摘要:目的 建立小型猪髂总静脉狭窄模型?观察模拟药物涂层球囊(drug?coated balloon,DCB)对髂总静脉狭窄段的影响及安全性评估?方法 取20 头幼龄?健康?雄性小型猪实施静脉全身麻醉后,以过大球囊损伤小型猪髂总静脉建立动物模型?将建模成功的小型猪随机分为实验组和对照组?实验组以双球囊封堵灌注紫杉醇处理狭窄段静脉,对照组不进行此操作?术前及术后2 周抽取静脉血,术前及术后2 月静脉造影及观察狭窄段静脉病理切片?比较2 组小型猪肝肾功能指标?髂总静脉管腔内径及管壁组织学改变情况?结果 17 头小型猪存活至实验终点?实验组(n =9)与对照组(n =8)术后2 周谷丙转氨酶(ALT)?谷草转氨酶(AST)?肌酐(Cr)及血尿素氮(BUN)相比,差异无显著性( P > 0.05);实验组[(3.74 ±1.24) mm]与对照组[(2.25 ± 1.41) mm]术后2 月管腔内径对比,差别有显著性( P < 0.05);镜下,实验组与对照组处理段髂总静脉内膜?中膜均增厚,且对照组增厚更明显?结论 过大球囊扩张小型猪髂总静脉,制备小型猪髂总静脉狭窄模型可行;经导管局部灌注紫杉醇对小型猪肝肾功能影响不大;模拟DCB 可减轻小型猪髂总静脉狭窄程度?

摘要:目的 运用不同的技术方法,观察SIVmac239 感染CEMx174 细胞的全过程?方法 SIVmac239 病毒感染CEMx174 细胞后,分别在不同的时间点收集培养上清和细胞,应用实时荧光定量PCR 方法检测培养上清中的病毒载量;IFA 检测并用激光扫描共聚焦显微镜观察病毒定位及复制情况;胞内流式?Western blot 检测细胞内病毒蛋白p27 的表达量?结果 SIVmac239 吸附并感染CEMx174 后,第0.5 h 时,细胞胞膜上检测到病毒颗粒;第12 h 时,培养上清中的病毒RNA 水平出现下降;此后至第96 h,病毒持续复制,细胞胞浆内病毒蛋白p27 表达量逐渐增加,培养上清中病毒RNA 水平持续升高?结论 病毒感染细胞时,首先吸附在细胞膜上,然后进入细胞持续复制和表达?

摘要:目的 观察饲料中的乳糖添加量?束缚时间和造模持续时间对腹泻型肠易激综合征(IBS?D)大鼠模型的影响,筛选一种较为理想的IBS?D 大鼠模型的制备方法?方法 将大鼠随机分为正常对照组?模型A 组(30%乳糖+ 束缚1 h)?模型B 组(30%乳糖+ 束缚1.5 h)?模型C 组(45%乳糖+ 束缚0.5 h)?模型D 组(45%乳糖+ 束缚1 h),以造模第7?10?14 天腹壁回缩反射时的疼痛阈值评价其内脏敏感性,以腹泻指数评价其腹泻程度,同时以多道生理信号采集处理系统记录餐后1 h 空肠平滑肌运动波,分析计算运动波振幅和频率,评价其胃肠动力?结果 各组模型大鼠容量阈值在第7?10?14 天均较正常对照组明显降低;腹泻指数在第7?10?14 天均较正常对照组明显增加;其中模型D 组发生较显著的平滑肌运动节律异常?结论 在当饲料中乳糖比例在30%以上,束缚时间在1 h以上时,造模动物在7 ~ 14 d 发生典型IBS?D 的胃肠动力异常和内脏高敏感状态?

