• 2013年第23卷第9期文章目次
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    • Zmu-1:DHP豚鼠气道对组胺的敏感性与组胺H1受体表达量的相关性研究

      2013, 23(9):0-0.

      摘要 (1907) HTML (0) PDF 0.00 Byte (2220) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 研究Zmu-1:DHP豚鼠气道对组胺诱导产生的反应及气道组胺H1受体的表达量,阐明豚鼠气道敏感性与组胺H1受体数量的关系,为哮喘研究提供具有较高敏感性的速发型过敏的动物模型。方法 通过活体气管插管及雾化组胺气体吸入,测定豚鼠气道阻力和肺动态顺应性;采用离体气管片组胺滴定法,通过气管片收缩测定气管平滑肌对组胺的敏感性;采用同位素标记药物配位法,测定豚鼠气道组织组胺H1受体的密度及平衡解离常数。结果 当豚鼠吸入大于0.5mg/ml雾化组胺时,Zmu-1:DHP豚鼠气道阻力上升率和肺动态顺应性下降率与DHP豚鼠相比,其速度有增大趋势,但未达到显著水平 (P >0 0 5 );两个品系豚鼠雄性个体比雌性的敏感性显著增加(P <0.01)。当组胺浓度为10-5M和10-4M时,Zmu-1:DHP豚鼠气管片平滑肌的收缩率显著大于DHP豚鼠 (P <0.01-0.05 )。两个品系豚鼠气道组胺H1受体的密度及其平衡解离常数无显著差异(P >0 0 5 )。 结论 在一定的组胺浓度范围内,Zmu-1:DHP豚鼠气道平滑肌对组胺的敏感性大于DHP豚鼠,雄性豚鼠的敏感性大于雌性豚鼠。豚鼠气道对组胺的敏感性与其组胺H1受体数量未表现出显著的相关性,提示气道反应可能还受到平滑肌膜上其它受体和化学介质的作用。

    • 不同剂量鱼藤酮对拟帕金森病模型大鼠行为学及纹状体多巴胺

      2013, 23(9):0-0.

      摘要 (2139) HTML (0) PDF 0.00 Byte (2615) 评论 (0) 收藏

      摘要:【摘要】 目的 观察不同剂量鱼藤酮皮下注射对大鼠行为学及脑纹状体多巴胺含量的影响,探讨鱼藤酮拟帕金森病大鼠模型的适宜造模条件。方法 Lewis大鼠分别给予鱼藤酮不同剂量(1.0、1.5和2.0 mg/kg/d)皮下注射共28d。应用旷场实验和斜板实验分别测定大鼠的运动功能和协调性,高效液相色谱-电化学法检测大鼠纹状体内多巴胺含量。结果 模型组大鼠存活率随鱼藤酮注射剂量的升高呈逐渐下降趋势。鱼藤酮2.0 mg/kg组大鼠体重最先明显降低,随着注射时间的延长,各模型组大鼠均出现显著的体重降低。旷场实验结果显示,各剂量鱼藤酮组大鼠跨格次数和站立次数均明显下降。斜板实验结果显示,鱼藤酮1.5 mg/kg组大鼠在斜板的停留角度较对照组显著减小。鱼藤酮1.5 mg/kg组大鼠脑纹状体内多巴胺含量显著降低。结论 鱼藤酮1.5 mg/kg皮下注射28d,大鼠出现明显的运动功能障碍和脑内多巴胺含量减少,而死亡率相对较低,因此是建立帕金森病大鼠模型的适宜剂量。

    • 动物心肌挫伤模型的研究进展

      2013, 23(9):0-0.

      摘要 (1563) HTML (0) PDF 0.00 Byte (1608) 评论 (0) 收藏

      摘要:心肌挫伤实验动物模型在研究人类心肌挫伤的发病机制及治疗等方面起着非常重要的作用,根据制备方法和研究目的的不同,可分为开放性及非开放性,每种实验模型都有各自的特点和应用条件。

    • 宁乡花猪原代和第一代血液生理生化指标比较

      2013, 23(9):0-0.

