摘要:目的 研究中药新复方制剂复原再造胶囊对全脑缺血小鼠学习记忆功能的影响及其与氧化应激相关的作用机制。方法 采用双侧颈总动脉夹闭/再灌注致全脑缺血小鼠模型, 以Morris水迷宫和跳台试验检测小鼠学习记忆能力, 尼氏染色法观察海马神经元的病理变化, 黄嘌呤氧化酶法、硫代巴比妥酸法分别测定脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量。结果 全脑缺血/再灌注引起小鼠学习记忆能力受损, 海马CA1区神经元数量减少, 大脑皮层SOD活性降低, MDA含量增加。复原再造胶囊于造模后灌胃给药14 d, 能明显改善全脑缺血小鼠的学习记忆能力, 减少海马区神经元的损伤和丢失, 提高大脑皮层SOD活性, 降低MDA含量。结论 复原再造胶囊可通过抑制全脑缺血再灌注引起的氧化应激而改善学习记忆功能, 提示该药具有治疗缺血性脑血管病的应用前景。

摘要:目的 测定4周龄和8周龄不同性别CB6F1小鼠的脏器及血液生理生化指标正常值, 并比较周龄、性别对各项指标的影响。方法 分别取20只雌雄各半的4周龄和8周龄的CB6F1小鼠, 活体称重, 解剖称取主要脏器重量,采血测定血液生理指标和血清生化指标。结果 4周龄和8周龄CB6F1在体重、心、肝、脾、右卵巢、左睾丸、右睾丸、白细胞计数(WBC)、红细胞计数(RBC)、血红蛋白浓度(HGB)、红细胞压积(HCT)、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白(MCH)、血小板压积(PCT)、平均血小板体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)、淋巴细胞(LYM)、总蛋白(TP)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、白蛋白(ALB)、磷(P)、甘油三酯(TG)这22项指标上差异存在显著性(P<0.01), 在左肾、右肾、右肾上腺、胸腺、左卵巢、红细胞分布宽度(RDW)、单核细胞百分比(MON%)、尿素(BUN)这8项指标上差异有统计学意义(P<0.05)。从性别上比较, 4周龄CB6F1在体重、心、肝、脾、肺、左肾、右肾、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、LYM、ALT、ALP、葡萄糖(GLU)、P、总胆固醇(CHO)这14项指标上都有雌雄间的显著差异(P<0.01), 在右肾上腺、WBC、PCT、平均血小板体积(MPV)、总蛋白(TP)、BUN这6项指标上存在雌雄间的统计学差异(P<0.05);8周龄CB6F1在体重、心、肝、肺、左肾、右肾、MCV、PCT、LYM、淋巴细胞百分比(LYM%)、中性粒细胞百分比(NEUT%)、ALT、GLU、P、CHO这15项指标上都有雌雄间的显著差异(P<0.01), 在WBC、RBC、MPV、中性粒细胞(NEUT)、TP这5项指标上存在雌雄间的统计学差异(P<0.05)。结论 本文测定了不同周龄不同性别CB6F1小鼠的脏器及血液生理生化指标, 为其建立正常检测指标和应用提供参考。

摘要:目的 利用分子生物学技术研究饲粮中添加乳清粉对断奶早期实验兔肠道微生物区系和益生菌的影响。方法 采用单因子实验设计, 选择40日龄断奶实验兔, 随机分为4组(每组12只), 分别饲以乳清粉添加水平为0%、2%、5%和10%的饲粮。饲喂30 d 后, 每组随机取8只兔, 麻醉处死, 取盲肠内容物提取细菌总DNA, 首先利用PCR-DGGE技术分析兔盲肠微生物区系多样性, 进而应用实时荧光定量PCR(SYBR Green I)法定量检测盲肠细菌中双歧杆菌和乳酸杆菌含量。结果 (1)实验兔盲肠细菌DGGE各分析参数随乳清粉添加量的提高逐渐上升, 添加不同水平乳清粉均可显著增加DGGE条带数(P<0.05, P<0.01)。2%和5%乳清粉添加水平组的DGGE条带数和香农指数均极显著(P<0.01)高于未添加组, 但以上2项指标在乳清粉各添加水平间差异无显著性(P>0.05)。DGGE均匀度指数在各实验组间均无差异显著性(P>0.05)。(2)饲粮中添加乳清粉可提高实验兔盲肠内容物中乳酸杆菌和双歧杆菌数量, 其中各乳清粉处理组(2%, 5%和10%)的乳酸杆菌数量均显著高于0%添加组(P<0.05), 10%乳清粉添加组的双歧杆菌数量显著高于未添加组(P<0.05), 但与其他2个乳清粉添加组无差异显著性(P>0.05)。结论 (1)饲粮中添加乳清粉可显著提高实验兔盲肠细菌菌群的多样性。(2)在实验兔饲粮中添加乳清粉可有效增加肠道益生菌数量。

