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2006(8).
摘要:
姜扬文 , 钱莉 , 刘伟 , 蒋桂花 , 龚卫娟 , 季明春
2006(8):449-453,F0002.
摘要:目的建立稳定表达bcr-abl融合基因的、可移植的小鼠肿瘤细胞系,解决慢性粒细胞白血病疫苗研究的瓶颈问题。方法从重组克隆载体pGEMbcr-abl中酶切出bcr-abl融合基因片段,并将其亚克隆进反转录病毒载体pLXSN中。脂质体介导重组反转录病毒载体pLXSNbcr-abl转染包装细胞PT67,G418筛选后获得稳定产病毒的包装细胞。收集病毒感染NIH/3T3细胞,加G418筛选后进行反转录病毒滴度测定,计算病毒效价为2×107CFU/mL。收集病毒上清感染SP2/0细胞(H-2d),经G418筛选获得稳定表达bcr-abl融合基因片段的SP2/0细胞株。然后用SP2/0/bcr-abl细胞攻击同品系BALB/c小鼠,观察SP2/0/bcr-abl移植瘤生长的情况。结果经特异性PCR扩增和RT-PCR反应扩增,从基因组整合和基因表达水平证实获得了能稳定表达bcr-abl融合基因片段的鼠SP2/0细胞系。SP2/0/bcr-abl细胞能够在同品系小鼠体内形成移植肿瘤。结论该表达bcr-abl融合基因片段的小鼠肿瘤细胞系将作为研究bcr-abl基因疫苗的有效实验工具,为检验bcr-abl基因疫苗激发的小鼠CTL应答研究奠定物质基础。
2006(8):454-458.
摘要:目的通过动态监测大鼠异体异位心脏移植外周血(PB)中穿孔素(pedorin,P)和颗粒酶B(granryme B,OB)的表达水平,判断其与急性排斥反应的相关性。方法实验组(n=16),供受体分别为Wistar和SD大鼠;对照组(n=17),供受体均为SD大鼠,两组术后均未接受抗排斥治疗。于术前及术后不同的时间采血,同时进行活组织病理检查,应用荧光定量RT-PCR(FQ-PCR)的方法,测定P及GBmRNA的表达水平,并与同期的病理检查结果相对照。结果实验组于移植后24hP及GBmRNA的表达上调,术后72h的表达明显增加(P〈0.001),术后3—5d达峰值,7—11d维持高水平,其变化早于病理改变;而对照组P及GBmRNA的表达及病理改变,在同期的观察过程中均没有明显的变化(P〉0.05)。结论同种异体大鼠心脏移植的急性排斥反应过程中,外周血淋巴细胞的穿孔素与颗粒酶BmRNA的表达水平术后呈现递增性,早于病理改变,可以作为急性排斥反应的监测指标。
2006(8):459-462.
摘要:目的测定不同周龄和超排前后雌性Fmrl基因敲除FVB小鼠和背景FVB小鼠血清生殖激素雌二醇(R)、孕酮(P)、促黄体生成激素(LH)和促卵泡生成激素(FSH)含量,比较不同周龄和不同状态下敲除基因动物的血清性激素水平,研究敲除基因对动物的发育和生殖生理等方面的影响。方法用放射免疫分析法测定上述动物不同周龄和超排前后血清E2、P、LH和FSH的含量,测定Fmrl基因敲除小鼠不同周龄时的超排卵数,进行统计学分析。结果6周龄的雌性Fmrl基因敲除小鼠与FVB小鼠比较,LH、FSH值差异无显著性(P〉0.05),E2的P值差异有显著性(P〈0.05)。lO周龄的两组动物间血清生殖激素水平和超排卵数均差异无显著性(P〉0.05)。lO周龄Fmrl基因敲除小鼠的超排卵数与6周龄动物比较差异有显著性(P〈0.05)。结论敲除Fmrl基因对动物雌性激素的分泌有影响,该基因与动物的生殖生理有一定的关联。
2006(8):462-462,465,471.
