摘要:1994年我国第一个国家标准《实验动物微生物学和寄生虫学监测等级》颁布实施以来已经跨越20年,使得微生物监测工作有了依据,在促进我国实验动物质量提高,满足科学研究需要等方面起到了无可替代的作用。国标本身在伴随着实验动物整体发展而不断发展、提高的过程中,也发现了一些问题,诸如定位问题、等级问题、检测频率问题等等。本文就以上问题,进行了分析,并提出一些观点和建议,供大家思考,以便集思广益,为配合国家十三五和中长远科技发展计划,修订更科学、更严谨、更适用的微生物标准做好前期工作。

摘要:大群饲养的实验用猴,B病毒抗体阳性率高达60%~70%。现行《实验动物国家标准》规定,B病毒为普通级实验猴必检项目,并且要求"被测猴血清中的BV抗体"为阴性。作为国家标准,如果脱离了该国行业的实情,那就要权衡修订。实验动物饲料硬度/松脆度没能作为一个指标被列入《国标》,而这个指标可以大大影响了实验动物饲料的摄入和受试动物的生理状况。建议将该指标吸纳进《国标》,进行通盘考量。

摘要:随着实验用动物这一概念的提出,相应的法律法规亟需制定,而目前我国专门针对"实验用动物"这一概念的卫生相关法律法规尚未被明确提出,使得实验用动物的使用与管理存在安全隐患。本文将《中华人民共和国动物防疫法》及《实验动物管理条例》与国际《陆生动物卫生法典》在内容上进行了比较,对我国实验用动物卫生相关工作提出建议。

摘要:"无特定病原菌(SPF)"名词意味着排除了对宿主致病的特定的病原菌清单。许多机构在使用活体动物开展生物医学研究时,考虑到许多不同的因素,包括动物来源、设施布局、微生物学背景、工程技术标准、运行实践和试验需要,倾向于制定机构层面的生物排除清单。同样地,机构层面的健康监测方案的设计和实施也根据需要有所不同。相比之下,中国的实验动物生产者和使用者受制于国标,国标中根据动物健康分类建立了国家层面生物排除清单,同时也规定了特定的动物健康等级对应的详细的动物房工程设计标准。此外,本文还汇总了北美主要的啮齿类供应商的SPF清单,来提示实验动物使用者在评估自己的实验大小鼠的生物排除清单和制定机构层面的健康监测方案时应该考虑不同的因素,来确保动物种群的健康和科学的完整性。

摘要:中国实验动物行业经过30多年的发展逐步形成一个独立的、完整的、封闭的生产、使用和管理体系,科学准确的实验动物概念不仅对实验动物行业本身,对动物生产和使用、保护、福利和伦理,对生命科学及相关行业和产业,科学普及和教育等事业都有着十分重要的意义和作用。通过我国实验动物的概念同美国的相比较,发现我国实验动物的概念存在定义不到位,范围不清晰,界限模糊等问题,造成生产、使用和管理中的一系列困惑和难题,影响和限制了实验动物行业的发展,也给相关行业带来了严重的后果和影响。因而适时修改实验动物概念的定义是必要的,有着积极的、现实的、客观的作用和影响。

摘要:化学消毒剂常用于病毒的灭活和实验室环境的消毒,其对病毒灭活的效果及评价直接影响实验室的生物安全。鉴于目前我国尚缺乏对化学消毒剂杀病毒效果的评价标准,本文在对欧盟现行的化学消毒剂杀病毒定量悬浮试验标准的研究分析的基础上,结合我国生物安全实验室的管理现状,提出了欧盟现行标准转化的方案。建议以包括高致病性病毒的替代病毒在内的6种病毒作为试验用的模式病毒,同时增加残留化学消毒剂的去除方法和试验结果95%置信区间计算方法内容。该建议提高了标准的科学性和可操作性,并为我国实验室消毒灭菌标准制定提供了参考。

摘要:本文对我国现行实验动物微生物国家标准中小鼠和大鼠涉及的微生物进行了回顾性分析,考量病原微生物的感染谱,病原对实验动物自身的危害,病原对科学研究的影响水平以及国内外病原微生物的流行情况,以期为我国实验动物国家标准的修订提供一些参考。

