摘要:目的 人工构建TALEN靶向敲除载体敲除gata4基因, 建立斑马鱼先天性心脏病动物模型。方法 采用单元组装法构建靶向敲除gata4基因的载体, 将其体外转录成TALEN mRNAs, 通过显微注射的方式注入单细胞期受精卵中, 胚胎检测TALEN的敲除效率, 再通过剪尾、酶切、测序筛选发生基因突变的斑马鱼及突变的类型。结果 酶切、测序结果证实成功构建出正确的 gata4靶向敲除载体, 注入斑马鱼受精卵中, 发生基因敲除的效率为35.18%, 通过剪尾、PCR、酶切检测成功地筛选出了发生基因突变的斑马鱼, 测序结果显示出不同种类的gata4基因突变。结论 成功构建gata4基因敲除的斑马鱼动物模型, 为进一步研究人类gata4基因突变引起先天性心脏病的发病机制提供了良好的动物模型。

摘要:目的 观察补阳还五汤对脑卒中后抑郁大鼠行为学的影响。方法 选择雄性SD大鼠, 根据旷场试验基线值, 选择评分相近的60只大鼠随机分为假手术组、卒中组、PSD组、补阳还五汤组、氟西汀组, 共5组, 每组12只。采用大脑中动脉线栓法建立永久性局灶性脑缺血模型结合CUMS及孤养的方法复制PSD模型。通过体重测量、神经功能评分、糖水消耗实验、旷场实验等指标观察各组大鼠行为学变化。结果 与假手术组、卒中组比较, PSD组大鼠体重和糖水消耗量降低、旷场实验自发活动下降、神经功能缺损加重(P<0.05或P<0.01);与PSD组比较, 补阳还五汤组和氟西汀组均能增加大鼠体重、糖水消耗量及自发行为, 改善其神经功能缺损(P<0.05或P<0.01)。结论 PSD大鼠出现行为学异常, 补阳还五汤可以明显改善其行为学症状, 具有一定抗抑郁作用, 其疗效与氟西汀相当。

摘要:目的 观察急性血液稀释技术(ANH)在狗断肢冷冻再植实验中对改善术中、术后动物全身状态的作用。方法 在狗后肢深低温冷冻再植实验中, 对照组(A组)采用静脉补充等量乳酸钠林格氏液, 实验组(B组)采用急性血液稀释技术, 对比两组各时点循环动力学指标、血常规、术后动物苏醒时间、抬头时间、站立时间、术后进食、进水时间。结果 ①术中两组PaO₂、PCO₂值均在正常范围, 呼吸频率正常, B组心率明显低于A组, 术中血红蛋白、红细胞压积输血前A组与B组无统计学差异, 术后B组明显高于A组, 差异存在显著性。②术后动物苏醒时间、抬头时间、站立时间、术后进食量、进水量B组均明显优于A组, 存在显著差异。结论 在狗断肢深低温冷冻再植实验中, 急性血液稀释技术(ANH)能明显改善动物术中的全身状态, 加快术后恢复速度。

摘要:目的 测定自主建立的转基因致癌性模型C57-ras小鼠与BALB/c 小鼠杂交1 代的生长发育特性参数, 为该模型的商业化供应提供基础数据。方法 将雄性转基因阳性C57-ras小鼠与野生型雌性BALB/c 小鼠交配, 获得杂交1 代(CB6F1 c-Ha-ras^+/-)并测定平均产仔数、离乳率、阳性鼠生长发育情况、转基因阳性率等参数。结果 在生长发育方面, 雌鼠平均每窝产子数为8只, 离乳率为90%, 雄雌性别比符合预期。CB6F1的平均出生重为(1.73±0.05)g, 10周龄时阳性鼠平均体重雌性(24.38±1.74)g, 雄性(29.42±1.72)g。雄性鼠体重明显高于雌性, 差异存在极显著性(P<0.01);基因型检测阳性率为46.9%, 符合遗传规律。结论 转基因致癌性模型C57-ras小鼠与BALB/c 小鼠杂交1 代的生长发育特性正常, 可实现规模化商业供应。