      摘要 (2481) HTML (0) PDF 0.00 Byte (2756) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 比较原代宁乡花猪与其第一代仔猪血液生理生化指标的变化。方法 常规方法测定宁乡花猪F0代16头,F1代16头血液18项生理指标和13项生化指标。结果 F0代与F1代部分血液生理指标如白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、红细胞积压(HCT)等13项有显著性差异(P< 0.05);部分血液生化指标如总胆红素(TBIL),尿素氮(BUN),总蛋白(TP),白/球蛋白(ALB/GLB),葡萄糖(GLU),有显著性差异(P< 0.05);其他指标均无统计学差异。结论 2代宁乡花猪之间部分血液生理生化指标有显著性差异。宁乡花猪可培育成标准化实验动物。

    • 皮肤光损伤肿瘤模型的建立

      2013, 23(9):0-0.

      摘要 (1559) HTML (0) PDF 0.00 Byte (2637) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 模拟人皮肤肿瘤形成的自然环境因素,建立光损伤小鼠皮肤肿瘤模型。方法 采用完全随机的两因素析因设计。选择对光线敏感的BALB/c小鼠,背部皮肤脱毛后UVC照射(56 mJ/cm2),隔天1次,8周结束;二甲基苯蒽/丙酮液(100μg/200μl)外涂,每周1次,共7周,12周后处死。连续测量并记录小鼠背部肿瘤数量和直径, 描绘时间-荷瘤数动态变化图;皮肤组织病理学观察肿瘤形成的组织细胞形态学改变。结果 单纯UVC照射组无肿瘤出现;UVC+DMBA模型组小鼠6周后背部开始出现肉眼可见的瘤体,第9周荷瘤率达到100%, 11、12周荷瘤数渐趋稳定,肿瘤体积有增大趋势,平均荷瘤数为(4.57±3.0)个,肿瘤平均体积为(44.91±4.6)mm3。而单纯DMBA组荷瘤数第8.5周达高峰,后呈下降趋势,肿瘤自然消退率高,数量不稳定。HE染色、瑞氏染色、基底膜带染色均显示为早期皮肤鳞状细胞癌。结论 DMBA是皮肤肿瘤建模的主要因素,但停止该处理因素后荷瘤数量呈下降趋势,UVC作为一个独立因素,在12周内未能诱导出皮肤肿瘤,但UVC与DMBA联合应用具有交互协同作用,可较快速地建立皮肤肿瘤模型。该模型具有出瘤率高,出瘤整齐,荷瘤量多,除去处理因素后瘤体数量依旧稳定,且体积有增大趋势等特点,为皮肤肿瘤的防治研究提供有价值的实验工具。

    • 两种核酸提取方法对小鼠诺如病毒RNA提取效能的比较

      2013, 23(9):0-0.

      摘要 (1969) HTML (0) PDF 0.00 Byte (2836) 评论 (0) 收藏

      摘要:【摘要】目的 比较两种核酸提取方法对小鼠诺如病毒RNA提取效能。方法 用Trizol提取法和 QIAamp Viral RNA Mini Kit提取法分别提取感染MNV的小鼠小肠组织样品RNA和细胞培养物 RNA,测定RNA浓度;用MNV特异的引物对分离的核酸样品进行一步法RT-PCR扩增。结果 Trizol提取法提取小肠组织的RNA浓度高于QIAamp Viral RNA Mini Kit提取法;QIAamp Viral RNA Mini Kit提取得到的细胞培养物RNA浓度高于Trizol提取法。经QIAamp Viral RNA Mini Kit提取的两种核酸样品均能扩增出特异条带,而Trizol提取的核酸样品未见特异条带。结论 在MNV的检测中,QIAamp Viral RNA Kit更适合组织样品中MNV病毒核酸的提取。

    • 压力应激动物模型在肿瘤中的应用和研究现状

      2013, 23(9):0-0.

      摘要 (2175) HTML (0) PDF 0.00 Byte (2907) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的: 就各类压力应激荷瘤动物模型的造模方法进行综述,对其特点进行评述,并分析了压力应激在肿瘤发生发展中的作用机制。方法: 应用计算机检索PubMed 数据库(2000/2013),以“stress,animal model,tumor”为检索词;检索中国知识资源总库(2000-2013)、重庆维普数据库(2000-2013)、万方数据库(2000-2013)三大中文期刊数据库,以“应激,动物模型,肿瘤”为检索词。文章所述内容需与应激动物模型的建立、应用、评价,及压力应激与肿瘤的关系等方面研究密切相关,排除重复性研究。结果: 共收集596 篇关于应激动物模型的文献,中文156 篇,英文440 篇。阅读标题和摘要进行初筛,排除发表时间较早、重复及类似的研究,纳入30 篇符合标准的文献。结论: 压力应激与肿瘤研究领域为进一步从抗焦虑、抑郁等角度筛选抗肿瘤药物提供参考。

    • Wnt信号通路及相关神经因子对神经再生的影响

      2013, 23(9):0-0.

