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杨葳 , 郑志红 , 姜淼 , 李兆阳 , 王惟 , 王禄增
2008(7).
摘要:目的建立TNNI2突变转基因小鼠模型。方法构建pEGFP-tnni2转基因构件,TNNI2基因的第175个氨基酸缺失,通过原核显微注射法。把线性化、纯化后的外源基因pEGFP-tnni2注射入BDF1小鼠受精卵中。胚胎移植给同期发情的假孕受体母鼠,获得子代小鼠。用PCR和Southern方法检测子代鼠尾DNA鉴定基因型。通过RT-PCR方法检测tnni2基因表达。结果移植注射胚胎115枚给4只假孕小鼠共出生了23只后代鼠。经PCR和Southern方法检测得到4只阳性小鼠。对其子代进行RT-PCR检测,tnni2基因在肌肉、心脏内表达。结论通过显微注射法使外源基因pEGFP-tnni2(TNNI2基因的第175个氨基酸缺失)在小鼠基因组中得到整合,建立了转pEGFP-tnni2的转基因小鼠模型。
张鸿波 , 许海涛 , 赵俊金 , 范蕊 , 芦天罡 , 刘云海 , 倪和民
2008(7).
摘要:目的从孕激素受体(PR)的角度探讨同期发情处理与自然发情小鼠的子宫内膜上,孕激素受体分布是否受内源孕激素的特异诱导而变化,两者之间是否存在差异。方法27只同日龄母鼠,根据处理方式的不同随机分为三个组:自然发情假孕组(对照组)、同期发情处理假孕组和自然发情假孕第l天摘除卵巢组,3个组的小鼠在见栓后第4、6、8天分别取样后,采用免疫组织化学法观察小鼠子宫内膜中孕激素受体的分布情况。结果免疫组化结果显示,三个处理组小鼠子宫内膜的三种细胞中都有PR存在;见栓第4天时,同期发情处理组小鼠子宫腺上皮细胞和基质细胞的PR胞核阳性率显著高于自然发情组(P〈0.05);见栓第6天时,同期发情处理组小鼠子宫内膜三种细胞中的PR胞核阳性率显著高于自然发情组(P〈0.05);同时自然发情假孕第1天摘除卵巢组在见栓第6和8天时的阳性率均显著低于其它两组(P〈0.05)。结论同期发情处理的小鼠子宫内膜中孕激素受体分布显著高于自然发情小鼠,且两者都受其内源性孕激素的特异诱导而变化。
2008(7).
摘要:目的比较高脂喂养的apoE基因敲除小鼠主动脉窦部和头臂动脉粥样硬化斑块的病理组织学状况。方法选取6周龄雄性纯合子aopE基因敲除小鼠30只,均予以西方饮食喂养,分别在30周龄、42周龄、54周龄、66周龄、78周龄时,随机各取6只,取主动脉窦和头臂动脉做病理检测。酶法检测血脂情况,冰冻切片光镜下观察主动脉窦部和无名动脉粥样硬化斑块病理情况,von kossa染色观察斑块钙化情况。结果高脂喂养可使apoE基因敲除小鼠迅速形成广泛且典型的动脉粥样硬化斑块,随时间进展,斑块体积逐渐增加,钙化逐渐加重;头臂动脉斑块出现较主动脉窦早且更加明显,斑块内包埋纤维帽,在主动脉窦斑块未见,但斑块钙化以主动脉窦部斑块最显著。结论高脂喂养apoE基因敲除小鼠是较为理想的动脉粥样硬化动物模型,头臂动脉是观察斑块不稳定的较为理想的窗口,而研究比较稳定斑块钙化,主动脉窦部更为理想。
2008(7).
摘要:目的探讨conA引起免疫性肝损伤机实验条件。方法测定两个浓度,不同时间点ConA尾静脉注射后小鼠转氨酶水平及肝、脾病理变化。结果15mg/kgConA尾静脉注射后8h,血清转氨酶升高,但病检无明显改变;20mg/kgConA尾静脉注射,脾指数6h达峰值,10h肝脏病理变化显著,转氨酶水平达峰值。结论20mg/kgConA小鼠尾静脉注射6h后脾病变达高峰,10h可引起显著性肝损害。
2008(7).