摘要:目的 探讨大鼠创伤性脑损伤后17β雌二醇对脑组织的保护作用。方法 选择雄性成年 SD大鼠 45 只, 按随机数字表法分为三组, 每组15只: 对照组仅开骨窗, 不损伤脑组织;致伤组制大鼠自由落体脑撞击伤模型;处理组在致伤组的基础上, 伤前1周腹腔注射17β雌二醇溶液(1 mg/kg), 1次/d。余两组仅注射同体积的蓖麻油。在伤后 6 h、 24 h 及48 h 测量各组脑组织含水量、 丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果 致伤组和处理组在伤后 6 h、24 h、48 h 三个时间点脑组织含水量均高于对照组(P<0.05)。在伤后 6 h, 致伤组和处理组脑组织含水量比较差异无统计学意义[(58.39±0.29)%比(57.03±0.27)%] (P> 0.05), 而在伤后24 h、48 h 致伤组脑组织含水量明显高于处理组,差异有统计学意义 [(67.41±0.37)%比(64.77±0.33)%, (81.95±0.47)%比(75.26±0.41)%](P<0.05)。在伤后 6 h 致伤组、处理组 MDA含量明显增加, 并且一直维持在较高水平, 而 SOD活性则明显下降, 与对照组比较差异有统计学意义 (P<0.05)。处理组在伤后6 h MDA含量和 SOD活性与致伤组比较差异无统计学意义(P>0.05), 而在伤后24 h、48 h MDA 含量显著降低[(130.39±7.02) μmol/g 比(149.41±8.25) μmol/g, (125.41±6.59) μmol/g 比(157.72±8.93) μmol/g], SOD活性则明显增高[(88.46±7.17)U/g比(80.10±4.87)U/g, (97.31±7.89)U/g 比(84.29±6.13) U/g], 差异均有统计学意义 (P<0.05)。结论 17β雌二醇对创伤性脑损伤有保护作用。

摘要:目的 研究人参皂苷水解产物DS-1227(Dammarane Sapogenins-1227)对东莨菪碱致小鼠学习记忆障碍的改善作用, 为老年痴呆等疾病的药物研究提供科学数据。方法 将60只ICR小鼠随机分为空白对照组、模型组、阳性对照组、DS-1227低、中、高剂量组共6组, 每组10只。连续灌胃给药2周后, 检测自主活动, 第15天开始除空白对照组腹腔注射生理盐水, 其他各组均腹腔注射东莨菪碱(0.75 mg/kg), 阳性对照组在注射东莨菪碱5 min后另腹腔注射毒扁豆碱(0.3 mg/kg), 给药完成20 min后进行物体认知实验和Morris水迷宫实验检测动物的学习记忆能力。结果 DS-1227对小鼠的自主活动无显著性影响。腹腔注射东莨菪碱后, 小鼠的相对辨别指数降低, 水迷宫定位航行实验中d1、d2、d3、d4和d5潜伏期均明显延长。DS-1227低、中、高剂量和给予M受体激动剂毒扁豆碱均能不同程度增加东莨菪碱致学习记忆障碍模型小鼠的相对辨别指数, 缩短水迷宫定位航行潜伏期。结论 DS-1227有改善东莨菪碱致小鼠学习记忆障碍的作用。

摘要:目的 比较不同海拔地区两种小型猪高原多脏器功能障碍综合征(H-MODS)模型存在的差异, 探讨建立H-MODS模型的理想动物。方法 利用高原土生蕨麻小型猪与平原巴马小型猪, 以内毒素(LPS)建立H-MODS模型。检测不同时点血液生理生化指标的变化, 并观察肺脏组织病理学变化。结果 巴马小型猪模型的死亡率明显高于蕨麻小型猪;生理生化各指标的变化基本相同, 但蕨麻小型猪的变化较平缓。在24 h与48 h肺脏均出现严重病理改变, 但巴马小型猪较蕨麻小型猪更严重。结论 不同海拔地区的两种小型猪均可成功建立H-MODS模型, 同时蕨麻小型猪由于自身高原生物特性对H-MODS模型的复制更加准确安全, 避免高原环境的外在因素的影响。

