
- 浏览排行
- 引用排行
- 下载排行
周宪梁 , 孙凯 , 李昭晖 , 孙莉 , 邹玉宝 , 惠汝太
2006(12):705-709.
摘要:目的利用高脂餐诱导的兔动脉粥样硬化模型,观察基质金属蛋白酶2(MMP_2)、MMP_2的调节因子MT1_MMP和MMP组织抑制因子_1(TIMP_1)、MMP_3、TIMP_3,在动脉粥样硬化发生和早期病变中的表达,以及在此过程中增生内膜降解基质的能力、胶原含量、内弹力板的变化;方法6周龄雄性新西兰大白兔(NZW),饲以高脂餐。在高脂餐前随机选取6只,取主动脉,液氮速冻,以后每隔2周随机选取8只,直至第10周。以免疫组化检测巨噬细胞、平滑肌细胞、MT1_MMP、MMP_2、TIMP_2、MMP_3、TIMP_3与COX_2的表达,检测组织原位明胶酶和酪蛋白酶活性。结果主动脉标本呈现5级动脉粥样硬化病变,高脂餐负荷时间与动脉粥样硬化病理分级正相关(相关系数:0.893,P<0.001)。主动脉内膜MT1_MMP.TIMP_2.MMP_2、MMP_3、TIMP_3随动脉粥样硬化进展表达逐渐增多,主动脉内膜降解明胶与酪蛋白的能力随动脉粥样硬化病变进展而增强,内膜胶原含量亦增加。内弹力板的破坏可见于Ⅱ-Ⅳ级斑块中,但有明显的个体差异。结论动脉粥样硬化发生和进展过程中,伴有MMPs激活,并有逐步增加的趋势,内膜胶原含量亦增加。内弹力板的稳定与否有明显的个体差异。
孙凯 , 周宪梁 , 李昭晖 , 孙莉 , 邹玉宝 , 惠汝太
2006(12):710-715.
摘要:目的通过研究脂蛋白a对巨噬细胞源性基质金属蛋白酶(MMPs)和基质金属蛋白酶内源性组织拟制剂(TIMPs)表达的调节作用,探讨脂蛋白a促动脉粥样硬化的机制。方法利用从新鲜混合血浆经超速离心和亲和层析纯化的脂蛋白a刺激人单核细胞白血病THp01细胞经豆蔻酰佛波醇乙酯诱导24h转化而成的巨噬细胞。孵育10h和36h后收集细胞裂解液和条件培养基分别进行MMPs/TIMPs mRNA和蛋白检测及明胶酶谱分析MMPs活性。结果免疫印迹结果显示脂蛋白a可使巨噬细胞培养基中MMP-1、MMP-2、MMp09、MT1-MMP水平明显上调.其中MMP-2和MT1-MMP的活性形式明显增加;而其抑制剂TIMP-1、TIMP-2水平则明显减少,以前者的剂量效应最为明显。明胶酶谱分析表明条件培养基中MMP-9活性增强。逆转录聚合酶链式反应结果显示,MMP-1、MMP-2、MMP-9mRNA水平随Lp(a)刺激增强而增加,TIMP-1 mRNA水平则梯度降低,而MT1-MMP、TIMP-2的mRNA水平未见明显改变。结论研究发现Lp(a)可促进巨噬细胞表达多种MMPs,同时抑制TIMPs的表达,由此所致的MMPs/TIMPs表达及活性失衡最终可致基质过度降解,在整体情况下则可能促进斑块进展成不稳定斑块并破裂。为阐明Lp(a)的促动脉粥样硬化机制提供了新的线索。
2006(12):716-719.
