摘要:作为一种模式生物，斑马鱼具有其他动物模型所不具备的诸多优势，非常适用于进行人类疾病建模及机制研究。斑马鱼胰腺经历两次发育分化过程，其间伴有多种信号途径的活化参与。成鱼的胰腺结构与其他动物胰腺相似，能分泌包括胰岛素在内的多种激素。斑马鱼胰腺及对胰岛素敏感的肝脏、肌肉等这些与代谢调控相关的主要器官及外周组织，在进化上具有保守性，糖代谢调控机制也与其他哺乳动物相似，这使得斑马鱼非常适用于糖代谢调控研究。除利用STZ诱导胰岛β细胞凋亡造成斑马鱼糖尿病模型外，高糖溶液交替暴露及外源性干预代谢相关信号途径也可以造成斑马鱼血糖升高。成鱼血糖水平、幼鱼组织糖含量、视网膜及视网膜血管形态变化是目前斑马鱼糖尿病模型研究中的常用检测指标。

摘要:目的 比较目前常用的基因自发突变2型糖尿病小鼠C57BL/6J-db/db和STZ诱导的C57BL/6J小鼠的溃疡创面愈合特征，为应用稳定的糖尿病小鼠溃疡模型进行相关动物实验研究提供依据。方法 建立糖尿病小鼠溃疡模型，统计0、3、5、7、10、14 d小鼠创面动态愈合率及愈合时间；7、14 d取组织，HE染色和Masson染色，免疫组化（CD31和PCNA）观察创面病理组织变化；荧光定量测定愈合相关因子collagen-Ⅲα、α-SMA的基因表达。结果 基因突变db/db小鼠较STZ诱导小鼠的创面愈合时间显著延迟，由（16.6±0.8）d延长至（20.2±1.3）d（P<0.001）；db/db组较STZ组肉芽组织生长缓慢，新生上皮长度不足、胶原沉积紊乱，创面愈合较差；7 d，db/db组的CD31和PCNA显著性低表达（P<0.01）；7、14 d，db/db组基因上调量的倍数明显低于STZ组。结论 两种糖尿病小鼠创面均出现愈合延迟，但基因突变糖尿病db/db小鼠相比于STZ诱导组小鼠在创面愈合延迟的程度上和愈合难易程度上，更适合进行糖尿病溃疡创面的研究。

摘要:目的 观察db/db小鼠的生物学特性，为该品系动物的实验研究应用提供基础。方法 采用自发性2型糖尿病BKS.Cg-Dock7^m+/+Lepr^db/JNju小鼠和野生型小鼠，于8、12、16、20和24周龄时测定空腹血糖值，10、12、16、20和24周龄时测定体质量，并于24周龄时测定血清胰岛素、总胆固醇和甘油三酯水平，检测脏器质量和肝脏系数，并进行组织病理学观察。结果 db/db小鼠的空腹血糖值和体质量始终维持着较高的水平；血清胰岛素、总胆固醇和甘油三酯水平，以及肝脏和肾脏质量均明显高于野生型小鼠；24周龄db/db小鼠的胰腺和肝脏组织可见明显病理改变。结论 db/db小鼠具有明显的高血糖、高血脂、高胰岛素血症等2型糖尿病特征，是进行2型糖尿病实验研究的理想的动物模型。

摘要:目的 建立与分析2型糖尿病（T2DM）维吾尔医异常黒胆质证大鼠模型血浆代谢组学变化特点。方法 建立T2DM维吾尔医异常黑胆质证大鼠模型并采集血浆样本，测试核磁共振氢谱，对数据进行多变量分析。结果 单纯的异常黑胆质证组大鼠血浆中葡萄糖和乳酸含量下降的同时VLDL、LDL和肉碱的含量明显增加（P<0.05）；病证结合的T2DM维吾尔医异常黑胆质证组大鼠血浆中多种氨基酸（丙氨酸、异亮氨酸、、缬氨酸、亮氨酸、酪氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、甲基组氨酸、甘氨酸）以及乳酸、丙酮酸、糖蛋白、柠檬酸、肌酸酐、β-羟丁酸、乙酰乙酸、乙酸、肌酸、肉碱、鲨肌醇、VLDL、LDL的含量均降低，而葡萄糖和牛磺酸含量明显增加（P<0.05）。结论 蛋白质代谢、苯丙氨酸和酪氨酸代谢通路、糖酵解通路和脂代谢通路在病证结合的T2DM维吾尔医异常黑胆质证模型大鼠体内发生了明显的变化；血浆代谢组学变化在一定程度上反映病证结合的T2DM维吾尔医异常黑胆质证大鼠模型体内发生的病理变化过程。