摘要:目的 探索Beagle犬分离后的血清在不同保存条件和保存时间对血液生化指标检测的影响, 保证长期毒性试验中检测结果的可靠性。方法 选取Beagle犬6只, 雌雄各半, 采集Beagle犬静脉血, 制备血清后, 分别在1 h内、冰箱(2~8)℃保存2、5、8、12 h、冰盒(2~10)℃中进行运输保存2、5、8 h、冰箱-20℃保存1、3、5 d对丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素(UREA)、肌酐(CREA)、葡萄糖(GLU)、总胆固醇(TCHO)、总胆红素(TBIL)肌酸激酶(CK)、γ-谷氨酰基转移酶(GGT)、钙(CA)、乳酸脱氢酶(LDH)、 磷(P)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、甘油三酯(TG)、钠(Na⁺)/钾(K⁺)/氯(Cl^-)进行检测。结果 (2~8)℃冰箱保存12 h内和(2~10)℃冰盒保存8 h内的血液生化值均无差异;与血清分离后1 h内结果比较,-20℃保存5 d的LDL-C差异有显著性(P<0.05)且变动百分率为39%, CK、LDH值有逐渐增大的趋势, 但无统计学意义(P>0.05), LDH的变动百分率达41%。结论 根据Beagle犬血液标本在不同保存条件和保存时间对血液生化指标检测结果的影响的试验结果, 在制备血清后, 应该在1 h内进行检测, 如未能在样本制备后1 h内检测, 应将样本置于(2~8)℃环境并在12 h内进行检测, 或置于约-20℃环境并在3 d内进行检测。要对血清标本进行运输的, 应放置于冰盒(2~10℃)中, 并在8 h内进行检测。

摘要:目的 比较培养法和PCR法对实验大、小鼠的细菌检测效果。方法 分别采用传统细菌分离培养结合生化鉴定方法和PCR方法, 对78只SPF级大鼠和422只SPF级小鼠进行检测, 对两种方法的检测结果进行比较分析。结果 78只SPF级大鼠均未检测出阳性。422只SPF级小鼠, 培养法检测阳性率7.11%(30/422), 其中金黄色葡萄球菌10只, 绿脓杆菌22只, 肺炎克雷伯杆菌2只。PCR法检测阳性率7.58%(32/422), 其中金黄色葡萄球菌10只, 绿脓杆菌25只, 肺炎克雷伯杆菌2只。结论 PCR法的敏感性高于培养法, 操作简便、快捷, 适用于实验动物细菌的快速诊断和大规模的质量筛查。

摘要:目的 通过长期高糖高脂饮食导致动物出现代谢综合征合并阿尔茨海默(AD)样改变动物模型的研究。方法 将48只SD大鼠随机分为2组, 正常对照组(用普通饲料饲喂) 24只, 高糖高脂组(饲以高糖高脂饲料)24只, 连续喂养12 个月。于实验第 6、9、12月末观察动物体重、肾周和附睾或子宫周围脂肪重量并计算Lee指数; 检测血液中代谢综合征相关生化指标的变化;Western blotting测定海马Tau蛋白含量及其磷酸化水平;ELISA法检测海马Aβ的含量;HE染色观察脑组织病理改变。结果 与正常对照组相比, 各阶段高糖高脂组大鼠体重、内脏脂肪重量明显增加; 血清中FPG、TG、LDL等明显升高, HDL显著下降;海马Aβ、P-tau较对照组明显升高, 其差异有统计学意义;病理组织学显示模型组脑组织有明显的炎性浸润、小胶质细胞活化明显。结论 高糖高脂饮食诱导大鼠代谢综合征动物模型可并发AD样变, 可为老年痴呆动物模型的构建提供一个新的思路。

摘要:目的 评估活血消异方子宫内膜异位症模型小鼠体外受精胚胎发育的影响。方法 通过体外受精的方法, 观察中药组、模型组和假手术组的小鼠的促排卵数、受精率、二细胞分裂率、四细胞分裂率、桑葚胚形成率及最终桑葚胚形成率, 观察对子宫内膜异位症模型小鼠体外受精胚胎发育的影响。探讨内异症对小鼠体外受精后胚胎发育的影响及活血消异方对胚胎发育的作用。结果 中药组、模型组和假手术组, 共三组。三组的平均促排卵数、体外受精率和二细胞分裂率差异有显著性意义(P<0.05), 平均促排卵数、体外受精率和二细胞分裂率由高到低均依次为假手术组、中药组和模型组;三组的四细胞分裂率差异有显著性意义(P<0.05), 桑葚胚形成率差异无显著性差异(P>0.05), 桑葚胚最终形成率差异有显著性差异(P<0.05)。结论 子宫内膜异位症可降低模型小鼠促排卵数、体外受精率及卵裂率, 影响胚胎发育质量,活血消异方可改善胚胎发育质量。