摘要:目的通过比较15_羟基二十碳四烯酸(15_HETE)及其两种代谢产物15_酮基二十碳四烯酸(15_KETE)、8(S),15(S)_二羟基二十碳四烯酸[8(S),15(S)_diHETE]对缺氧组与正常组大鼠的肺动脉环张力的影响,以探讨15_HETE的两种代谢产物在缺氧性肺动脉高压形成中的作用。方法16只健康SD大鼠,体重为(220±20)g,随机分为两组(n=8),一组置于正常的培养箱中,其吸入氧(FiO2)浓度为21%,作为正常组;一组置于缺氧的培养箱中,吸入氧(FiO2)浓度为10%,作为缺氧组。9 d后将两组大鼠处死,采用组织浴槽血管环法观察15_HETE、15_KETE、8(S),15(S)_diHETE对正常组和缺氧组大鼠肺动脉环收缩的影响。结果(1)在正常组和缺氧组,15_HETE、15_KETE、8(S),15(S)_diHETE都以浓度依赖方式使大鼠肺动脉环张力增加;(2)15_HETE、15_KETE使缺氧组大鼠肺动脉环张力较正常组显著增高,而8(S),15(S)_diHETE使正常组和缺氧大鼠肺动脉环张力无明显差异;(3)正常组大鼠肺动脉环对15_KETE、8(S),15(S)_diHETE反应力显著高于15_HETE,而缺氧组大鼠肺动脉环对15_KETE反应力显著高于15_HETE、8(S),15(S)_diHETE。结论15_KETE、8(S),15(S)_diHETE可能在缺氧性肺动脉高压形成中起一定的作用。
2006(12):720-722,726,F0003.
摘要:目的探讨外源性神经生长因子(NGF)对痴呆老龄鼠中枢神经系统P物质(SP)及胆碱乙酰转移酶活性(ChAT-IR)表达的影响。方法采用迷宫测试痴呆老龄鼠空间学习及记忆,用免疫组织化学技术观察SP、ChAT-1R在相关脑区表达。结果用药后痴呆老龄鼠游完水迷宫时间明显缩短(P〈0.01),相关脑区sP及ChAT表达明显提高(P〈0.01)。结论外源性NGF使相关脑区SP及ChAT-IR表达增加,改善了痴呆老龄鼠空间学习及记忆能力,能够保护、支持、修复神经元。
2006(12):723-726.
摘要:目的探讨不同机械通气模式对肺组织产生肿瘤坏死因子-α、白介素-1β、白介素-6的影响。方法应用家兔油酸型急性呼吸窘迫综合征模型比较不同机械通气时,支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子-α、白介素-1β、白介素-6的变化。结果常规通气肿瘤坏死因子-α、白介素-1β、白介素-6水平明显升高,应用肺保护性通气与常规通气比较,指标明显好转,单纯俯卧位通气虽有所好转但差异不明显。结论肺保护性通气不仅可以改善氧合,同时抑制肿瘤坏死因子-α、白介素-1β、白介素-6的释放,减少肺进一步损伤。
高正琴 , 张强 , 邢进 , 王春玲 , 贺争鸣 , 邢瑞昌
2006(12):727-730.
摘要:目的建立套式PCR快速检测实验动物空肠弯曲菌的方法。方法根据GenBank数据库的空肠弯曲菌flaA基因设计2对引物,对空肠弯曲菌抽提DNA作PCR扩增及克隆测序。同时,对其他病原菌抽提核酸扩增,并对120份临床样品进行检测。结果空肠弯曲菌经2对引物分别扩增出1719bp和640bp片段,与预期大小一致。套式PCR检测的最低限度为10CFU。整个检测过程可在8h内完成。而其他病原菌未出现特异性扩增条带。采用套式PCR对121份临床样品进行检测,检出31份阳性,与传统的细菌分离方法完全一致。结论本研究建立的套式PCR方法具有很好的特异性和敏感性,可用于实验动物空肠弯曲菌的快速检测。
2006(12):731-732.
摘要:目的复制慢性复发性实验性变态反应性脑脊髓炎(CrEAE)的动物模型。方法采用豚鼠脊髓匀浆及完全福氏佐剂,对6周龄雌性Hartley豚鼠颈后皮内一次性致敏,对照采用用生理盐水代替脊髓匀浆。致敏后每日进行致残程度评分,并称取体重。结果模型组100%的动物发病,83.3%的动物在2月内有复发,2月内平均发病次数为2.0±0.63次。对照组无一发病。结论本研究成功地复制了CrEAE豚鼠模型,是目前较好的多发性硬化动物模型。
赵丹凤 , 刘丽均 , 狄敏 , 赵立虎 , 张春燕 , 张守纯 , 徐平
2006(12):736-739,743.