摘要:本文在分析国外实验动物细菌质量监测标准的基础上,对我国国家标准中实验大、小鼠细菌检测项目的修改提出了建议。

摘要:通过多年的检测实践,笔者建议:① 我国国家标准参照国外实验动物质量标准设置我国特有的"核心检测项目"及"备选检测项目"质量标准。即:将现行国家标准检测内容设置为"核心检测项目","核心检测项目"中保留原有的"必检项目"(即"●")及"必要时检测项目"(即"○");将国家标准中未涉及的病毒检测内容设置为"备选检测项"。②目前"核心检测项目"中大鼠HV及小鼠Ect由"必检项目"调整为"必要时检测项目";大鼠增加对LCMV的检测要求,设置为"必要时检测项目";取消"核心检测项目"中对TMEV病毒的检测要求,将该病毒调整为"备选检测项目"清单中。

摘要:

摘要:目的 用二甲基苯并蒽(DMBA)/巴豆油二阶法联合NB-UVB 照射,构建皮肤鳞状细胞癌小鼠模型。方法 将50只BALB/c小鼠,随机分为3组:A组外涂DMBA/巴豆油;B组照射NB-UVB;C组外涂DMBA/巴豆油,联合NB-UVB照射。实验过程中定期观察小鼠的一般情况和实验部位皮肤的变化,于第5、10、15、20周统计各组小鼠的存活率及成瘤率。第20周时取小鼠皮损组织进行病理检查。结果 第5周末,部分C组小鼠出现直径≥1 mm的丘疹,第20周后,三组成瘤率分别为86.67%,7.14%,94.12%;SCC发生率分别为:13.34%,0%,70.59%。结论 DMBA/巴豆油二阶法联合NB-UVB构建小鼠皮肤鳞癌模型较单独应用DMBA/巴豆油二阶法或NB-UVB照射成瘤时间短,成瘤率和SCC发生率高。

摘要:目的 建立可调控大鼠局部脑区CNN3基因表达的技术,为进一步研究CNN3基因参与脑内病理生理过程奠定基础。方法 设计并合成针对CNN3基因的全长编码序列cDNA和3条shRNA干扰靶点序列,利用基因工程技术构建CNN3-OE和3个CNN3-shRNA慢病毒载体,在立体定位仪引导下注入大鼠海马,采用蛋白免疫印迹技术筛选CNN3基因的最佳沉默序列,并找出重组表达和沉默慢病毒载体调控海马CNN3基因的变化规律。结果 CNN3-OE和 3个CNN3-shRNA慢病毒干扰载体均构建成功,转染后8周内对海马CNN3基因水平均有一定调控作用,其中CNN3-shRNA2载体组在转染后的8周内海马CNN3基因编码蛋白calponin-3水平均显著性下调,最高抑制率为73.26%;CNN3-OE慢病毒载体组中海马calponin-3蛋白水平具有统计学意义的升高仅在转染后第14天,上调率为93.88%。结论 通过定位注射CNN3-OE和 CNN3-shRNA慢病毒载体可在体调控局部脑区CNN3基因表达,为后续的机制研究和开拓疾病防治新途径奠定基础。

摘要:目的 研究针刺结合丹红注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤有无保护作用。方法 采用大脑中动脉内栓线阻断法(MCAO)制备大鼠大脑中动脉脑缺血再灌注损伤模型,缺血2 h后将线拔出实现再灌注,分别于再灌注后立刻静脉注射丹红注射液2 mL/kg,并针刺百会、足三里,每天1次,连续3 d,72 h后采用Zea-Longa的5级4分制评分方法进行神经功能评分,TTC染色法测定脑梗死面积, Western blot法检测缺血侧脑皮层中Bcl-2与Bax的蛋白表达。结果 与模型和单用丹红注射液组比较,针刺结合丹红注射液治疗后大鼠神经功能缺陷评分明显降低,脑梗死面积减少,Bcl-2 的蛋白表达增多,Bax蛋白表达减少。结论 针刺结合丹红注射液比单用丹红注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤具有更明显的保护作用。

摘要:目的 了解和掌握子午沙鼠在实验室内繁殖特征。方法 根据1996~2002年实验室饲养的子午沙鼠记录数据,推导雌雄体的性成熟期和雌体妊娠期,统计分析不同胎次和月份每窝产仔数、离乳数、成活率和性比结果。结果 雌雄体的性成熟期分别为(109.3±21.0)d和(106.3±21.7)d,妊娠期为(21.3±1.4)d;1~7胎各胎次之间出生数和离乳数差异不显著(P>0.05),而第4胎和第6胎的成活率低于平均胎仔数,但差异无显著性(P>0.05);1~7胎之间雌雄百分比差异没有显著性(P>0.05),各胎次平均雌雄比例为1.4:1.0。在12个月份中,9月-11月停止繁殖,其它各月份之间每窝出生数之间差异不显著(P>0.05),每窝离乳数和成活率在部分月份之间差异有显著性(P<0.05)。结论 与野生子午沙鼠繁殖数据比较,实验室驯化对子午沙鼠繁殖有影响,主要为季节繁殖提前到12月,繁殖窝数增加1~2窝。本结果为该鼠种实验动物化研究提供参考。