摘要:目的 研究藁本内酯(ligustilide,LIG)减轻氧化低密度脂蛋白(oxidative low density lipoprotein,ox?LDL)诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)损伤作用机制?方法 将细胞随机分为5 组,对照组(正常培养细胞不加干预)?模型组(100 μmol/ L ox?LDL 干预24 h)?LIG 低浓度组?LIG 中浓度组?LIG 高浓度组?其中,LIG 低?中?高浓度组细胞分别以10?20?40 μmol/ L 预先孵育2 h,再用100 μmol/ L ox?LDL 干预24 h?CCK8 法检测各组细胞活力,ELISA 检测细胞培养液中肿瘤坏死因子(TNF?α)?白细胞介素6(IL?6)?细胞间黏附分子1(ICAM?1)和血管细胞粘附分子?1(VCAM?1)的含量?qRT?PCR 检测细胞内TNF?α?IL?6?ICAM?1?VCAM?1?NF?κB 及miR?181b 的mRNA 水平;Western blotting 测定细胞NF?κB 的表达量?结果 与对照组相比,模型组细胞存活率明显下降,凋亡率增高,细胞上清中TNF?α?IL?6?ICAM?1 及VCAM?1 的浓度升高?LIG 能显著提高细胞存活率,抑制细胞凋亡,并且能降低细胞内炎性因子水平,尤其是中?高浓度组,与模型组相比差异有显著性( P < 0.01)?此外,LIG 能明显降低细胞内NF?κB 转录及翻译水平,上调miR?181b 的表达,与模型组相比差异有显著性( P < 0.01)?激活或抑制细胞内miR?181b 表达,能有效调节细胞内炎性因子水平?结论 藁本内酯明显减轻ox?LDL 诱导HUVEC 损伤,其机制可能是通过上调miR?181b 抑制NF?κB 表达,从而减轻ox?LDL 诱导的细胞炎症损伤?

摘要:目的 研究七氟醚对新生大鼠神经干细胞增殖影响?方法 取出生7 d 的SD 大鼠48 只,体重15~ 20 g,随机分3 组:对照组(Con 组)?1% 七氟醚组(S1 组)?3% 七氟醚组(S2 组)?S1 组和S2 组分别吸入1%?3% 七氟醚4 h?各组新生鼠麻醉开始前腹腔注射5?溴脱氧尿苷100 mg/ kg,于麻醉结束后6 h 处死大鼠并分离脑室区和脑室下区组织?采用免疫组化法进行Nestin 与BrdU 染色,计算检测脑室区和脑室下区神经干细胞增殖率; Western blot 法检测Nestin?Cyclin D1?BMP2?Smad4 蛋白的表达?结果 与对照组比较,S1 组和S2 组大鼠脑室区和脑室下区组织Nestin 蛋白表达降低?神经干细胞增殖率降低,Cyclin D1 表达下降,BMP2?Smad4 表达上调( P <0.05)?结论 七氟醚可抑制新生大鼠神经干细胞的增殖,其机制可能与Cyclin D1?BMP2?Smad4 蛋白表达变化有关?

摘要:目的 观察局部脑缺血再灌注损伤对小鼠TMEM166 基因和神经细胞自噬的影响?方法 C57/ BL6J 小鼠50 只,线栓法制作大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)局部脑缺血模型,随机分为再灌注6,12,24,48 h 组?通过免疫组化染色观察缺血侧大脑皮层及基底核TMEM166?LC3?II 的阳性细胞数量变化,Western blot 检测不同再灌注时间TMEM166?LC3?II 蛋白水平的表达?结果 缺血侧TMEM166 随再灌注时间延长而增加,24 h 达到高峰;再灌注6 h 后LC3?II 表达出现,同样随再灌注时间而增加,24 h 达到高峰?缺血侧自噬细胞数量的变化趋势与TMEM166 基本一致,对侧大脑半球上述指标无明显变化?结论 小鼠局部脑缺血再灌注损伤可以诱导TMEM166 的表达,通过激活LC3?II 引起神经细胞自噬?

摘要:目的 探讨妊娠小鼠子宫内胎鼠腹腔注射人肿瘤HepG2 细胞对胎鼠生长发育的影响?方法 将孕鼠随机分为5 组,细胞注射组在孕14 d 胎鼠腹腔注射不同浓度的HepG2 细胞悬液,并设假手术组及对照组,记录孕鼠生产情况?出生小鼠的体重,并对子代鼠的发育学指标进行评价,选取成年后小鼠解剖观察肝?肺?肾等主要脏器有无畸形?病变,并取材进行HE 染色,显微观察各组小鼠主要脏器的病理改变情况?结果 与对照组相比,子宫内胎鼠腹腔各细胞注射组子代鼠的体重和生长发育指标差异无显著性,肉眼观察各主要脏器无病变,显微观察未见异常结构?结论 子宫内胎鼠腹腔注射人肿瘤HepG2 细胞不会对胎鼠发育产生影响?