摘要:目的 研究长期高脂饮食对长爪沙鼠生化及主要脏器组织病理学的影响。方法 48只长爪沙鼠随机分为模型组和正常组, 每组24只, 模型组予高脂饮食喂养, 正常组予基础饲料喂养, 两组分别于4周、8周及16周时各处理沙鼠8只, 比较两组体重、血糖(Glu)、甘油三酯(TG)、胆固醇(CHOL)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、尿酸(UA)、肌酐(CREA)、尿素氮(BUN)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬酸氨基转移酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、总胆红素(TBil)、淀粉酶(AMS)水平及主要脏器组织病理学的变化。结果 和正常组比较, 模型组沙鼠血脂明显升高, 肝功能受损, 血尿酸升高, 16周时血糖明显降低, AMS升高, 肾功能则无明显变化。肝组织逐渐出现脂肪变、炎症、肝纤维化及肝硬化, 并伴有脾大, 肺组织和心肌在后期均出现脂肪变性, 损伤明显, 胰岛增大伴内分泌细胞增多, 小肠和肾脏无明显变化。结论 高脂饮食喂养的沙鼠可复制良好的高脂血症、非酒精性脂肪性肝炎肝硬化模型, 并且有可能是高脂血症相关的高尿酸血症、肺损伤及心肌损伤等疾病的良好模型。

摘要:目的 观察加味二陈汤对ApoE^-/-小鼠血脂的影响。方法 44只ApoE^-/-小鼠以高脂饲喂养4周构建AS小鼠模型, 分别用辛伐他汀、加味二陈汤对小鼠灌胃给药, 8周后处死小鼠, 酶法检测血清血脂;每周称取并记录小鼠体重;油红O染色观察小鼠主动脉管腔内粥样斑块;HE染色观察小鼠主动脉管腔内粥样斑块沉积及肝细胞形态。结果 加味二陈汤可显著降低小鼠血清中TCHOL、LDL-C水平(P<0.01);各组小鼠体重均有所增加, 但模型组小鼠体重略高于空白对照组和加味二陈汤组;油红O染色结果显示加味二陈汤可显著减少ApoE^-/-小鼠主动脉管腔内粥样斑块的面积;小鼠主动脉HE染色示加味二陈汤组小鼠主动脉内有脂质沉积斑块较模型组明显减少;肝细胞切片HE染色发现加味二陈汤组小鼠肝细胞的病变程度较轻, 肝小叶结构较清晰。结论 加味二陈汤能有效降低ApoE^-/-小鼠血清中有关脂质的含量, 调节小鼠脂质代谢, 缓解动脉粥样硬化进程。

摘要:目的 探讨中药藤莓汤对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis, CIA)大鼠关节滑膜炎症指数、四肢肿胀程度、关节组织炎性浸润的改善情况, 以及免疫炎性相关因子影响。方法 建立CIA模型, 将造模成功的SD大鼠随机分为模型组、阳性药组、中药大、小剂量组, 设正常对照组, 每组6只, 干预治疗12周。每周使用游标卡尺测量四肢踝腕部前后径、左右径, 爪掌足垫厚度, 以及双后肢的跖关节肿胀最高点宽度, 评价其关节积分和四肢肿胀程度。结果 ①与正常组比较, 模型组大鼠关节炎总AI评分及双后肢AI评分显著增加(P<0.05或P<0.01);左前肢AI评分在10-12周时升高(P<0.05);左后肢前后径、左右径、足垫厚度及左后肢跖骨最高点测量值在1-12 w不同时间段增加(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较, 中药大、小剂量组总AI评分及左后肢关节AI评分在6 w后降低(P<0.05);阳性药组10-12 w时左前肢AI评分下降(P<0.05)。②与正常组比较, 模型组IL-6、TNF-α mRNA转录及蛋白表达水平显著上调(P<0.01)。与模型组比较, 阳性药组、中药大、小剂量组IL-6、TNF-α mRNA转录及蛋白表达水平显著下调(P<0.01)。③光镜检测结果显示:中药小剂量组明显改善了CIA模型大鼠关节滑膜增生、炎性细胞浸润情况。结论 中药藤莓汤改善CIA模型大鼠关节病理损伤的分子机制可能与其抑制滑膜组织免疫炎性因子高表达相关。