摘要:目的 探讨有氧运动对2型糖尿病大鼠胰岛及β细胞的影响及其机制。方法 Wistar大鼠30只，随机选取10只为C组，其余20只用链脲佐菌素（streptozotocin，STZ）配合高脂高糖饲料喂养建造2型糖尿病大鼠模型，留其成功的15只再分两组，一组为DMC组（n=7）；另组为DME组（n=7，实验结束时死亡1只）。DME组大鼠以每天20 m/min强度跑台运动30 min，每6 d休息1 d，共持续8周，其余大鼠笼内自由活动。实验结束时，腹主动脉取血测血糖、血清Ins含量，并推算HOMA；切取胰腺前三分之一行石蜡切片、HE染色，在数码显微镜下观察胰岛形态及β细胞结构并拍照；在100倍视野下，运用Motic Images Advanced 3.1图像处理软件测量胰岛周长和面积，并由此计算出SF；将剩余胰腺匀浆后测其Ins含量、GK及微量总ATP酶活性。结果 DME组大鼠胰岛周长和面积均较DMC组大鼠显著增加（P<0.05），但仍低于C组大鼠，SF显著增高；β细胞肥大及空泡、胞核固缩等现象较DMC组大鼠显著改善；DME组大鼠血糖、Ins含量、胰腺GK及微量总ATP酶活性均显著高于DMC组大鼠（P<0.05）；SF及HOMA也有显著变化。结论 有氧运动可降低2型糖尿病大鼠的血糖浓度、改善胰岛以及胰岛β细胞形态结构，归因于胰腺组织GK、ATP合成酶活性及胰岛素敏感性的提高。

摘要:目的 探讨参芍口服液在糖尿病心肌病（diabetic cardiomyopathy，DCM）大鼠结构功能损伤中的作用及其可能机制。方法 一次性腹腔注射大剂量链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型。测定血浆心肌酶（CK、LDH）、超敏C反应蛋白（hsCRP）的变化，左心室插管测定大鼠心功能，苏木素-伊红染色、透射电镜观察大鼠心肌病理改变，免疫组织化学法检测Toll样受体4（TLR4）、髓样分化蛋白（MyD88）及核因子κB P65（NF-κB P65）表达。结果 治疗6周后，DCM大鼠左心室舒张和收缩功能明显改善；心肌纤维及线粒体肿胀、断裂、坏死减少，结构紧密，排列整齐；CK、LDH、hsCRP含量降低（P<0.05），且hsCPR与CK、LDH呈正相关（r=0.753，r=0.819，P<0.05）；TLR4、MyD88、NF-κB P65表达明显下调（P<0.05）。而参芍口服液干预的正常大鼠上述指标无明显改变（P>0.05）。结论 参芍口服液可减轻糖尿病心肌病大鼠心肌损伤，改善心脏舒张和收缩功能，其机制可能与抑制TLR4/MyD88信号通路诱导的炎症反应有关。

摘要:目的 建立类风湿关节炎复合高血压疾病（arthritis-hypertension disease，AHD）大鼠模型，并对该模型的特点进行评价。方法 实施外科手术用0.25 mm银夹缩窄大鼠左肾动脉建立高血压（hypertension，HT）模型，同时于大鼠左后足跖注射0.1 mL完全弗氏佐剂致炎建立AHD模型。无创血压测量分析系统测量尾动脉压。足爪容积测量仪测量大鼠非致炎侧关节肿胀度，并分析关节炎指数与炎症发生率。第35天处死大鼠，收集胸主动脉、踝关节及脾脏组织HE染色并进行病理学检查。结果 AHD模型大鼠关节明显肿胀，关节腔大量滑膜细胞增生、炎症细胞浸润、血管翳形成，脾脏生发中心数量增加、大量淋巴细胞浸润、白髓弥漫性增生、红髓浸润。关节炎指数、炎症发生率以及关节、脾脏组织病理评分较佐剂性关节炎（adjuvant arthritis，AA）大鼠明显升高；同时，AHD模型大鼠血压显著升高，胸主动脉中膜厚度、横截面积明显增加，管腔直径明显降低，且其血压值和血管损伤程度较HT大鼠明显升高或加重。结论 用完全弗氏佐剂足跖皮内注射法合并外科手术缩窄左肾动脉法可成功建立大鼠AHD模型。