摘要:目的 应用急性早幼粒细胞HL60 及耐阿霉素(adriamycin,ADR)细胞HL60/ ADR,构建SCID beige小鼠白血病模型?方法 将15 只4 ~ 5 周龄的雌性SCID beige 小鼠,随机分为对照组3 只?四组模型12 只(每组3 只)?经2GyX 射线预处理,模型组分别经尾静脉接种对数生长期HL60 细胞悬液1 × 107 个/ 只(M1 组)?5 ×106 个/ 只(M2 组),HL60/ ADR 细胞悬液1 × 107 个/ 只(M3 组)?5 × 106 个/ 只(M4 组),对照组鼠尾静脉注射等剂量生理盐水?观察一般情况,于照射前?造模第10?18?28 天检测血常规?外周血白细胞分类?外周血CD33 阳性细胞比例,第32 天或濒死时处死取材,组织切片病理检查?结果 各模型组于接种细胞第7 天开始,出现竖毛?萎靡少动?脊背弓起?步态不稳?偏侧或转圈,M1?M3 两组较M2?M4 两组体重下降更明显( P < 0.05),显著低于对照组( P < 0.01)?至观察周期32 d,M1?M3 两组生存率分别为33%?67%,M2?M4 两组全部生存?各组小鼠经X 线照射7 d 内白细胞数迅速降低,随时间推移逐渐上升,第28 天各模型组白细胞计数均显著高于对照组( P < 0.01);且各模型组白血病细胞比例亦明显升高,以接种HL60/ ADR 的M3 组最为显著( P < 0.05);接种第28 天时各模型组CD33 阳性细胞比例显著高于对照组( P < 0.01),然各模型组间差异无显著性?第32 天或濒死前取材,病理组织切片,造模各组脾均可见弥漫性白血病细胞浸润,肝偶见白血病细胞浸润灶?结论 SCID beige 小鼠经2GyX 射线预处理后,每只尾静脉注射HL60?HL60/ ADR 细胞1 × 107 个或5 × 106 个均可构建急性髓系白血病动物模型,符合急性髓系白血病的生物学特点,高浓度成瘤更快,中位生存期约29 d?

摘要:目的 探讨钙?镁?铜?锌?维生素D 和蛋白联合干预燃煤型氟中毒对雌鼠卵巢功能变化?方法120只体重80 g 左右的清洁级SD 雌性大鼠为研究对象,随机分为对照组?染氟组?多种元素组?多种元素+ 蛋白组,每组30 只?各模型组大鼠自由食用不同配方的病区原煤加拌泥煤烘烤的玉米饲料?分别于染氟60,120,180 d 处死雌鼠,分离双侧卵巢?免疫组化法检测卵巢颗粒细胞凋亡蛋白Bcl?2 和Bax 的表达?HE 染色光镜下观察卵巢组织形态?各级卵泡数量变化?结果 卵巢颗粒细胞Bcl?2 蛋白表达量差异无显著性?各组与染氟组Bax 蛋白比较, 120 d 和180 d 差异有显著性( P < 0.05),180 d 两干预组比较差异有显著性( P < 0.05)?各组内比较,染氟组Bax蛋白表达量逐渐增多,差异有显著性( P < 0.05)?多种元素组60 d 与180 d 比较差异有显著性( P < 0.05)?染氟组随时间延长,卵巢颗粒细胞呈现渐进性水肿的变化,闭锁的卵泡和黄体退化逐渐增多?两干预组卵巢颗粒细胞少见轻度水肿,正常的各级卵泡多见,闭锁的卵泡和退化的黄体明显降低;与染氟组相比,60 d 对照组和多种元素+ 蛋白组闭锁卵泡降低,差异有显著性( P < 0.05);120 d 和180 d 对照组?两干预组差异有显著性( P < 0.05)?结论 钙?镁?铜?锌?维生素D 可拮抗燃煤型氟中毒对卵巢生殖毒性降低Bax 蛋白的表达量,降低闭锁卵泡数量,同时添加蛋白联合干预效果更佳?