摘要:目的 探究强志组方治疗多发性抽动症(TS)复合恐惧行为的作用机制。方法 腹腔注射亚氨基二丙腈(IDPN)建立TS大鼠模型后,进一步声电刺激建立TS复合恐惧大鼠模型,给予不同药物灌胃治疗后,采用旷场试验、行为学检测大鼠行为变化,高效液相法(HPLC)检测脑组织中多巴胺(DA)的含量,免疫组织化学法检测酪氨酸羟化酶(TH)的含量,RT-PCR检测TH mRNA 的表达。结果 与正常对照组相比,模型对照组刻板行为、运动行为增加,冻结时间延长,脑组织中 DA、TH、TH mRNA 含量无明显变化;与模型对照组相比,强志组方组刻板行为、运动行为减少,冻结时间缩短,脑组织中 DA、TH、TH mRNA 含量减少。结论 强志组方可改善模型大鼠抽动复合恐惧行为,其作用机制可能是通过下调 TH mRNA表达,降低 TH 含量,减少 DA 合成实现的。

摘要:目的 分离并鉴定犬副流感病毒(canine parainfluenza virus,CPIV),并对该病毒N、HN和F基因进行序列分析,研究其遗传变异情况;为CPIV诊断、治疗以及预防奠定分子生物学基础。方法 用Vero细胞接种感染CPIV阳性犬肺组织,盲传3代,观察病变情况,收集72 h培养液进行PCR鉴定、血凝特性以及形态学观察。同时,用3对特异性引物,扩增N、HN和F全基因,进行序列测定和分析,并制作系统进化树。结果 从犬肺中成功分离出一株犬副流感病毒,并命名为QF20100726。该病毒能凝集豚鼠、猪、鸡和人O型血,电镜观察病毒呈圆形、长丝状等形态多样、大小不等的颗粒状;序列分析表明,与人源、犬源等10株有代表性的副流感病毒基因相比,N基因核苷酸同源性为 95.7%~99.8%,氨基酸同源性为97.4%~99.6%,其中有两处氨基酸发生新的变异,分别是第257位由V变成了A,第301位由A变成了T;HN基因核苷酸同源性为95.5~99.8%,氨基酸同源性为96.3~99.6%,F基因核苷酸同源性为94.7%~99.6%,氨基酸同源性为 95.6%~99.3%。有两处发生特异变异,分别是56位由T变成了S,89位由T变成了M。结论 成功分离犬副流感病毒QF20100726分离株,其血凝特性及超微形态特征均符合CPIV特性,N、HN和F全基因生物进化树显示,该分离株与犬副流感病毒分离株08-1990(登录号:KC237063)亲缘关系最近;N基因氨基酸在第257位(由V变成了A)和第301位(由A变成了T),F基因氨基酸在第56位(由T变成了S)和89位(由T变成了M)发生了特异性变异。这些数据将为CPIV的防控奠定基础。

摘要:微核(micronucleus,MN)试验,作为一种常规的基因毒性检测方法,已经得到了广泛的应用。其检测的标本也从骨髓扩展到血液和组织。除常规的药物基因毒性检测外,在基因改变性疾病的诊断,疗效的评估和预防等方面具有重要的作用。另外,微核试验也是药品,保健品注册上市的安全检测的一项重要的指标。本文就目前的微核试验的染色方法以及疾病和病毒学等领域的应用加以综述。

摘要:2015年底至今,Zika病毒在多国流行,关注升温。Zika病毒感染为伊蚊传播疾病,极有可能与新生儿小头畸形症有关,WHO建议孕妇要特别注意防止蚊虫叮咬。目前,除台湾省出现一例泰国籍输入病例外,我国大陆地区还没有Zika病毒感染的病例报道。伊蚊在我国台湾、海南、广东、广西、云南、福建等地在内的北纬25度以南的亚热带地区广泛存在,这些地区具有Zika病毒感染扩散的潜在风险。我们已提前做好资源和技术储备,应对可能出现的输入性病例,公众无需过于恐慌。