摘要:目的分析影响小鼠精子冷冻成功的因素。方法用含3%脱脂奶和18%棉子糖的冷冻保护剂分别冷冻C57BL/6J、FVB/NJ、B6D2F1、KM和ICR小鼠精子。复苏后,评价小鼠精子的冷冻效果和受精能力。结果各品系小鼠精子冷冻前后的受精率不同;新鲜精子体外受精时,C57BL/6J、FVB/NJ、B6D2F1,KM和ICR五个品系的小鼠的受精率分别为81.4%、87.2%、90.4%、82.7%和79.4%而冻融精子的体外受精率分别为6.7%、46.0%、76.8%、59.2%和31.9%,差异极显著(P〈0.01)。结论遗传背景不同的小鼠品系,精子的受精能力及对冷冻的耐受能力不同。
2006(12):740-743.
摘要:目的比较胃癌和癌旁组织中p53基因突变及p53蛋白的表达与淋巴结转移和预后的关系。方法采用PCR.SSCP技术和免疫组织化学S-P法,对石蜡包埋组织进行p53基因外显子6.7和8,9以及p53蛋白的检测。结果(1)p53蛋白的阳性表达在癌组织和癌旁组织中分别为47.6%和38.1%;有淋巴结转移的病例p53蛋白表达52.8%。(2)癌组织中p53外显子7的突变率为23.9%;癌旁组织中突变率为19.0%。癌组织中p53外显子6的突变率为10.5%;癌旁组织为8.6%。癌组织中p53外显子8,9的突变率为1.9%;癌旁组织为1.0%。结论有淋巴结转移的病例中,筇3外显子的突变率和蛋白的表达率均明显增高,提示p53外显子的突变在胃癌的发生发展中是一个重要因素,并促进肿瘤的转移。p53基因突变与p53蛋白高表达在癌组织和癌旁组织中无显著差异。
2006(12):744-748,751.
摘要:目的对VP3进行克隆和测序后,在杆状病毒系统中表达获得重组蛋白,为AEV的分子诊断以及更深一层次的分子和基因工程研究打下基础。方法利用RT-PCR技术,从AEVVR株感染的SPF鸡胚脑及内脏器官组织中提取病毒RNA并扩增出VP3目的基因,而后克隆到pMD18-T载体中,鉴定后进行序列测定;应用Bae—to-Bac杆状病毒表达系统,将VP3基因定向克隆到pFastBacHTa donor质粒中,经转座反应,筛选到VP3-Bacmid重组子,转染Sf9昆虫细胞并盲传三代,提取DNA应用PCR方法鉴定证实获得含VP3的重组病毒,Western blot鉴定VP3在杆状病毒系统中得以表达。结果AEVVR株VP3基因全长735bp,共编码245个氨基酸,与AEV-1143标准毒株相应片段的核苷酸和氨基酸同源性分别为93%和97%;并将其与其它小RNA病毒进行了比较;Western blot鉴定结果,重组蛋白大小约27ku。结论本研究通过RT-PCR技术首次从体外成功扩增AEVVan—Roekel株VP3蛋白基因,并对其进行克隆、测序;应用Bac—to—Bac杆状病毒表达系统成功地表达了VP3基因并获得了具有良好免疫活性的重组蛋白。
2006(12):749-751.
摘要:目的测定3月龄SPF级和普通级新西兰兔的主要脏器系数,并进行对比研究。方法选用3月龄SPF级和普通级新西兰兔各30只(♂15只,♀15只),用电子天平分别测定心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胃、睾丸、附睾和子宫的脏器系数。结果(1)SPF级新西兰兔的主要脏器系数与普通级新西兰兔的相比,除了肾上腺的脏器系数二者之间差异不显著之外(P〉0.05),前者其余主要脏器的脏器系数均显著低于后者(P〈0.01);(2)SPF级新西兰雄兔除了肝、脾、肾的脏器系数显著高于雌兔之外(P〈0.01),雄兔其余脏器的脏器系数与雌兔相比差异均不存在显著性(P〉0.05)。结论不同环境条件和饲养管理对SPF级和普通级新西兰兔主要脏器系数有一定影响。
2006(12):752-754.