摘要:目的 利用PKH26和Hoechst 33258联合示踪Uncv无毛小鼠iRhom2及其突变体蛋白在Vero细胞中的定位。方法 用PKH26对细胞膜进行染色，同时用Hoechst 33258染料对细胞核进行染色，置于激光共聚焦显微镜下观察。结果 通过激光共聚焦荧光显微镜观察目的蛋白，发现野生型iRhom2分布在细胞的胞浆，而iRhom2^mut于细胞浆内和细胞核内都存在。结论 亚细胞定位的不同推测到iRhom2的N末端缺失突变可能对其细胞内的定位有影响。

摘要:目的 利用微卫星位点对国内24种近交系小鼠进行遗传状况分析。方法 用前期筛选的富含多态性和等位基因数多的30个小鼠微卫星位点，合成荧光标记引物，对近交系小鼠基因组DNA进行PCR的扩增，经STR扫描对各近交系小鼠品系进行基因分型。结果 在24个近交系小鼠品系中，有16个品系在品系内在30个位点上均具有相同基因型。而在不同品系间同一位点具有多态性，可初步对不同品系进行鉴别区分。其余品系内个别动物存在多态性。结论 所选位点可以参考用于近交系小鼠遗传质量检测分析，并进行初步品系检测鉴定。

摘要:目的 为腹壁撤退反射实验优选出恰当的制备气囊的材料。方法 分别通过数显游标卡尺及X光图像对不同气囊在不同压力值下的直径进行测量；并采用3分疼痛阈值作为判断标准，测试不同气囊对大鼠造成明显内脏疼痛时所对应的压力值。结果 圆形乳胶气球的直径随压力值增加变化均匀和缓，并且可以满足实验中常用的压力范围（20~80 mmHg），其对大鼠造成内脏疼痛的阈值在伤害性刺激值附近，不会对大鼠肠道造成不可逆的损伤。结论 腹壁撤退反射实验中使用圆形乳胶气球制备气囊较为理想。

摘要:目的 探讨构建尿酸排泄不良型高尿酸血症大鼠模型的可靠方法，为尿酸排泄不良型高尿酸血症发病机制的研究及治疗方案的优化奠定基础。方法 采用氧嗪酸钾（300 mg/kg）分别与吡嗪酰胺（300 mg/kg）、乙胺丁醇（250 mg/kg）联合造模。连续给药1周、3周、5周，检测大鼠血、尿、便中尿酸水平，同时检测肝、肾功能，并进行组织学病理切片观察。结果 氧嗪酸钾与乙胺丁醇联合造模组大鼠血尿酸出现先升高后降低的现象，而氧嗪酸钾与吡嗪酰胺联合造模组在连续给药期间血尿酸和尿液中尿酸升高平稳。两种方法对肝脏、肾脏均无明显损害。结论 氧嗪酸钾与吡嗪酰胺联合能有效建立尿酸排泄不良型高尿酸血症大鼠模型，且模型稳定性好，其发病过程更符合临床尿酸排泄不良型高尿酸血症的病程。

摘要:目的 建立肝癌人源肿瘤异种移植（patient-derived xenografts，PDX）模型，探讨其在肝癌精准医疗中的作用。方法 取临床肝癌新鲜手术切除标本，NCG小鼠皮下接种肿瘤组织建立PDX模型，HE染色比较移植肿瘤组织与患者肿瘤组织形态结构的一致性。将成功传至第三代的PDX模型制备肿瘤细胞悬液，BALB/c裸鼠皮下接种制作肝癌移植瘤模型15只，成瘤后随机分为5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil，5-FU）组、索拉非尼（sorafenib）组和阴性对照组，每组5只。定期监测各组荷瘤小鼠肿瘤体积和重量，根据瘤重计算抑瘤率，评估疗效。结果 本研究共建成肝癌PDX模型6例，成功率为33.3%（6/18），模型较好的保持了原发肿瘤的特征。1例PDX模型中，5-FU与索拉非尼组肿瘤抑瘤率分别为63.7%和29.6%，5-FU组抑瘤率比较差异有显著性（P<0.05），索拉非尼组抑瘤率比较差异无统计学意义，与临床结果相符。结论 肝癌PDX模型保持了患者肿瘤组织的组织形态，可以适用于肝癌患者的精准医疗。