摘要:目的 准确测定SPF新西兰兔生物学特性尤其是疾病相关的指标, 并进行性别间比较。方法 取70~80日龄左右SPF新西兰兔30只, 饲养1周后, 精确称量体重及主要脏器重量;采集动脉血测定血液生理、生化、血气指标;颈动脉插管测定动脉压, 呼吸支持情况下进行开胸测定心室压。结果 雄性与雌性新西兰兔比较: 甲状腺、肾上腺、肝的质量差异有显著性意义(P<0.05或P<0.01);脑、脑垂体、甲状腺的脏器系数差异有显著性意义(P<0.05或P<0.01);甲状腺、肾上腺、肝的脏脑比系数差异有显著性意义(P<0.05或P<0.01)。红细胞平均体积、平均血红蛋白量的差异有显著性意义(P<0.05或P<0.01);谷氨酰转肽酶、淀粉酶的差异有显著性意义(P<0.05或P<0.01);血气分析、心率、颈动脉收缩/舒张压, 左心室收缩/舒张压, 右心室收缩/舒张压不存在性别间差异。结论 性别对新西兰兔脏器重量及血液生理生化指标有一定影响, 而血气、血压、心率及心室压指标不存在性别间差异。

摘要:目的 评价定量组织速度成像技术对检测家兔肺动脉栓塞模型右室功能的应用价值。方法 家兔22只, 经耳缘静脉注入栓子制成急性肺动脉栓塞模型。分别于造模前、造模后即刻、造模后1周及3周观察家兔右心室动态变化情况。存储心尖四腔心切面定量组织速度成像(QTVI)图像并进行脱机分析。结果 造模后即刻, 右室游离壁基底段, 中间段的收缩期峰值速度(V_P)均较造模前明显减低, 达峰时间(T_Vp)延长, 三尖瓣口舒张早期峰值血流速度/舒张晚期峰值血流速度(Ve/Va)大于1。差别具有显著性意义(P<0.05)。造模后1周, 右室游离壁基底段, 中间段的收缩期峰值速度(V_P)均较造模前减低, 达峰时间(T_Vp)延长, 较造模后即刻组差别无显著性意义, 但Ve/Va小于1。造模后3周, 右室游离壁基底段, 中间段的收缩期峰值速度(V_P)较造模前仍减低, Ve/Va比值小于1。较造模后1周组差别具有显著性意义(P<0.05)。组内比较收缩期峰值速度, 右室游离壁基底段均较中间段增大, 差别具有显著性意义。但收缩期达峰时间, 两者差别无显著性意义。结论 定量组织速度成像能够直观反映家兔右室舒张及收缩功能状况,是评价动物肺动脉栓塞模型右室功能的重要手段。

摘要:目的 比较SD大鼠、C57小鼠建立5/6肾切除(5/6 nephrectomy, 5/6NX)慢性肾功能衰竭动物模型的异同, 选择合适的实验动物以供慢性肾功能衰竭的防治研究。方法 将60只SD大鼠和60只C57小鼠分别随机、平均分成5/6肾切除组和假手术组, 分别于术后4周、8周、12周三个时间点处死各组老鼠, 收集血清和肾组织供肾功能、α-SMA检测分析。结果 大、小鼠模型组成活率不存在差异(P>0.05), 大鼠5/6NX组血清肌酐及尿素氮值于8~12周出现稳定状态, 异于小鼠5/6NX组。结论 C57小鼠5/6肾切除慢性肾衰模型建立成功。5/6NX大、小鼠组均于术后出现进行性肾功能减退的表现, 然其疾病进程不尽相同, 临床应根据监测周期长短选择合适的实验动物以准确地反应疾病状态。

摘要:目的 研究左旋泮托拉唑钠对幽门结扎大鼠胃溃疡模型的有效性。方法 采用幽门结扎大鼠胃溃疡模型, 通过检测胃酸分泌量、胃蛋白酶活性、溃疡抑制率、血清胃泌素水平等指标及胃粘膜组织病理学切片观察, 全面评价左旋泮托拉唑钠对幽门结扎大鼠胃溃疡模型的作用。结果 左旋泮托拉唑钠 (0.9、1.8、3.6 mg/kg, i.v.) 可明显降低模型大鼠胃酸分泌量和血清胃泌素水平, 抑制胃蛋白酶活性和溃疡程度, 减轻胃粘膜的组织病理学病变。结论 左旋泮托拉唑钠对幽门结扎大鼠胃溃疡模型有明显的改善作用。

