摘要:目的 探讨慢性肠道炎症状态下菌群结构及构成改变对肝癌进展的影响。方法 22只雄性乙肝病毒转基因小鼠在出生后第2周腹腔注射二乙基亚硝胺诱导小鼠原发性肝癌, 随机分为慢性肠炎组(给予含2%葡聚糖硫酸钠的饮用水)和对照组(给予正常饮用水)。上述小鼠观察至22周龄。在此期间定期进行肝功能测定, 收集粪便进行宏基因组测序。另将4只已发生肝癌的小鼠与7只8周龄肉眼及病理学未见肝癌的小鼠同笼(分2笼)饲养16周。结果 DSS所诱导的慢性肠炎小鼠与正常饮用水小鼠相比肝功能无显著改变;DSS诱导的慢性肠炎组小鼠(n=10)在第22周龄时有9只发生弥漫性肉眼可见的肝癌, 而正常饮用水小鼠(n=12)仅有2只发生肝癌, 肿瘤发生率(P=0.002)和肿瘤数量(P=0.028)有显著差别;与正常饮用水小鼠相比, 慢性肠炎组小鼠肠道菌群中, 普雷沃氏菌属(P=0.022)和厌氧支原体属(P=0.014)显著减少;与已发生肝癌小鼠进行同笼饲养的小鼠(n=7)在24周龄时全部发生肉眼可见的肝癌。结论 慢性肠道炎症状态下, 肠道菌群改变可促进肝癌进展。

摘要:目的 通过检测ETFβ在糖尿病肾病中的改变, 探讨其与脂毒性的关系。方法 体内实验采用腹腔注射链脲佐菌素合并单侧肾切除建立糖尿病肾病模型, 并评价肾小管损伤情况, 检测ETFβ在肾皮质中的表达变化。体外建立脂肪酸诱导肾小管细胞NRK 52E凋亡模型, 构建ETFβ重组质粒, 并将其转染至NRK 52E细胞, 观察ETFβ过表达对脂肪酸诱导细胞凋亡的作用。结果 链脲佐菌素合并单侧肾切除诱导的糖尿病肾病大鼠模型中, 肾小管明显损伤, ETFβ mRNA 和蛋白表达均下降。脂肪酸可诱导NRK 52E细胞凋亡, 过表达ETFβ可减少凋亡。结论 糖尿病肾病模型中ETFβ表达下降, 过表达ETFβ可降低脂肪酸诱导的肾小管细胞凋亡。

摘要:目的 探讨姜黄素和茶多酚对不同时间UVB致无毛鼠急性光损伤的防御作用。方法 取清洁级无毛鼠36只, 随机分为对照组及药物组(0 s、30 s、60 s、120 s、240 s);每组各2只。于照射前30 min在无毛鼠背部涂抹姜黄素或茶多酚, 照射距离为15 cm, 采用3倍最小红斑量(MED)的UVB约200～540 mJ/cm²分别照射各组, 取皮肤组织, 制成石蜡切片, 光学显微镜观察。结果 对照组无毛鼠皮肤出现不同程度鳞屑, 胶原间可见散在淋巴细胞, 且120 s及240 s时出现胶原红染、排列紊乱、均质化等改变。药物组无毛鼠真皮中炎性细胞浸润减少, 胶原受损现象得到改善。结论 外用姜黄素和茶多酚可通过减轻炎症细胞浸润及减轻胶原受损程度而防御UVB致无毛鼠皮肤急性光损伤。

摘要:目的 建立同时符合中医"热盛证"和原发免疫性血小板减少性紫癜外周血血小板减少的大鼠模型。方法 采用SD大鼠背部多点注射20%干酵母菌悬液和腹腔注射1:4稀释的兔抗SD大鼠血小板血清(APS)建立原发免疫性血小板减少性紫癜热盛大鼠模型。并观察受试大鼠的中医证侯特点、血象、骨髓象及丘脑体温调节中枢5-羟色胺(5-HT)的水平。结果 模型组大鼠注射后2～6 h体温和日饮水量显著上升, 造模第4天出现足趾紫癜和造模第30天出现肠道黏膜出血(P<0.05);外周血象中血小板数显著降低, 骨髓象巨核细胞数显著减少(P<0.05);大脑体温调节中枢5-HT的水平显著增高(P<0.05)。结论 原发免疫性血小板减少性紫癜热盛大鼠病证结合模型基本体现了"热盛"所致原发免疫性血小板减少性紫癜大鼠发生紫癜的病理特点。