摘要:目的 研究芦根多糖对高脂血症大鼠的调节作用?方法 将32 只SD 大鼠随机分为4 组:对照组?模型组?芦根多糖组和立普妥组(每组8 只),对照组给予普通饲料,其余三组给予高脂饲料,饲喂8 周后,芦根多糖组[200 mg/ (kg·d)]和立普妥组[2 mg/ (kg·d)]大鼠分别灌胃相应药物,对照组和模型组大鼠灌胃生理盐水,持续给药6 周后取血,分离血清以检测脂质四项水平,同时取肝和主动脉进行病理组织学检查?结果 与对照组相比,模型组血清中甘油三脂(triglyceride,TG)水平显著降低( P < 0.01),总胆固醇(total cholesterol,TC)?高密度脂蛋白胆固醇(high?density lipoprotein?cholesterol, HDL?C) 和低密度脂蛋白胆固醇( low?density lipoprotein?cholesterol, LDL?C)水平显著上升( P < 0.01);芦根多糖组和立普妥组的血清TC?HDL?C 和LDL?C 均较模型组显著降低( P <0.01)?模型组大鼠可见广泛的肝细胞脂肪变性和炎症细胞,芦根多糖组和立普妥组大鼠可见较局限的肝细胞脂肪变性,病变程度减轻?结论 芦根多糖能降低高脂血症大鼠的TC 和LDL?C 水平,减轻肝细胞脂肪变性,对高脂血症大鼠有较好的调节作用?

摘要:目的 通过观察慢性铝中毒小鼠学习记忆能力的变化以及大脑皮层乙酰胆碱(ACh)?β?内啡肽(β?EP)?超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量的变化,探讨铝中毒导致小鼠认知能力障碍的机制?方法 用AlCl3 水溶液拌入饲料中喂养小鼠,建立不同程度铝中毒模型小鼠?染毒三个月后,Y 型迷宫实验测试小鼠学习记忆能力,测定大脑皮层ACh?β?EP?SOD 和MDA 含量?结果 与对照组相比,中剂量?高剂量铝中毒组小鼠学习测试次数和记忆错误次数均明显增多,大脑皮层ACh?β?EP 和SOD 含量均明显降低,而大脑皮层MDA 含量却升高?中剂量?高剂量铝中毒组小鼠大脑皮层中ACh?β?EP 和SOD 均与相应同剂量组学习测试次数和记忆错误次数均呈负相关;高剂量铝中毒组MDA 含量与同剂量组学习测试次数和记忆错误次数均呈正相关?结论 铝可能通过降低大脑皮层中ACh?β?EP 和SOD 含量,提高MDA 含量,进而影响小鼠学习与记忆能力,这可能是铝中毒致小鼠认知能力障碍的机制之一?