摘要:目的构建致病性结核分枝杆菌早期分泌性抗原靶(Early secretary antigenic target,ESAT-6)基因的pET原核表达载体,诱导表达并初步鉴定该蛋白。方法设计特异性引物,用PCR方法从结核分枝杆菌标准株H37Rv基因组中扩增ESAT-6基因,产物通过双酶切克隆入pET-32a(+)质粒,经PCR、酶切、测序等方法鉴定后,转入大肠杆菌B121菌体中IPTG诱导表达,并经镍柱纯化、Western.blotting鉴定。结果所获得ESAT-6基因序列与GenBank公布的完全一致;表达融合蛋白相对分子质量约2.5Xlo',并能与特异性单抗结合,具有一定免疫学活性。结论成功表达纯化并鉴定构建了ESAT-6融合蛋白。
曹振 , 秦亚曼 , 邓小雨 , 遇秀玲 , 陈西钊 , 田克恭
2008(7).
摘要:目的制备传染性犬肝炎病毒单克隆抗体。方法将用纯化的犬腺病毒1型(CAV-1)免疫的BALB/c小鼠脾细胞与SP2/0细胞在聚乙二醇作用下融合,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫酶试验(1EA)筛选,以有限稀释法克隆3次,制备单克隆抗体,并对制备完成的单克隆抗体进行生物学鉴定。结果成功得到2株能稳定分泌抗CAV-1的单克隆抗体杂交瘤细胞,命名为1B、2H3,经鉴定其亚型分别为IgG2a和IgG2a,2株均为kappa链。腹水的ELISA效价可达10^7-10^8,IEA效价可达1:2560—1:5120。该单克隆抗体与CPV、CDV、FPV、CCV病毒无交叉反应。结论成功制备了抗CAV-1单克隆抗体,为进一步建立相关诊断方法奠定了基础。
吴晓燕 , 王冬平 , 贺栎 , 尚世臣 , 孙岩松 , 李桂军 , 凡秀
2008(7).
摘要:目的建立不同日龄SPF级Wistar大鼠血液生化参考值。方法采用全自动生化测定仪对20、30、40、50日龄SPF级Wistar大鼠的血液27项生化指标进行测定,并进行统计分析和差异显著性检验。结果建立了20、30、40、50日龄SPF级Wistar大鼠27项生化参考值,20、30日龄SPF级Wistar大鼠雌雄之间部分指标差异显著,40、50日龄SPF级Wistar大鼠雌雄之间差异显著占一半以上,不同日龄之间各项指标存在一定的差异,并且变化规律不同。SPF级Wistar大鼠不同日龄的ALT、ALB、CREA、AG、TP、GLB、ALP、TG、MG随日龄升高而升高;P04、AST/ALT、BUN、URIC、BUN/CREA、CK、LD、CHOL、CL、OSM随日龄升高而降低,AST、CA差异不显著。结论SPF级Wistar40日龄以上的大鼠血液生化指标易受性别、年龄等的影响,SPF级Wistar大鼠血液生化指标的一致性较好。
2008(7).
摘要:目的观察绞股篮和高脂血症对成年雄性兔睾丸显微结构的影响。方法40只日本雄性大耳白兔随机分为A组、C组、D组、E组,分别喂饲高脂饲料+绞股蓝5g,kg、高脂饲料、标准饲料+绞股篮5g/kg、标准饲料。饲养前和饲养后3周、6周、9周末检测三酰甘油(TG)、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)。实验结束观察睾丸显微结构。结果①TG、TC、LDL-C、HDL-C:A组、C组随饲养时间延长,TG、TC、LDL-C渐升,与饲养前比较有显著差异(P〈0.05),A组HDL-C渐升,与饲养前比较有显著性差异(P〈0.01);饲养后A组TG、TC、LDL-C低于c组,A组HDL-C高于C组,饲养后组间比较有显著差异(P〈0.05)。②光镜检查:A组、D组、E组生精细胞正常;C组睾丸生精细胞脂肪变性,间质纤维化,基底膜增厚,精子细胞数量下降。结论高脂血症导致睾丸生精细胞脂肪样变,精子细胞数量下降。绞股蓝通过降低血脂、改善血脂代谢,对高脂血症导致的睾丸生精细胞脂肪样变具有抑制作用。绞股篮对标准饲料饲养兔睾丸显微结构无影响。
2008(7).