摘要:目的说明小鼠灌胃给药测定LD50的结果存在歧义性。方法LD50测定某生物碱采用简化几率法。数据统计采用t检验及对比限法。结果ICR小鼠(两种性别)灌胃给药的LD50为197.56±15.07 mg/kg。分性别单独计算LD50时,由于各自出现两个全部死亡(死亡率为100%)剂量组。分别取各自的数据计算均可得到:雌性小鼠LD50为226.67±18.26 mg/kg(方法一)或201.88±13.49 mg/kg(方法二),两者相比P<0.05;雄性小鼠LD50为179.38±20.09 mg/kg(方法一)或169.86±15.92 mg/kg(方法二),两者相比P<0.05。结论以简化几率法小鼠灌胃给药测定样品的LD50存在结果歧义性的可能。
2006(12):757-759.
摘要:目的测定过氧乙酸和84消毒液浸泡IVC笼盒消毒灭菌效果。方法测定在不同浓度、不同时间内浸泡WC笼具的细菌总数及笼盒内空气落下菌。结果与结论0.2%、0.5%、1.0%、2.0%过氧乙酸和84消毒液浸泡WC笼盒5min均可达到消毒无菌效果,为了安全保险,本实验室采用0.5%过氧乙酸和0.5%84消毒液浸泡10min。效果很好,一年多未见污染,裸小鼠质量检测可达SPF级。
2006(12):760-762.
摘要:目的探讨建立大鼠原位肝移植模型的方法与技术。方法用改进的二袖套法行100例Lewis→BN大鼠原位肝移植,术中门静脉、肝下下腔静脉用袖套法吻合,肝上下腔静脉用缝合法吻合,胆管内支架法完成胆道重建。结果供体手术时间(30.9±5.0)min,供肝修整时间(10.0±3.0)min,受体手术时间(50.0±5.5)min,无肝期为(23.0±2.5)min。手术成功率为92%(术后存活2 d以上),1周存活率为87%,1个月存活率为84%。结论通过提高手术技巧,熟悉各种并发症的原因和预防处理措施,可以减少并发症的发生,提高手术成功率,延长大鼠术后存活时间。
2006(12):763-766.
摘要:目的研制免疫原性好、安全性高、有效的疫苗是控制HIV传播感染的重要手段之一。我国学者也开展了不同疫苗的研制工作,取得一定的效果。本文主要描述了HIV疫苗的两个种类,即预防性疫苗和治疗性疫苗,包括采用传统疫苗技术研制的减毒活疫苗和灭活疫苗以及采用现代生物技术研制的重组蛋白疫苗、DNA疫苗、病毒载体疫苗等,以期对疫苗研究开发提供思路和参考。
2006(12):772-775.
摘要:胆固醇调节元件结合蛋白(SREBPs)是膜结合的转录因子,参与脂质自稳态的许多方面(例如胆固醇、脂肪酸、甘油三酯和磷酯的合成,摄取)。SREBPs在内质网上合成,需要被转运到高尔基体并经过一系列蛋白水解后才能到核内发挥作用。此过程是由两个蛋白介导的,SCAP和Insig。本综述旨在对SCAP和Insig在SREBP加工成熟及在脂质稳态方面的作用进行概述。
2006(12):779-782.
摘要:胚胎干细胞是一种具有发育全能性的细胞系,理论上能分化为包括生殖细胞在内的各种组织细胞。由于生殖细胞是遗传物质的传递者,所以胚胎干细胞向生殖细胞分化的研究具有更深刻的科学及伦理挑战性。本文简要介绍各国科学家在胚胎干细胞向生殖细胞分化方面的研究进展。
2006(12):788-798.
摘要:第1期研究报告小鼠代谢性高尿酸血症模型的复制………徐立,时乐(1)在体与离体肺模型肺泡液体清除率的比较李乃静,谷秀,何平等(5)………………………………………………犬细小病毒核酸诊断方法的建立和应用邵伟娟,谢建云,胡建华等(9)……………………………………………双侧供肾