摘要:目的 探讨小鼠体外受精（IVF）冻融后用于Cas9注射的可行性。方法 新鲜C57BL/6J小鼠卵子IVF后采用冻存管法（EFS20/40）冷冻原核胚（单细胞胚）和2细胞胚胎，次日复苏后培养。比较冻融原核胚和2细胞胚胎的回收率及成活率。选取部分冻融原核胚与新鲜原核胚同时进行Cas9和稀释液胞质注射并培养至2细胞，分别比较注射后的存活率及2细胞发育率。结果 冻融后的B6小鼠原核胚的回收率为92.5%、成活率为92.8%，2细胞胚的回收率为90.5%、成活率95.8%，两组数据差异无显著性（P>0.05）。新鲜原核胚Cas9注射后的存活率为92.7%，空白组注射组为97.5%，冻融原核胚Cas9注射后的存活率为82.6%，空白组为92%，冻融组Cas9注射与各组差异有显著性（P<0.05），其它各组差异无显著性（P>0.05）。注射后的2细胞胚发育率差异无显著性（P>0.05）。结论 冻融原核胚可用于Cas9显微注射。

摘要:目的 改进实验大鼠经口气管插管定位技术，提高气管插管效率，减少并发症。方法 采用临床套管针和静脉留置针组合，设计自制的气管插管定位防逆流装置。60只成年雄性SD大鼠随机分成A、B两组，A组40只，用于定位效果测试，B组20只用于防逆流测试。A组进一步分为A1组采用自行设计的定位装置，A2组采用雾气法，A3组采取棉纤维法进行定位判断。B组分为B1、B2两个亚组，均采取气泡逸出作为定位观察手段，不同的是B1使用圆台状防逆流装置，B2组不使用。采用透光法经口气管插管，观察并记录定位时间、呼气相定位效果、吸气相逆流水柱长度。A1组进一步行气管切开术在直视下明确定位状况。结果 在呼气周期内，观察出泡口连续逸出3个以上的气泡，可以确定插管在位良好并通畅。定位时间：A1组需要（1.75±1.02）个呼吸周期，A2组需要（3.30±0.95）个呼吸周期，A3组需要（4.10±0.99）个呼吸周期。A2组与A3组两组间比较差异无显著性（P>0.05），A1组明确定位需要的时间明显少于A2、A3组，差异有显著性（P<0.01）。B1组最长逆流水柱长度为（3.23±0.53）cm，B2组最长逆流水柱长度为（8.48±1.01）cm。结论 自制实验大鼠经口气管插管的定位评估防逆流装置结构简单，使用方便，能有效提高气管插管的定位效率，有较好的实验应用价值。

摘要:目的 建立一种高纯度的肺泡巨噬细胞分离培养方法，为研究巨噬细胞生物学特性，开展细胞内寄生菌存活机理研究提供材料。方法 在无菌环境下以PBS多次灌洗山羊肺脏，收集细胞后，用外周血单核细胞分离液结合密度梯度离心法从混合细胞中分离出羊肺泡巨噬细胞；培养于含10％胎牛血清的细胞培养基中，倒置显微镜下观察细胞形态，并利用其对鸡红细胞的吞噬功能检测细胞活性；采用流式细胞术检测单核巨噬细胞表面特征性标志CD14。结果 获得的贴壁细胞具典型的巨噬细胞形态学特征，有伪足和突起伸出，呈现圆形及不规则形状，胞浆丰富，胞体较大；培养的巨噬细胞54.5%吞噬了鸡红细胞，具有较强的吞噬活性；在体外连续培养近一个月，仍有93.7%的细胞能特异性表达CD14抗原，具有巨噬细胞特异性免疫表型。结论 本研究获得的山羊肺泡巨噬细胞纯度高、生物活性好，为开展细胞内寄生菌的疾病机理研究提供了细胞模型。