摘要:实验动物科技包括科学与技术两个方面,实验动物学是以实验动物为对象,专门研究实验动物的遗传育种、饲养繁殖、质量监测和开发应用的科学,这是一门多学科、综合性新兴边缘学科;而实验动物技术则是实验动物学形成与发展的方法学或手段。两者相辅相存,互为依托,是密不可分的一个整体。日本实验动物科技经过几十年的稳定发展,在世界上已经取得了重要的地位,对亚太地区。尤其对我国实验动物科技的发展具有较深刻的影响。笔者于2006年5月10—18日随中国实验动物学会代表团赴日参加了在神户召开的日本第53届实验动物学会年会,并考察了日本东京大学医科院、庆应义大学、实验动物中央研究所、国立感染性研究所、日本第一制药株式会社等实验动物机构。笔者结合自己的工作实践作了一些肤浅的比较,仅供读者参考。
2006(8):463-465.
摘要:目的通过对易卒中自发性高血压大鼠(SHR/SP)饲喂加味补阳还五汤,观察其对SHR/SP大脑海马区一氧化氮(NO)含量的影响,从而证实加味补阳还五汤能降低SHR/SP大脑海马区本NO含量。方法将20只4周龄雄性易卒中自发性高血压大鼠(SHR/SP)分成2组(每组10只),其中一组喂含补阳还五汤的饲料为用药组,另一组常规饲养,作为对照组。同时用同龄10只WKY大鼠作为空白组。实验周期为3个月,观察大鼠海马区NO含量变化。结果空白组的海马区NO含量(4.56±0.57)μmol/L明显低于用药组(8.78±1.34)μmol/L(P<0.01),而用药组(8.78±1.34)μmol/L的海马区NO含量又明显低于对照组(10.10±1.09)μmol/L(P<0.01)。结论补阳还五汤可降低SHR/SP大鼠海马区的NO水平。
2006(8):466-468.
摘要:目的建立检测兔出血症病毒的RT-PCR方法。方法自感染RHDV致死的兔肝脏组织中提纯病毒,提取病毒总RNA,以RT-PCR方法扩增出368bp的基因片段。将RT-PCR产物克隆到T载体中,并对重组质粒测序。结果PCR产物的测序结果与文献报道的序列一致,敏感性试验结果表明,可检测到10^-7病毒滴度。结论建立的检测RHDVRT-PCR方法具有很高的特异性和敏感性。
刘军须 , 冯旭 , 张焕铃 , 刘建敏 , 蔡月花 , 王莉
2006(8):472-474.
摘要:目的测定新开发的实验动物垫料玉米秸、麦秸的物理性状及卫生指标,探索其定型生产的合理流程。方法对玉米秸、麦秸进行合理加工,测定并比较玉米秸、麦秸、刨花的物理性状、化学污染物含量及携带的微生物数量。结果3种垫料的化学污染物指标均低于我国实验动物配合饲料卫生标准的要求。经预真空高压灭菌后垫料中菌落总数、大肠菌群、沙门菌数、真菌数等微生物指标均小于我国配合饲料卫生标准的要求。经预真空高压灭菌后3种垫料刨花、麦秸、玉米秸的含水量平均为(7.52±0.15)%、(7.60±0.13)%、(7.28±0.13)%。吸湿性分别为(290.94±62.58)%(、414.44±81.21)%(、325.84±78.11)%。结论新开发的实验动物垫料麦秸、玉米秸合乎实验动物垫料的性能要求,适合用于啮齿类实验动物饲养。
2006(8):475-478.
摘要:目的探讨速眠新(SMX)用于家兔麻醉对血流动力学、血液学、血液生化、血气指标的影响。方法首先抽取麻醉前正常状态下家兔静脉血、动脉血。检测血液学、血生化学、血气指标。后以速眠新0.2mL/kg体重肌内注射于兔后肢肌肉丰厚处,3min左右,家兔处于制动状态,于麻醉后进行兔颈动脉插管监测平均动脉血压(MAP),无刨心电监护仪监测呼吸(RR)、心率(HR)。15min时,抽取兔耳缘静脉血测血液学、血生化指标;抽取兔耳中动脉血测血气指标。结果(1)血液学指标:麻醉后较麻醉前红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)(P〈0.05)、血小板比积(PCT)(P〈0.05)显著升高,红细胞体积宽度值(RDW—CV)(P〈0.05)显著降低。(2)血生化指标:麻醉后较麻醉前肌酐(Cr)(P〈0.01)降低,葡萄糖(GLu)(P〈0.05)、肌酸激酶(CK)(P〈0.05)、肌酸激酶同工酶(CK—MB)(P〈0.05)、镁(Mg)(P〈0.05)、磷(P)(P〈0.01)显著升高。(3)血气分析:麻醉后较麻醉前二氧化碳分压(Pc02)(P〈0.01)、碳酸氢根(HCO3^-)(P〈0.05)、总二氧化碳量(1、C02)(P〈0.05)、细胞外液剩余碱(BEeef)(P〈0.05)显著升高,麻醉后较麻醉前钾(K)(P〈0.05)显著降低。(4)血流动力学:麻醉后较麻醉前平均动脉压(MAP)、呼吸(RR)、心率(HR)均降低。结论速眠新用于家兔麻醉对其血液学、血液生化、血气指标、血流动力学均有影响。
2006(8):482-484.