摘要:目的建立一种简便、快速、敏感、特异的适用于支气管败血波氏杆菌的PCR检测方法。方法根据兔支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica)的fim2基因序列设计了一对特异性引物,进行PCR扩增、特异性和敏感性试验,并将其应用于临床样品的检测。结果利用该PCR方法扩增出425bp的目的基因片段,该产物序列与GeneBank上公布的基因序列同源性为100%。特异性试验表明,该方法对大肠埃希氏菌、多杀性巴氏杆菌、魏氏梭菌和金黄色葡萄球菌均无交叉性反应;并且最小可检出菌液浓度为3.6CPU。用该PCR方法检测了从江苏、山东等地采集的146份兔鼻拭子,结果检出支气管败血波氏杆菌阳性92例,阳性率为63.01%。结论建立了快速检测支气管败血波氏杆菌的PCR方法。
2008(7).
摘要:目的探讨屏障系统内安放独立通气笼盒(Individually Ventilated Cages,IVC)双保险模式饲养实验啮齿类动物,力求动物饲养、实验的全过程达到SPF级;降低动物实验室硬件建造费和维持费(节能)。方法通过改建一间屏障环境动物实验室,对空气洁净度等相关项目数据按GB14925-2001方法检定,并在该实验室内安放SPC级IVC饲养动物;在超净工作台内做打针投药等动物实验。结果改建的屏障环境动物实验室和IVC,各项检测数据均达到新国标要求。结论医学实验动物屏障环境内安放IVC饲养啮齿类动物、做动物实验,这种双保险模式能全过程达到SPF级要求;饲养、实验人员操作较简便,节能。
2008(7).
摘要:帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是一种常见于中老年的神经退行性疾病,其特征性的病理改变为黑质纹状体多巴胺能神经元选择性缺失以及胞浆内涵物Lewy小体的形成。PD的发病机制目前尚不清楚,但已经明确环境因素和遗传因素在PD的发病中起重要作用。为阐明PD的病理生理机制,进一步探索新的治疗手段,迫切需要与PD密切相似的模型。本文将就目前发展的各种PD模型做一综述。
2008(7).
摘要:高血压是多基因遗传和多个环境因素相互作用的结果,盐的摄入在高血压的形成中起着关键的作用。本文就感觉神经损伤、Dah 1种、醋酸脱氧皮质酮和部分肾切除等方法建立的盐敏感性高血压大鼠模型的特点及其病理生理学变化作一综述,为进一步研究盐敏感性高血压发病的机制提供依据。
2008(7).
摘要:动物实验人员的素质是决定医院动物实验工作质量的重要因素.但通常被忽视。随着动物实验标准化进程的不断推进,提高动物实验工作人员的素质、增强专业技能就显得尤为重要。本文结合我院实践主要阐述综合性医院动物实验工作的特点、对动物实验工作人员基本素质的要求以及培养和提高的途径。
2008(7).
摘要:科研工作的最后环节就是撰写科研论文,这是科研成果产出和学术交流的主要形式。虽然创新性和原创性是决定论文质量的重要因素,但属于语言和写作方面的原因而退稿的也占相当比例。据有关资料分析:属于实质性内容的原因而退稿占60%~70%;而属于语言和写作方面的原因退稿占30%.40%。为此,应本刊读者要求,我刊编辑查阅大量规范文献资料,就论文的写作规范、写作中常见问题、如何写作并发表高水平的科研论文及常见稿件被拒原因及解决办法、科研论文中统计学基本知识等内容刊出系列文章,希望对读者大有裨益。
2008(7).
摘要:2008年4月26日下午,在北京世纪远洋宾馆,中国实验动物学会的二级学会——中医药实验动物专业委员会举行了隆重的成立大会。中国实验动物学会副理事长兼秘书长、中国医学科学院实验动物研究所所长秦川教授主持了会议,国家卫生部科技司、国家中医药管理局科技司的领导及部分在京实验动物学界专家等近20人到会表示祝贺,并发表了热情洋溢的祝贺辞。秦川教授代表中国实验动物学会给专业委员会授牌,为各位委员颁发了聘书。