摘要:目的 研究泽泻提取物(Alisma orientale extract,AOE)对非酒精性脂肪肝的治疗作用,并通过HepG2细胞模型系统性地研究其作用机制?方法 油酸和棕榈酸混合物诱导HepG2 细胞脂肪变性,Western blot 检测内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ER stress)标记蛋白GRP78?CHOP?XBP?1 等评价泽泻提取物对脂肪酸引起的HepG2 细胞内质网应激的抑制作用;高脂饲料喂养SD 大鼠制作非酒精性脂肪肝模型,不同浓度泽泻提取物灌胃后ELISA 法检测大鼠血清中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)?谷草转氨酶(aspartate aminotransferase, AST)?谷丙转氨酶( alanine aminotransferase, ALT)?甘油三酯( triglyceride, TG)?高密度脂蛋白( high?density lipoprotein,HDL)?低密度脂蛋白(low?density lipoprotein,LDL)等血清生化指标判断SD 大鼠模型的肝脂肪性病变程度?RT?PCR 法检测肝组织内细胞色素P450 2E1(CYP2E1)?细胞色素P450 2A5(CYP2A5)基因的表达情况,脂肪性肝炎大鼠肝脏内CYP2E1/ CYP2A5 呈诱导表达状态抗氧化能力,在加重脂质过氧化等过程参与了脂肪性肝炎的形成起作用?Western blot 检测HepG2 细胞中JNK1?p?JNK1?STAT3?GRP78?CHOP 和XBP?1 等蛋白表达水平的变化,探寻肝细胞脂肪性病变过程的作用通路?结果 泽泻提取物处理后,JNK1?p?JNK1?GRP78?CHOP 和XBP?1 表达水平明显下降,STAT3 表达增加,并且呈剂量依赖性;ELISA 结果显示,泽泻提取物处理后,大鼠血清中谷草转氨酶?谷丙转氨酶?甘油三酯?低密度脂蛋白的表达水平呈剂量依赖性下降,超氧化物歧化酶?高密度脂蛋白表达升高;同时RT?PCR 结果显示泽泻提取物处理后,肝组织内CYP2E1?CYP2A5 基因表达水平明显下降,尤其是高剂量组?结论 泽泻提取物可以通过抑制脂肪变性肝细胞的内质网应激反应,抑制JNK 信号通路及代谢酶表达从而在机体上达到治疗非酒精性脂肪肝的目的?

摘要:目的 观察结直肠癌组织中葡萄糖转运蛋白?1(GLUT?1)和缺氧诱导因子?1α(HIF?1α)的表达变化,并探讨其临床意义?方法 选取结直肠癌组织50 例(癌组)和50 例癌旁正常组织(癌旁正常组),采用免疫组化半定量检测两组结直肠组织的GLUT?1?HIF?1α 的表达量,分析GLUT?1?HIF?1α 表达量与结直肠癌临床病理参数的关系,并初步探讨其致癌机制?结果 癌组和癌旁正常组中GLUT?1 表达量分别为(2.285 ± 0.459)和(1.086±0.148),差异有显著性(t = 8.919, P < 0.001);癌组和癌旁正常组中HIF?1α 表达量分别为(2.203 ± 0.401)和 (1.055 ±0.127),差异有显著性(t = 7.144, P < 0.05);GLUT?1 和HIF?1α 在结直肠癌中的表达量呈正相关(r =0.958, P < 0.001);GLUT?1?HIF?1α 的表达量均与结直肠癌TNM 分期?浆膜浸润?分化程度?淋巴转移?肝转移及脉管浸润有关( P < 0.05)?结论 在结直肠癌组织中,GLUT?1 和HIF?1α 表达量均增高,提示二者可作为评估结直肠癌发生?发展?转移及预后参考指标?

摘要:目的 分离培养鉴定树鼩多巴胺神经元,为进一步建立多巴胺神经元功能异常疾病研究的细胞模型打下基础?方法 应用神经元专用培养基添加B27 和Glutamax 的培养液对新生树鼩多巴胺神经元进行体外培养?采用免疫荧光法对培养细胞进行鉴定?结果 成功培养出树鼩原代多巴胺神经元,免疫荧光法检测酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)免疫阳性神经元达到(88.49 ± 2.4)%?结论 使用本方法可以培养出高纯度的树鼩多巴胺神经元?

摘要:目的 为成功构建猕猴脊髓损伤模型及其它猕猴长时程手术操作提供一种简单易行的麻醉方案?方法 选取雄性成年猕猴10 只,采用丙泊酚静脉诱导?异氟醚吸入维持的复合麻醉方式进行麻醉,记录麻醉诱导时间?麻醉维持时间以及麻醉苏醒时间?持续监测血氧饱和度(SpO ₂ )?呼吸频率(RR)?心率(HR),并通过对其分析评价麻醉方案的可行性及有效性?结果 10 只猕猴均按实验计划完成实验,麻醉诱导时间短?起效快,麻醉期间生命体征平稳,镇静?镇痛及肌松满意,术后苏醒迅速?完全,未发生麻醉并发症?结论 丙泊酚与异氟醚复合麻醉方式是一种安全有效的猕猴长时程麻醉方案?