摘要:目的探讨四氧嘧啶致糖尿病大鼠的血糖波动情况,考察模型的稳定性,为药效观察时机的选择提供依据和指导。方法四氧嘧啶40ms/ks给禁食大鼠尾静脉注射致糖尿病,长期连续观察造型大鼠空腹血糖、非空腹血糖与尿糖。结果造模大鼠10d后非空腹血糖趋于稳定,直到120d其非空腹血糖仍维持在较高水平;但其空腹血糖却一直在波动之中。结论①用四氧嘧啶可以造成长期稳定的大鼠高血糖模型;②用该模型观察药物的降糖作用宜在造模10d之后开始,此时模型基本趋于稳定。③应舍弃人们习惯采用的空腹血糖,改用非空腹血糖为宜。
2006(8):485-488.
摘要:目的利用C57BL/6小鼠制备H-Y抗血清并分析。方法以纯系C57BL/6雄鼠脾细胞做为抗原,通过腹腔注射免疫雌鼠的方法制备H-Y抗血清。利用经典精子细胞毒实验和ELISA检测方法分别对两组抗血清检测。结果H-Y抗血清对鼠精子的平均工作效价为1/20—1/160,而ELISA检测抗血清的最高效价为11640,比精子细胞毒实验的检测结果高。结论对两种检测方法的结果进行分析,认为ELISA能准确判断出H-Y抗血清的特异性和效价,尤其在选择免疫效果较好的雌鼠方面有较高的参考价值。
2006(8):488-488.
摘要:《中国比较医学杂志》(原名《中国实验动物学杂志》,1991年创刊)是由中国实验动物学会主办的国家级科技期刊。2003年正式更名为《中国比较医学杂志》。
2006(8):489-490.
摘要:动物疲劳试验近年来已被许多医药界的研究者们所关注。在许多情况下进行动物抗疲劳试验是必要的。如观察被射线辐射、化疗、用药后及运动后的动物与正常时的区别,并作为参考而制定下一步的防御措施,治疗、用药及训练计划等。此前,也有相关的检测仪器如动物跑步检测仪、在水中立一杆子来观察小鼠抗疲劳状态的简单跳台等,已见有较科学的能用数字自动显示速度、时间、次数等指标的动物跑步仪,而用作静态疲劳检测的站点式动物疲劳检测仪(也称动物跳台)至今还很不科学,坐等观察记录不但不准确,也会使研究者自身产生疲劳。
2006(8):491-494,F0003.
摘要:目的探讨光波.微波辐射技术在骨组织快速脱钙与免疫组化染色中的作用。方法用8%硝酸分别在单纯微波、单纯光波、光波,微波组合Ⅰ和光波-微波组合Ⅱ的条件下脱钙,同时以室温脱钙作为对照;应用光波-微波-LSAB免疫组织化学染色技术检测不同脱钙条件下ANP、CD31、CD34、5-HT、S-100、NF、GFAP和Vimentin的表达。结果8%硝酸室温脱钙时间最长,光波.微波组合脱钙时间最短;微波组、光波组、光波.微波组合Ⅰ组、Ⅱ组脱钙的免疫组化染色均明显比对照组好;光波.微波组合Ⅰ组、Ⅱ组脱钙的免疫组化染色均明显优于单纯微波、单纯光波法;光波-微波组合Ⅱ-LSAB免疫组织化学染色技术比常规免疫组织化学染色所用时间短、染色效果好。结论光波.微波辐射脱钙及免疫组化染色所用的时间明显缩短,染色效果好。
2006(8):494-494.