摘要:目的 为研究者选择合适的牛磺胆酸钠浓度来制备大鼠重症胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)SAP模型提供依据。方法 将60只SD大鼠随机分为假手术组、1.5%浓度组、3.5%浓度组和5%浓度组, 造模各组分别用1.5%、3.5%和5%牛磺胆酸钠按逆行胆胰管注射法制备SAP模型。术后统计各组大鼠的死亡率;检测血清淀粉酶、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)水平;观测各组大鼠胰腺组织HE染色病理评分。结果 5%浓度组死亡率较1.5%浓度组显著升高, 血淀粉酶、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)水平、出血和腺泡组织坏死的病理评分较1.5%浓度组和3.5%浓度组均有显著升高。结论 5%的牛磺胆酸钠逆行胆胰管注射法能更好的制备SAP模型, 且更符合SAP的生理、病理表现。

摘要:目的 探讨多巴胺D5受体是否会通过抑制氧化应激来影响扩张型心肌病(dilated cardiomyopathy)的发生发展。方法 建立心脏特异表达人多巴胺D5受体突变基因F173L(α-MHC-hD5F173L)和正常基因(α-MHC-hD5WT)转基因小鼠。用3月龄小鼠, 首先检测比较转基因小鼠心脏内ROS的产量和NOX2的表达量。然后对α-MHC-hD5F173L小鼠通过皮下给NADPH氧化酶的抑制剂罗布麻宁(Apocynin)4周, 同时给PBS作为对照组, 然后检测各项心肌病相关指标。同时构建人多巴胺D5受体突变基因(hD5F173L)和正常多巴胺D5受体基因(hD5WT)的大鼠心肌细胞(H9C2), 检测两者在基础条件下ROS产量的变化。结果 α-MHC-hD5F173L转基因小鼠的NADPH氧化酶的活性和NOX2蛋白的表达量均明显高于野生型α-MHC-hD5WT 小鼠, 罗布麻宁能显著改善α-MHC-hD5F173L转基因小鼠的心脏功能。H9C2-hD5F173L大鼠细胞系NOX2的表达量及ROS产量高于H9C2- hD5WT对照细胞。结论 多巴胺D5受体可能通过抑制氧化应激而防止扩张型心肌病的发生发展。

摘要:目的 繁殖雄性生殖细胞特异性表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)小鼠, 为进行小鼠生殖系统毒性研究提供有效的工具。方法 将Ddx4-cre转基因雄鼠与Rosa26mT/mG转基因雌鼠交配, 产生子代动物, 利用分子生物学、组织病理学及活体成像等技术, 分别从分子、细胞和组织水平对子代及其亲代小鼠进行表型鉴定。结果 PCR结果表明在子代小鼠的睾丸组织中发生了Cre酶介导的特异性基因重组;活体成像可以看到在F1代小鼠的睾丸组织中具有GFP的表达;睾丸冰冻切片及精子荧光观察显示GFP主要表达于次级精母细胞、精子细胞和精子中。结论 雄性生殖细胞特异性表达GFP小鼠繁殖成功。

摘要:目的 对近3年北京地区的两个NIH封闭群小鼠群体的遗传质量进行监测分析。方法 利用生化标记基因检测法, 2011年测定A、B两单位NIH小鼠在碱性磷酸酶-1等14个遗传生化标记位点上的多态性。2014年利用相同方法原则对B单位的NIH小鼠群体进行抽样检测, 比较了该小鼠群体3年来的遗传构成变化。结果 2011年, A、B两单位NIH小鼠群体均呈多态性的生化标记位点有6个(Ce2、Car2、Gpi1、Es10、Gpd1、Pgm1), 且B单位在Es3位点也呈多态性;两群NIH小鼠在Car2位点有差异(P < 0.05),在Es3、Gpd1、Pgm1三个位点有显著差异(P < 0.01);两群体的群间分化系数为0.0406, 遗传一致性指数为0.9619, 遗传距离为0.0388。与2011年相比, B单位封闭群NIH小鼠在2014年出现了2个纯合位点(Ce2和Gpd1), 同时Es10和Gpd1两位点差异极显著(P < 0.01),Pgm1位点差异显著(P < 0.05);不同代次NIH小鼠群间分化系数为0.1103, 遗传一致性指数为0.8847, 遗传距离为0.1266。结论 群体隔离、选种育种、种群数量和繁育代次等对NIH小鼠遗传构成差异影响显著。留种和繁育生产时应加强封闭群NIH小鼠的遗传监测, 为其遗传质量的稳定性提供保障。

