中老年人常见疾病,其具有高发病率?高死亡率和高致残率等特点,已严重威胁人类健康?目前为止,溶栓治疗是缺血性脑卒中最有效的治疗方法,组织型纤溶酶原激活剂(tissue type plasminogenactivator, tPA)是唯一被美国FDA 批准用于治疗脑卒中的溶栓药物?然而tPA 的时间窗只有4. 5 h,很少一部分人会在时间窗内接受溶栓治疗,并且当tPA 的治疗时间窗超过4. 5 h,会显著增加出血性转化(hemorrhagic transformation, HT)的发生率,从而导致脑卒中患者死亡率显著增加?在临床上通常使用联合用药的治疗策略来延长tPA 的治疗时间窗,从而减少溶栓带来的不利影响?HT 是急性缺血性卒中患者使用组织型纤溶酶原激活剂溶栓治疗后最严重的并发症,极大地限制了tPA 的临床应用?本文主要综述了在动物试验中与tPA 联合使用能扩大tPA 的治疗时间窗并且不增加出血性转化风险的药物,旨在为提高tPA 的整体疗效提供研究基础?

    • 长链非编码RNA MIAT 与肿瘤关系的研究进展

      2018, 28(8):124-128. DOI: 10.3969/j. issn. 1671 -7856. 2018. 08. 022

      摘要 (2329) HTML (0) PDF 819.33 K (1813) 评论 (0) 收藏

      摘要:长链非编码RNAs 是人类正常功能活动的调节因子,也是不同肿瘤发展过程的控制因子?研究表明,lncRNAs 的失调涉及细胞的不同行为,包括增殖,凋亡,迁移,侵袭和上皮间质转化等?作为明星分子的lncRNA之一,MIAT 的异常表达存在于不同的肿瘤中,包括肺癌?乳腺癌?胃癌?肝癌和前列腺癌等?MIAT 是一种新型肿瘤相关lncRNA,其临床应用的潜在价值巨大,有望成为新的肿瘤生物标志物和治疗靶点?本文总结了目前关于MIAT 在肿瘤发生发展过程中的生物功能和相关机制?

    • NLRP3 炎症小体在肝疾病中的作用

      2018, 28(8):129-134. DOI: 10.3969/j. issn. 1671 -7856. 2018. 08. 023

      摘要 (2011) HTML (0) PDF 854.11 K (2001) 评论 (0) 收藏

      摘要:NLRP3 炎症小体是一种多蛋白复合物,能识别来自损伤细胞和病原生物释放的信号分子,介导caspase?1 活化,从而剪切活化细胞因子IL?1β 和IL?18?IL?1β 是一种正反馈式促炎因子,可放大炎症反应?与其他炎症反应不同,NLRP3 炎症小体活化需要两种信号参与,因而具有较高的激活阈值?NLRP3 炎症小体活化与肝疾病发病机制有密切关系,在不同病因诱导的肝疾病及实验动物模型研究中已证明,NLRP3 炎症小体活化在肝细胞损伤?细胞活化以及促进肝纤维化中发挥重要作用?这些研究有助于转化应用到临床治疗实践中,为肝疾病的治疗提供理论依据和新的药物作用靶点?本文主要探讨了炎症小体的功能?活化机制及其不同肝损伤过程中的活化及生物学功能效应,并根据国内外最新相关研究报道,对NLRP3 炎症小体在酒精性肝病?非酒精性肝病?慢性HCV感染和肝纤维化中的作用进行综述?

    • Pig⁃a 基因突变试验研究进展

      2018, 28(8):135-140. DOI: 10.3969/j. issn. 1671 -7856. 2018. 08. 024

      摘要 (2288) HTML (0) PDF 853.92 K (3920) 评论 (0) 收藏

      摘要:建立灵敏可靠的遗传毒性试验方法是全面充分评价化学物质致突变性的必要保障?近年来,一种基于Pig?a 基因的新型基因突变试验成为研究热点,该方法具有灵敏度高,成本低,与其他遗传毒性试验整合潜力高,减少动物使用等优点,有望成为未来评估体内基因突变的新方法?本文就Pig?a 基因突变试验的研究与应用进展进行综述?

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