      摘要 (1790) HTML (0) PDF 0.00 Byte (3423) 评论 (0) 收藏

      摘要:脑缺血可造成神经元损伤,影响神经功能。有关神经因子可诱导神经干细胞在一定条件下增殖分化成新的神经细胞,这些新的细胞在缺血性脑损伤后参与神经功能的修复。本文简单介绍了Wnt信号通路中相关蛋白的作用机制和Wnt信号通路对神经再生的影响,以及神经源性因子和促神经发生相关因子对于神经发生的影响。

    • 剂量精确的大鼠无创气管滴注方法

      2013, 23(9):0-0.

      摘要 (2125) HTML (0) PDF 0.00 Byte (3514) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 建立一种滴注剂量精确的大鼠无创气管滴注方法。方法 选用一次性使用静脉输液针的胶管制作套管,透射光插管法行大鼠气管插管,微量进样器平头针经由套管插入气管进行滴注。滴注液体为生理盐水,滴注剂量5~200μl,精确度为1μl。结果 在体重200克~350克的10只大鼠上共完成50次气管滴注操作,实验过程中和实验之后大鼠均无异常表现。结论 套管微量进样器法具有无创、精确、安全的特点,可广泛应用于大鼠经气管给药或染毒的各类研究。

    • 应用微卫星标DNA记对三个封闭群兔遗传分析

      2013, 23(9):0-0.

      摘要 (1570) HTML (0) PDF 0.00 Byte (2433) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 检测国内日本大耳白兔、青紫蓝兔、新西兰白兔的遗传背景及遗传结构,为封闭群兔遗传检测方法建立和标准化提供基础资料。方法 应用18个微卫星标记及荧光标记-半自动基因分型技术对三个群体95个个体进行Hardy-Weinberg检测,统计每个位点等位基因频率、杂合度、F值、遗传距离等信息。结果 三个种群平均等位基因观测数为3.167、4.556、3.444,平均观测杂合度为0.444、0.5230、0.4976。18个位点平均多态信息含量(PIC)为0.410、0.549、0.470,日本大耳白兔6个位点HWE检验P﹤0.05,显著偏离Hardy-Weinberg平衡,并在Sat13,INRCCDDV0088位点基因型完全纯和,新西兰白兔和青紫蓝兔分别有2个位点显著偏离Hardy-Weinberg平衡。三个种群遗传距离:青紫蓝兔与新西兰白兔遗传距离最近,为0.124,与日本大耳白兔遗传关系最远,为0.320;新西兰白兔与日本大耳白兔较远,为0.310。结论 三个种群有各自不同遗传特征,遗传多样性较高,种群间分化明显。个别位点偏离遗传平衡,推测人工繁育过程中存在一定问题。

    • 碘甲烷对大鼠肝脏合成功能影响的研究

      2013, 23(9):0-0.

      摘要 (2017) HTML (0) PDF 0.00 Byte (2189) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 研究碘甲烷对大鼠肝脏合成功能的影响。方法 将24只雄性SD大鼠随机分成4组,放入静式染毒罐中,实验组分别给予浓度为650mg/m3、260mg/m3、130mg/m3的碘甲烷,每天吸入染毒4小时,连续染毒一周,对照组给予相同环境条件不染毒。染毒结束后对血清总蛋白(TP)、血清白蛋白(ALB)、血清球蛋白(GLO)和血清胆碱酯酶(CHE)进行测定。结果 随着碘甲烷浓度的升高,大鼠TP含量逐渐降低,高、中、低剂量组与对照组存在统计学差异,且高剂量组与中、低剂量组也存在统计学差异。ALB浓度随着碘甲烷浓度的升高逐渐降低,高、中、低剂量组与对照组存在统计学差异,且高剂量组与中、低剂量组也存在统计学差异。GLO含量随着碘甲烷浓度升高变化不大,各组间差异无统计学意义。CHE活力随着碘甲烷浓度升高逐渐降低,各组之间差异均有统计学意义。结论 碘甲烷暴露对大鼠的肝脏合成功能有损害作用。

    • 绿色荧光裸鼠血液生理生化指标检测分析

      2013, 23(9):0-0.