摘要:目的 研究毛蚶提取物和NP方案化疗药物合用后有无增效和减毒作用。方法 采用人肺癌A549细胞株制备裸鼠移植瘤模型, 通过检测抑瘤率、体重、摄食量、血液学和血液生化学等指标, 全面评价毛蚶提取物和NP化疗方案合用后的增效减毒作用。结果 毛蚶提取物(125、250、500 mg/kg, i.g)与NP化疗方案合用比单用NP化疗方案抑瘤率明显提高, 明显抑制化疗引起的体重减轻、摄食量减少、减轻化疗对血液系统和肝肾功能的毒副作用。结论 毛蚶提取物对NP方案化疗具有明显的增效减毒作用。

摘要:目的 探讨亲代三丁基锡暴露对F1昆明小鼠血常规的影响。方法 将雌、雄各40只小鼠随机分别分为空、低、中、高浓度组(0、0.2、2和20 μg/kg), 每天进行染毒, 持续45 d。在第60天时, 将同浓度组的雌:雄鼠按1:1进行同笼配种。仔鼠出生60 d后取血, 进行血常规的检测。结果 与对照组相比, F1代雄性低浓度和高浓度组的红细胞数量和血红蛋白量显著增加(P < 0.01);F1代雄性低浓度组红细胞体积、平均血红蛋白含量(P < 0.01)和淋巴细胞绝对值(P < 0.05)显著降低;F1代雌性高浓度组的红细胞数量显著增加(P < 0.01), F1代雌性小鼠的血红蛋白量、红细胞压积、血小板量三项指标随着TBT浓度的增加呈剂量依赖性。结论 亲代TBT暴露影响F1代小鼠的血常规, 且低浓度时对F1代雄性小鼠的影响最大, 高浓度时对F1代雌性小鼠的影响最大。

摘要:目的 探讨内窥镜辅助大鼠气管插管方法。方法 将40只大鼠随机分成内镜组和直视组两组, 比较插管操作时间、插管总完成时间、插管次数、插管一次成功率、呕吐反射次数、窒息次数和拔管后24存活率。结果 内镜组的插管操作时间、插管次数、一次插管成功率、呕吐反射次数、窒息次数均优于经经口明视组(P < 0. 05), 插管总完成时间、拔管后24存活率比较差异无统计学意义(P > 0. 05)。结论 采用内窥镜辅助插管法优于传统的经口指视插管法, 值得推广。

摘要:目的 探讨视网膜血管铺片技术的改进及在实验动物小鼠, 大鼠, 狗和猴中的应用。方法 应用蛋白酶K-胰蛋白酶联合消化法制备视网膜血管铺片, 行HE及PAS染色观察血管形态, 免疫组化方法观察CD31及VEGF的表达。结果 用改进方法制备的视网膜血管铺片, 血管网完整, 无神经组织残留, 可清晰显示血管走向。各级血管形态清晰, 血管分支清楚完整, 无断裂现象。血管内皮细胞形态清晰。CD31在血管周细胞及内皮细胞均有表达;VEGF主要在内皮细胞表达。结论 改进的视网膜血管铺片技术可成功应用于不同实验动物, 为视网膜血管性疾病的研究提供了重要途径。

摘要:目的 分析比较BALB/c和CBA小鼠局部淋巴结试验结果。方法 将已知致敏性的4种化学物(2,4-二硝基氯苯、丁子香酚、己基肉桂醛和异丙醇)和未知致敏性的3种化妆品对BALB/c和CBA小鼠连续染毒3 d, 第5天腹腔注射示踪剂BrdU, 第6天分离颌下淋巴结制取单细胞悬液, 用ELISA试盒检测细胞增殖。结果 2,4-二硝基氯苯、丁子香酚、己基肉桂醛和3号烫发剂两品系结果均呈致敏阳性, 3种化学物EC1.6值分别为0.08%(极强)、4.02%(中)、6.68%(中)(BALB/c)和0.07%(极强)、6.08%(中)、8.89%(中)(CBA);异丙醇、1和2号化妆品两品系结果均为致敏阴性, SI均小于1.6。结论 两品系小鼠局部淋巴结试验结果较一致, BALB/c可替代CBA小鼠应用于化学物和化妆品的致敏性评价。