摘要:RNA干扰(RNA interference,RNAi)首次由Fire在1998年发现并命名,是双链RNA(dsRNA)介导的特异性基因表达沉默现象,主要参与者为小干扰RNA(small interfering RNAs,siRNAs)。RNAi研究是目前基因功能研究和基因治疗研究的热点,它也是抵御感染的一种重要保护机制。在2001年和2002年连续被Science杂志评为自然科学最重要的科技成果之一。
2006(8):494-494.
摘要:我国中科院动物所的研究人员在细胞生物毒理学杂志上发表了一篇有关SARS冠状病毒(SARS-CoV)导致细胞凋亡机理的报道。SARS-CoV可以导致细胞细胞凋亡,其结构蛋白可能参与这一过程。他们为了判断SARS-CoV的M、N蛋白是否参与这一过程,用转染SARS-CoV的M蛋白或N蛋白的质粒转染人类肺纤维母细胞(human pulmonary fibroblast,HPF)。DNA原位末端标记技术(TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)和DNA特异性染料(Hoechst33342)然细胞核,并观察细胞形态。
2006(8):495-498.
摘要:目的研究不同组织嗜性的小鼠肝炎病毒(MHV)组合抗原检测抗体的间接ELISA技术。方法比较两种不同组织嗜性抗原和组合抗原为基础的检测MHV抗体水平。将呼吸型MHV-1、肠型MHV-JX和混合抗原包被酶标板后,检测不同MHV毒株感染抗体。结果两种抗原都能检测出相应的MHV抗体,但交互检测效果差;组合抗原能同时检测两种MHV抗体,组合抗原可以提高MHV感染的检出率。临床样品中呼吸型感染率40%-58%,呼吸型感染率22%-70%,两型的共感染率为为17%-30%。结论组合抗原可以用于MHV感染的诊断试剂。
2006(8):498-498.
摘要:已经证明氧化应激跟神经退行性变性疾病有关。但是,氧化应激究竟是这类疾病的病因,还是病变的结果,目前还不清楚。我们的研究发现,在缺乏铜、锌和过氧化物歧化酶(SOD1)的小鼠中,出现典型与人类类似的年龄相关性视网膜黄斑变性。通过观察不同年龄的老龄Sodl(-/-)小鼠,
2006(8):498-498.
摘要:冠状病毒可以感染多种动物,包括禽类、牲畜和人类,目前可以分成三组。冠状病毒在不同宿主之间的种间传播形成一种复杂的生态系统,目前还没有人从事这方面的研究。SAILS的爆发,以及一些新发传染病要求我们研究冠状病毒的生态学特点,尤其是在蝙蝠和其他的野生动物中。
2006(8):499-501.
摘要:目的肝硬化是严重危害人类健康的常见疾病。肝硬化模型的建立是肝硬化研究的理论基础,根据不同研究目的选用恰当的动物模型。本文就数种肝硬化模型的建立方法加以综述,并对各种模型的特点进行比较。
2006(8):502-505.
摘要:动物机体骨代谢持续终生,包括骨形成和骨吸收两个生化过程。钙和磷是骨骼的重要物质成分。机体对钙和磷的摄入量及摄入比例直接影响到骨代谢。而维生素D除了可以通过调控钙、磷的吸收和代谢而间接影响到机体骨代谢外,还可以对骨代谢起到直接作用。
2006(8):506-509.
摘要:目的介绍了维生素E(VE)对机体免疫、生殖和发育影响的研究进展。阐明了适当剂量的VE,对机体的体液免疫、细胞免疫、生殖和发育有明显的促进作用;而VE缺乏,能抑制机体的免疫机能,降低对疾病的抵抗能力,导致生殖和发育的异常。
2006(8):510-510.
摘要:实验动物环境及设施(Laboratory animal requirements of environment and housing facilities)是影响动物进化、生态反应、育种、保种、动物生产及动物实验重要基本条件。定期或不定期监测实验动物生长发育的环境条件是否维持在适应状态至关重要,因此,实验动物的环境设施监测与遗传监测、营养监测、微生物监测一样,是保证实验动物质量的基本手段。本文对2005年江苏省已取得实验动物使用许可证的14家单位,23处环境设施监测结果进行分析。