      摘要 (2366) HTML (0) PDF 0.00 Byte (3087) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:目的:检测绿色荧光蛋白(Green Fluorescence Protein,简称GFP)转基因裸鼠血液生理生化指标,为将来的研究提供基础参考值。 方法:实验选用6~8周GFP转基因裸鼠及对照组BABL/C裸鼠雌雄各30只,取血测定血生化和血常规指标。 结果:①GFP转基因裸鼠与对照组BABL/C裸鼠比较,白细胞总数(WBC)、尿素(URE)、平均血红蛋浓度(MCHC)、葡萄糖(GLU)差异极显著(P <0.01);血红蛋白(HGB)、红细胞分布宽度(RDW)、血小板计数(PLT)、尿酸(UA)差异显著(P <0.05),其它指标差异不显著。②GFP转基因裸鼠雌雄间比较,红细胞分布宽度(RDW)、平均血红蛋白含量(MCH)、平均血红蛋浓度(MCHC)、血小板计数(PLT)、球蛋白(G)、胆固醇(TC)、HDL-胆固醇(HDL-TC)差异极显著(P <0.01),白蛋白(ALB)、葡萄糖(GLU)差异显著( P <0.05),其它指标差异不显著。 结论:转基因GFP转基因裸鼠的生理生化指标值在雄雌间有一定的差异,为相关的生物医学研究提供了基础数据。

    • 正常小鼠冠状动脉的超声成像技术分析

      2013, 23(9):0-0.

      摘要 (1747) HTML (0) PDF 0.00 Byte (3192) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 探讨利用高频小动物心脏超声对C57BL/6小鼠冠状动脉进行评价的可行性,为小鼠冠状动脉相关疾病动物模型的制备及其功能评价提供依据。 方法 采用Vevo 770型高分辨小动物超声仪,频率30mHz的宽频探头,对20只健康C57BL/6小鼠于4、8和12周龄时冠状动脉的情况进行观察。测定和分析不同周龄小鼠冠状动脉内径值的变化。 结果 全部20只小鼠超声均成功检测到冠状动脉。超声心动图显示小鼠4周龄时左冠状动脉主干内径检测值为0.36?.02(mm),右冠状动脉主干内径值为0.29?.03(mm);8周龄时左冠状动脉主干内径值为0.38?.06(mm),右冠状动脉主干内径值为0.37?.02(mm);12周龄时左冠状动脉主干内径值为0.38?.02(mm),右冠状动脉主干内径值为0.39?.03(mm)。 结论 利用高频小动物心脏超声可获取正常小鼠清晰的冠状动脉图像,并能准确反映小鼠冠状动脉内径值动态变化。为小鼠冠状动脉疾病模型的制备及其功能评价提供依据。

    • MTA1转基因小鼠的构建及鉴定

      2013, 23(9):0-0.

      摘要 (1561) HTML (0) PDF 0.00 Byte (2555) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 将人的MTA1外源基因整合到C57BL/6J小鼠中,构建稳定高表达MTA1的小鼠模型。方法 通过RT-PCR方法克隆人的MTA1基因,将MTA1插入真核表达载体pcDNA3.1构建pcDNA3.1-MTA1载体,回收片段后利用显微注射技术将连接目的基因片段注入到受精卵的雄原核中,使用MTA1特异性的引物经PCR鉴定出基因型阳性的转基因小鼠,再利用Western-blot 及免疫组化方法检测MTA1在转基因小鼠全身表达情况。结果 成功构建了MTA1转基因注射片段。在320枚显微注射受精卵中挑选出300枚存活卵移植到10只ICR小鼠假孕受体的输卵管中,10只ICR小鼠均怀孕,移植成功率为100%,共生出子代鼠80只,经PCR检测其中共有9只整合了MTA1基因,整合率为11.25%。经PCR鉴定MTA1整合阳性的F1代小鼠,再经Western-blot和免疫组化分析检测MTA1表达水平在脑、肺、肝、肠等组织中表达明显增高,肾、骨骼肌表达无差异。结论 成功构建了脑、肝、肺、结肠高表达MTA1的转基因小鼠,为进一步MTA1研究奠定了良好的研究模型。

    • 猴免疫缺陷病毒(SIV)实时荧光定量PCR检测方法的建立

      2013, 23(9):0-0.