摘要:目的 应用光激化学发光免疫分析技术(AlphaLISA)建立仙台病毒检测方法。方法 通过方阵实验筛选仙台病毒AlphaLISA检测的最佳抗原浓度以及供体微珠与受体微珠的最佳受试浓度及比例, 对大鼠血清进行测试, 确立血清检测浓度;对40份大鼠血清分别使用AlphaLISA检测方法和ELISA检测方法进行检测, 并对检测结果进行比较。结果 生物素化标记的仙台病毒多肽类抗原的最佳测试浓度为250 nmol/L, 供体微珠与受体微珠的最佳比例为1:1, 使用浓度为20 μg/mL, 在AlphaLISA检测方法中大鼠血清测试最佳使用浓度1:10000;共检测40份大鼠血清, ELISA方法检出阳性7份, 阳性率为17.5%, AlphaLISA方法检出阳性8份, 阳性率为20.0%, ELISA检测阳性的7份血清经AlphaLISA方法检测均为阳性, AlphaLISA检出的另外一份样品经IFA方法验证为阳性。结论 初步建立了仙台病毒光激化学发光免疫分析技术(AlphaLISA)的检测方法, 该方法敏感性堪比经典ELISA方法, 且血清样本的用量减少, 无需洗涤等步骤, 在方法的简并性及准确性上有一定优势。

摘要:糖尿病神经痛(diabetic neuropathic pain, DNP)作为临床上最常见的并发症之一, 极大地影响了患者的生活质量, 目前发病机制尚不明确, 缺少有效的治疗方法。DNP与周围感觉神经兴奋性增强有关, 涉及多种离子通道、受体表达、功能上调, 已有研究表明P2X3受体参与DNP等多种神经病理痛的痛觉形成、传导和调节, 本文将围绕DNP模型的建立及P2X3受体在DNP模型中的作用予以综述。

摘要:目的 从病理学角度评价啮齿类实验动物的健康情况, 为实验动物标准化饲养提供建议, 确保相关科研结果的准确性。方法 本文主要对2014年10月北京市15家实验动物单位的啮齿类实验动物病理学抽检情况进行统计分析。采集啮齿类实验动物的心、肝、脾、肺、肾、大肠和小肠后经甲醛钙液固定, 通过石蜡切片HE染色、PAS 染色、冰冻切片油红O染色后于显微镜下观察。结果 实验动物总体合格, 但个别单位仍然存在问题。检出病变器官主要是肝脏和肺脏, 肝脏病变检出率小鼠为6%, 大鼠为2.5%, 豚鼠为8.2%, 地鼠未检出, 肝脏病变表现为细胞肿胀, 且经特殊染色确证部分为脂肪变性;肺脏病变检出率豚鼠为15.5%, 其余未检出, 肺脏病变表现为淤血、渗出及间质性肺炎。结论 实验动物病理学检测基本健康, 肝脏出现损伤可能与饲料有关;而肺脏病变可能与垫料及空气有关, 而秋冬季雾霾及低温可能对实验动物健康有所影响。

摘要:目的 了解华北地区埃博拉病毒莱斯顿亚型的分布和流行情况, 为埃博拉病毒病的防控提供理论依据。方法 采集华北地区动物园及养殖场的多种哺乳动物血清, 对其进行埃博拉病毒莱斯顿亚型的检测。结果 采集各种哺乳动物血清共109份, 经Real-time PCR方法检测未检出阳性样品。结论 埃博拉病毒尚未在华北地区流行, 应加强对埃博拉病毒病的知识宣传, 并做好安全防护工作。

摘要:目的 调查白化旱獭重要病原体的自然感染状况, 为建立白化旱獭寄生虫学质量控制标准提供依据。方法 对21只野生的白化旱獭和30只正常毛色旱獭采用粪便检查法和血清学方法检测了蠕虫、弓形体、棘球蚴等体内寄生虫感染情况。结果 51只野生白化喜马拉雅旱獭和正常毛色旱獭检出蠕虫1种, 弓形体和棘球蚴抗体检测结果均为阴性。应用阿苯达唑片剂和伊维菌素注射液进行了旱獭体内寄生虫驱虫和净化, 效果良好。结论 监测结果初步表明白化旱獭寄生虫学质量符合种群动物的寄生虫要求。