摘要:酸性调宁蛋白是一种肌动蛋白结合蛋白,它在平滑肌细胞和非肌细胞中均有表达,并且参与树突棘重塑?细胞骨架重组?平滑肌细胞收缩调控?骨骼肌发育调节?胎盘形成与胚胎发育?细胞的信号传导等?酸性调宁蛋白表达的改变与耐药性癫痫?大肠癌?黏膜相关淋巴组织淋巴瘤?卵巢癌的发生进展相关,研究该蛋白表达量的改变有利于这些疾病的诊断及预后的判断?

摘要:视网膜双极细胞是哺乳动物视觉系统信号通路的中间神经元,它接受光觉感受器(视锥细胞,视杆细胞)的信号输入,在整合信息后传递至无长突细胞和神经节细胞?近年来研究显示,通过免疫组化技术,以及生物物理学?药理学?膜电容测定?荧光生物传感器和双光子显微镜等技术,可以更为全面的了解视觉传导过程中涉及的神经元整个类别?在此,本文主要综述通过免疫组化等方法比较不同哺乳动物视网膜双极细胞独特生理结构和功能的特性及其突触重塑方面相关研究进展?

摘要:功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)是一种临床常见的胃肠道功能性疾病?FD 大鼠模型的建立,有助于人们进一步研究该疾病?初期模型以单因素诱导为主,但随着对FD 病因研究不断深入,其局限性也日益凸显?而复合因素因具有多方面模拟致病因素的优势,在造模领域的应用逐渐广泛?

摘要:普通绵耳狨猴是体型较小的非人灵长类实验动物,具有饲养成本低,繁殖效率高,性成熟时间短等优势,非常适合开展辅助生殖技术及基因修饰模型研究?狨猴的人工辅助生殖技术(assisted reproduction technology,ART)主要包括:精液采集?超数排卵?卵母细胞采集?体外成熟?体外授精?胚胎培养和移植等?目前各项技术的研究较全面,但仍有细节亟需完善?随着基因编辑技术的兴起,基于人工辅助生殖技术的狨猴基因修饰研究逐渐成为热点?2009 年日本首次成功开展转基因狨猴研究,截至目前,中国尚无基因修饰狨猴相关报道?本文就近年来狨猴人工辅助生殖技术,以及狨猴基因修饰研究进展进行综述?

摘要:骨关节炎是影响人类健康的重要退行性疾病之一,造成了大量的身体残疾和医疗资源支出,但是该病的具体发病机制尚未阐明,从而无法治愈该病?编码固醇调节元件结合蛋白(sterol regulatory element binding proteins,SREBPs)的基因是近年来研究较多的基因,在维持机体脂质代谢稳态中起到重要的作用,越来越多的研究证实,该基因与骨关节炎关系密切?该文将会从SREBPs 基因介绍?SREBPs 基因与骨关节炎的关系及其通过相关因子作用造成机体代谢障碍及骨关节炎的可能机制方面进行相关探讨,就SREBPs 基因在骨关节炎中的作用作一综述,从而为相关研究提供便利?

摘要:“星空现象”是巨噬细胞吞噬细胞残存和核碎片后而产生的一种病理组织学现象,也是机体淋巴组织和淋巴瘤中一个独特的组织学特征?本文对“星空现象”的发展史?发生机制?病理生理和临床特征做一总结和综述?希望对建立淋巴肿瘤动物模型以及放疗药物对患肿瘤动物在临床肿的研究?药物治疗剂量的选择有一定帮助和参考意义?

摘要:巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)免疫潜伏再激活可以诱导T 细胞进而发生免疫衰老已成为衰老的公认机制之一?在免疫活性宿主体内,CMV 一旦感染可在骨髓中静默潜伏,通过分化依赖性活化刺激进入循环传播,保持终生持续感染的能力?本文针对人类和非人灵长类CMV 感染后免疫状况?免疫逃避机制以及与免疫衰老相关性等方面进行比较和综述,以期为今后免疫衰老模型构筑?疫苗研制和药物开发提供基础?