      摘要 (2697) HTML (0) PDF 0.00 Byte (3226) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 建立快速、敏感、特异的猴免疫缺陷病毒(SIV) taqman 探针实时荧光定量PCR检测方法,对SIV病毒核酸进行定量检测。方法 RT-PCR扩增SIVmac251保守gag基因序列796片段,进行TA克隆,构建标准品质粒pMD-SIVgag。通过对SIV定量外标准品的定量分析, 优化反应体系,检测TaqMan探针实时荧光定量PCR方法的灵敏度、特异性和重复性。结果 所建立的SIV QPCR检测方法,质粒DNA模板在107-102copies之间表现较好线性和相关性,标准曲线所得斜率为-3.26,相关系数为0.999。检测灵敏度达到200copies/well,方法重复性测试,检测25份样品CV%均小于1%。结论 建立的SIV QPCR检测方法特异性、敏感性高,稳定性好,可用于定量测定猴免疫缺陷病毒(SIV)核酸拷贝量。

    • 人脐带间充质干细胞静脉输注小鼠的安全性

      2013, 23(9):0-0.

      摘要 (3114) HTML (0) PDF 0.00 Byte (5464) 评论 (0) 收藏

      摘要:[摘要]目的 探讨C57/BL6J小鼠重复多次尾静脉输注人脐带间充质干细胞后的免疫反应和毒性。方法 将SPF级别的32只C57/BL6J小鼠随机分为阴性对照组、细胞移植组,每组16 只,雌雄各半,细胞移植组小鼠尾静脉注射分离培养的第5代人脐带间充质干细胞,一次5?06/只,每周注射一次,连续注射4周;阴性对照组每次注射相同容积的PBS。注射后后观察小鼠的一般症状,末次注射后1周、4周进行血细胞计数、血生化、免疫反应指标、脏器质量测定和组织病理学检查。结果 细胞移植组小鼠血细胞计数、血生化、脏器重量和脏器系数与对照组无显著性差异(P > 0.05),脏器组织病理学在光镜下检查结果与对照组无形态学差别,以及免疫结果测定(T细胞亚群CD3 、CD4 、CD8 及CD4 /CD8 )与对照组无显著性差异( P> 0.05),较对照组有显著性差异(P?0.01)。 结论 人脐带间充质干细胞重复多次尾静脉输注C57/BL6J小鼠是安全可行的,对受者无明显免疫反应和毒副作用。

    • 家兔关节腔中微透析探针植入方法的建立及应用

      2013, 23(9):0-0.

      摘要 (1676) HTML (0) PDF 0.00 Byte (2776) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:目的 建立家兔关节腔中微透析探针的植入方法,并考察其应用于家兔膝关节局部药动学研究中的可行性。方法 将微透析探针在注射针头、引导导管的帮助下从家兔膝关节髌韧带一侧插入关节腔中,并用X-射线检查探针活性透析膜在关节腔中的位置。以青藤碱为研究药物,HPLC-MS为检测方法同时进行了家兔血液及关节腔局部青藤碱的药动学研究。结果 微透析探针活性透析膜能准确地进入关节腔的腔隙中,并成功应用于关节局部药动学研究,得到主要药动学参数。结论 家兔关节腔中微透析探针植入方法可行,位置准确,应用于关节局部药动学研究中有明显的优势。

    • 卡托普利对实验性2型糖尿病心肌病大鼠模型心脏保护作用研究

      2013, 23(9):0-0.

      摘要 (1829) HTML (0) PDF 0.00 Byte (4538) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 研究卡托普利对实验性2型糖尿病心肌病(T2DC)模型动物心脏保护作用和可能机制。方法 以高糖脂饲料负荷30 mg/kg剂量链脲佐菌素一次性腹腔注射建立T2DC大鼠模型,观察卡托普利45 mg/kg灌胃给药6周对模型动物血糖和血脂水平,心脏功能和结构变化,心肌脂肪酸含量以及心肌组织过氧化物增殖体激活受体α(PPAR α)和葡萄糖转运体4(GLUT4)基因表达等指标的影响。结果 与T2DC大鼠模型比较,卡托普利给药后,左心室收缩压、左心室最大收缩速率、左心室最大舒张速率的绝对值和心输出量分别显著增加15%、77%、52%和54%(P <0.05或P <0.01);室间隔厚度降低40%(P <0.001);血浆糖化血红蛋白和心肌组织游离脂肪酸含量分别降低31%和24%(P <0.01,P <0.05);心肌组织PPAR α基因表达显著降低(P <0.05),GLUT4基因表达显著增加(P <0.05)。结论 卡托普利可以显著改善T2DC模型动物心脏功能、抑制心室重构,其作用机理可能同调节与能量代谢相关基因表达、减轻心脏内脂肪积聚有关。

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