摘要:目的 通过观察复方中药救脑益智方剂水提液对人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞生长以及胰岛素信号通路的影响, 探讨其对神经细胞保护作用的机制。方法 体外培养SH-SY5Y细胞, 分为对照组(C组)、救脑益智1号方组和3号方组, 每组药物剂量分别为0.0625 mg/mL、0.125 mg/mL、0.25 mg/mL、0.5 mg/mL和1 mg/mL, 测定各组细胞的噻唑蓝(MTT)代谢率, 选定0.125 mg/mL进行细胞免疫荧光染色, 观察细胞形态和胰岛素受体底物-1(IRS-1)、cAMP反应元件结合蛋白(CREB)表达的变化。结果 与对照组相比, 救脑益智组MTT代谢率升高(P<0.05), 细胞形态好, 表现为细胞胞体饱满、贴壁良好、突起延长, IRS-1和CREB表达增加。结论 复方中药救脑益智水提液能促进神经细胞生长, 提高神经元胰岛素信号通路相关因子IRS-1和CREB表达, 推测其神经保护作用机制与胰岛素信号通路有关。

摘要:目的 分离并鉴定大鼠羊膜细胞, 探索羊膜细胞分化潜能, 为干细胞移植治疗探寻新的细胞来源。方法 机械分离羊膜组织并采用0.25%含EDTA的胰蛋白酶消化, 应用高糖-DMEM培养基(添加10 μg/L人表皮生长因子)培养, 采用流式细胞术检测间充质干细胞表面标志物, 通过细胞免疫荧光染色检测神经干细胞表面标记物。结果 大鼠羊膜组织可分离并培养, 细胞呈梭型, 贴壁生长, 短期内可以稳定增殖。细胞表达干细胞表面标记物八聚体结合转录因子4(octamer-binding transcription factor, Oct-4)和性别决定区Y框蛋白(sex determining region Y box 2, Sox-2), 间充质干细胞表面标志物vimentin, 胚胎干细胞标记物阶段特异性胚胎表面标记物(stage specific embryonic antigen-4, SSEA-4), 并表达神经干细胞表面标志物nestin, 可表达脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor, BDNF)和神经生长因子(nerve growth factor, NGF)。结论 大鼠羊膜细胞可表达间充质干细胞和神经干细胞标记物, 并有神经营养因子表达, 为大鼠羊膜细胞的研究和应用提供实验依据。

摘要:目的 建立食蟹猴脐带间充质干细胞的分离培养方法。方法 新鲜食蟹猴脐带剪碎为糊状, 用含10%胎牛血清的DMEM/F12培养液培养, 观察细胞形态特征, 流式细胞技术分析细胞抗原标志的表达, 并检测其体外多向分化潜能。结果 运用组织贴块法可以从新鲜脐带中分离到贴壁生长、阳性表达CD29、CD44、CD90的成纤维细胞样细胞。这些细胞在体外诱导培养后可分别检测到脂滴、骨和软骨细胞。结论 运用组织贴块培养法可用含10%胎牛血清的DMEM/F12培养液从食蟹猴脐带中分离到间充质干细胞。

摘要:酒精与脑缺血发生和预后都密切相关, 用不同动物模型研究酒精与脑缺血的关系得出的结果不尽相同。本文总结了目前常用的酒精干预脑缺血动物模型的制作方法, 并对模型的优缺点进行评价, 为酒精干预脑缺血研究中动物模型的选择提供参考。

摘要:联体共生(parabiosis)是医学实验中的一种造模方法, 此动物模型可很好的体现两只动物经联体手术后形成血液、体液交互, 达到共生目的, 观察联体动物之间从血液到免疫等各个层面对机体的影响。近几年联体实验在联体共生的基础上, 多采用异时共生(Heterochronic parabiosis)模型, 为肿瘤、内分泌、移植、神经病学、口腔科等领域的研究提供实验基础。

摘要:目的 基于国内外部分实验动物数据库和文献, 收集整理世界上现有的200多种共计26 000多个品系的实验动物数据, 建立关系型检索数据库, 使其成为世界上最大最全的实验动物品系数据库。方法 构建基于My SQL数据库软件的中小型数据库, 建立检索界面、录入界面和数据库接口。结果 本文建立了实验动物品系数据库, 已经收录小鼠品系数据21 596条;大鼠品系数据2062条;猴品系数据13条;地鼠品系数据2条;犬品系数据5条;兔品系数据5条。以后会逐步完善数据, 实现实验动物品系数据库的定期更新。讨论 该数据库的建立方便我国科研人员查阅和使用国内外实验动物品系资源, 为引进欧美日等发达国家的实验动物品系资源提供链接。

摘要:

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