摘要:目的 探讨多种特殊染色技术在软骨细胞中的染色规律及其应用价值。方法 选取出生7 d内的C57BL/6J小鼠12只, 处死后取双侧膝关节软骨行软骨细胞原代培养, 并行II型胶原免疫荧光鉴定, 取5代以内的原代细胞制作细胞爬片, 细胞爬片制备完成后行HE染色、番红O-固绿双染色、SA-β半染糖苷酶半乳糖苷酶衰老染色及II型胶原免疫组化染色, 观察软骨细胞组织形态变化, 并对几种染色方式进行比较。结果 HE染色中细胞核呈紫蓝色, 细胞质呈粉红色, 细胞形态结构清楚;番红O-固绿双染色中细胞核呈粉红色, 细胞质呈蓝绿色, 细胞形态结果较清晰;SA-β半染糖苷酶半乳糖苷酶衰老染色时, 衰老软骨细胞呈绿色, 未衰老细胞无着色;II型胶原免疫组化染色时, II型胶原呈棕黄色, 细胞核呈紫蓝色。结论 HE染色和番红O-固绿双染色可以清晰分辨细胞核和细胞质等细胞结构, 对单个细胞形态的显示比较清楚;SA-β半染糖苷酶半乳糖苷酶衰老染色可以显示出衰老细胞的数量及衰老的程度;II型胶原免疫组化染色可以对II型胶原进行定位与定量。

摘要:目的 建立念珠状链杆菌的实时荧光定量PCR检测方法, 实现该菌在多种实验动物中的快速检测。方法 根据NCBI公布的念珠状链杆菌序列, 设计特异性引物和探针, 通过对24株标准参考菌株的扩增, 验证其特异性、敏感性和重复性。运用所建立的方法对小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、兔、长爪沙鼠和树鼩的共823份呼吸道样本进行检测。结果 用所建Taqman MGB荧光定量PCR方法在小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠和兔中未检出念珠状链杆菌;检出普通级长爪沙鼠和树鼩中念珠状链杆菌的阳性率分别为1.5%(1/65)和61.7%(37/60)。结论 本研究所建立的念珠状链杆菌Taqman MGB荧光定量PCR检测方法, 能够对实验动物中念珠状链杆菌进行快速准确的检测, 敏感性优于国标方法, 为实验动物质量检测体系的完善奠定了基础。

摘要:自噬是机体利用溶酶体清除受损细胞器和功能障碍蛋白质, 以维持蛋白质平衡和细胞内环境稳态的重要途径。而阿尔茨海默病作为一种以异常蛋白聚集为主要特征的中枢神经系统退行性疾病, 自噬在其发病机制中的作用尚不明确, 本文试以Aβ为切入点, 探讨自噬对阿尔茨海默病的影响。

摘要:经过多年参与实验动物设施的设计、建造、调试与运行所积累的经验, 对实验动物设施自动控制系统的作用进行了阐述, 对实验动物设施自动控制系统在规划、设计、建造过程中存在的问题进行分析, 剖析问题存的根源并对改进措施提出一些合理化建议。

摘要:目的 制作一种新型的清醒大鼠固定装置, 并规范其使用方法, 以弥补现有固定方法的不足。确保无论使用者有无经验均能高效完成清醒动物固定及后续操作。方法 用透明塑料薄膜, 塑料封口机, 海绵等材料设计制作大鼠固定装置, 利用大鼠的逃匿天性, 达到自束缚的效果。并通过固定与注射实验比较该新型方法较传统方法的优点。结果 与传统的固定方法相比, 使用该新型固定装置不仅更节约时间, 其中固定操作平均耗时由18.13 s减少到10.03 s,, 提高了44.7%;固定与注射平均耗时从139.33 s减少到52.26 s, 提高了55.3%, 并能显著降低大鼠应激反应。结论 该装置和方法适用于清醒大鼠固定及注射, 并能由单人完成尾静脉注射和采血操作, 可显著减少操作时间并降低大鼠的应激反应, 使实验结果更准确可靠。特别适合缺乏动物实验操作经验的人群, 值得在教学和科研中推广。

摘要:随着中国经济的迅速发展, 中国的科学技术与产业已经成为国际上第二大科技实体。实验动物在生命科学、生物医药、人口健康、食品安全等诸多领域都有广泛的应用。这些领域的发展也促进了实验动物行业的快速发展。中国实验动物学会在推动实验动物科学技术与产业发展, 提升实验动物福利伦理水平方面发挥了重要作用。3R理念和环境丰富化的重要性逐渐被行业内同行所接受。本文通过介绍实验动物丰富化的进展情况, 探讨了在中国推动实验动物环境丰富化发展的可行方法。

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