摘要:目的 建立快速检测多杀巴氏杆菌、支气管鲍特杆菌、支原体和肺炎克雷伯杆菌4种实验动物病原体的多重PCR方法。方法 根据GenBank基因设计出特异性引物；经过多重PCR的优化，特异性和敏感性的检测，建立多重PCR体系。应用该PCR体系检测人工感染样本和实验动物的气管分泌物，并与传统方法做对比。结果 多重PCR扩增出多杀巴氏杆菌（356 bp）、支气管鲍特杆菌（237 bp）、支原体（266 bp）和肺炎克雷伯杆菌（142 bp）的目的条带。肺炎克雷伯杆菌敏感性为10 pg，多杀巴氏杆菌、支气管鲍特杆菌、支原体敏感性为1 pg，特异性检测未从其他病原菌中检测出目的条带。应用建立的多重PCR体系检测人工感染样本的不同组合，45只实验动物气管检测出15只多杀巴氏杆菌阳性，9只肺支原体阳性，但传统培养方法和血清学方法未检测出阳性标本。结论 本文建立的多重PCR方法操作简单、快速、特异性强、灵敏度高，能够实现对多杀巴氏杆菌、支气管鲍特杆菌、支原体和肺炎克雷伯杆菌4种实验动物病原体的快速检测。

摘要:低氧/缺血是临床上常见的基本病理过程和基本死因，同时也是高原、航天、潜水等极端环境所面临的基本问题。作为细胞内源性保护分子，hamartin能够提高细胞在急性低氧/缺血时的耐受性，具有重要的研究意义。Hamartin在低氧/缺血中的作用已成为研究热点，阐明其在低氧/缺血中的保护作用及其DNA甲基化对低氧/缺血的影响，不仅有利于减轻低氧/缺血的损伤，还可以进一步探讨hamartin及其DNA甲基化在其他病理生理中的作用，为后续的临床研究提供理论指导。本文对hamartin的结构、信号传导机制以及在低氧/缺血中的研究进行综述。

摘要:腹壁撤退反射（abdominal withdrawal reflex，AWR）实验，通过扩张肠道来评价动物的行为学反应，是目前应用最广的评价动物内脏敏感性的方法。然而，AWR实验操作涉及因素多，目前鲜有较为公认的操作规程。本文通过对涉及AWR实验测量方法的文献进行梳理，归纳出AWR操作的基本步骤，总结不同测量方法在扩张方式、气囊种类等相关因素方面的差异，并对相关因素的具体操作提出建议，以期为后续使用该方法评价动物内脏敏感性的研究者提供选择方法，为实验操作的标准化方案制定奠定必要基础。

摘要:目的 进一步加强实验动物从业人员管理，提高实验动物从业人员专业技术和实际操作能力。方法 依托高校实验动物专业机构及其高素质的师资队伍，打造优质的省级实验动物从业人员培训基地。结果 基地以实验动物的相关法规为依据，根据培训对象的不同编写深浅适度的教学大纲、培训教材和考试题库，举办不同类型的培训班，从而建立完整的具有较高公信力的实验动物从业人员培训考核体系。培训注重实验教学，突出动手能力和操作技能的提高。结论 基地化培训以及由此建立的培训考核体系，极大规范了实验动物从业人员培训活动，并由此提供了有益的尝试。

摘要:目的 比较近五年江苏省和浙江省实验动物许可证发放情况，研究两省实验动物许可证管理现状及行业发展水平差异。方法 采取现况调查、文献调查、信息研究、比较研究相结合的方法，从每年发放情况、环境设施级别、机构类型划分、机构区域分布等多方面研究五年内两省实验动物许可证的发放情况之异同。结果 五年内，江苏省实验动物许可证发放数、批准机构数均明显超过浙江省；江苏省屏障环境设施比例略高于浙江省；两省内实验动物机构覆盖辖区内绝大部分城市，但相对集中在省会及经济发达地区；两省内均为企业类型机构占比最高；两省实验动物种类大致相同，浙江省监管种类更为丰富。结论 江苏省实验动物产业结构较浙江省更为完善，产业化社会化程度更高，但需进一步扩大实验动物监管种类。另外，主管部门还需进一步优化推进实验动物许可证管理制度。