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2005(5):259-262,F0005.
摘要:目的研究肝癌组织缺血再灌注后一氧化氮(NO)和一氧化氮合成酶(iNOS)的改变、枯否细胞(Kupffer cell)的凋亡及其关系。方法通过超声引导将VX2肿瘤组织混悬液穿刺注射到新西兰兔肝脏左中叶,建立肝脏肿瘤模型,用无损伤血管钳阻断肿瘤所在肝叶的肝动脉分支60 min后去除血管阻断恢复血流,随机将模型动物分为缺血再灌注前(对照)、缺血再灌注后0 min1、h1、d3、d、1周6个时间组,取肝脏组织和肿瘤组织,分别测定NO和NOS的含量。用HE染色法观察肝组织和肝癌组织中的枯否细胞凋亡情况。结果肝组织再灌注后0min开始NO和iNOS浓度均明显下降,至再灌注7 d仍处于较低水平(44.41±2.0,3.70±0.2)。在肝癌组织,除NO浓度下降外,iNOS浓度从缺血再灌注0 min至7 d则明显升高(18.45±1.9)。肝组织和肝癌组织的枯否细胞凋亡显著增加,于再灌注1 d和1 h分别达最高峰(13.69±3.1,13.66±1.8)。结论枯否细胞对肝癌组织缺血再灌注过程中的iNOS及NO的产生、细胞损伤与凋亡起重要作用。
2005(5):263-266,F0005.
摘要:目的比较幼龄及成龄大鼠骨髓基质干细胞体外培养过程中生物学特性的差异.方法取3周及3月龄SD大鼠股骨骨髓原代培养基质干细胞.第2代细胞添加诱导成骨培养液,分别通过相差显微镜观察细胞生长,MTT法检测细胞增殖,钙钴法、茜素红染色了解体外矿化,测定细胞总蛋白含量,RT-PCR测Ⅰ型胶原mRNA表达,透射电镜了解细胞及胞外基质分泌来比较两者差异.结果幼鼠细胞增殖更快,倍增时间4.8 d;培养第7天出现较多集落;钙钴法、茜素红染色深染细胞数目多,结节典型;细胞总蛋白含量高.成龄鼠细胞增殖相对慢,倍增时间5.4 d;未见细胞集落,钙化呈片状;细胞总蛋白含量较低.两者琼脂糖电泳均可显示Ⅰ型胶原mRNA条带;超微结构内质网丰富,胞外基质为前胶原样结构.结论不同鼠龄的骨髓基质干细胞经体外诱导均可分化为成骨细胞,考虑到细胞增殖及成骨潜能,幼鼠基质干细胞是研究细胞/生物材料相互作用更理想的工具.
2005(5):267-270.
摘要:目的构建中枢神经系统特异表达的野生型及突变型α-synuclein转基因表达载体.方法通过PCR方法扩增α-synuclein基因,产物亚克隆到pGEM-T载体,经测序无误后克隆到pCEP4载体,并用神经特异的PDGF启动子替代pCEP4载体的CMV启动子构建野生型转基因表达载体.利用大引物突变法构建A53T和A30P的转基因表达载体.结果通过限制性内切酶及DNA测序证实野生型及突变型α-synuclein均成功的克隆到所需要的载体中.结论该转基因表达载体的成功构建为帕金森氏病转基因动物的构建及帕金森氏病发病机制的研究奠定基础.
2005(5):271-273,i0001.
摘要:目的研究健乳灵对乳腺增生大鼠乳腺组织中抑癌基因p16、p53表达的干预作用.方法用苯甲酸雌二醇和黄体酮制作乳腺增生病大鼠模型,分别用不同剂量的健乳灵治疗60 d,用免疫组化法测定乳腺组织的p16、p53表达水平.结果健乳灵能抑制乳腺上皮增生,降低大鼠乳腺增生组织的p16、p53蛋白表达水平,与模型组比较有显著性差异(p<0.01).结论健乳灵对大鼠的乳腺增生病有调节和治疗作用.
崔亚利 , 赵德明 , 梁万宁 , 宁章勇 , 杨建民 , 吴长德 , 马李颖
2005(5):274-277.
摘要:目的通过定量分析雌激素受体在动脉粥样硬化兔心脏和肝脏内的相对基因表达,研究雌激素受体基因mRNA的表达水平与动脉粥样硬化(AS)发生的关系。方法手术法去势新西兰雌兔,高胆固醇饮食法复制AS模型,以管家基因-βactin作为内源性校准基因,用SYBR Green I作为荧光染料,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(real-time RT-PCR)对ERαmRNA的表达进行了分析。结果对照组(N)、模型组(C)和假手术组(SC)主动脉硬化斑块面积分别为0、(0.75±0.24)和(0.56±0.27),饮食法复制AS模型成功;ER在对照组兔心脏和肝脏内的相对基因拷贝数分别为0.46、0.49,在模型组的去势雌兔心脏和肝脏内的相对基因拷贝数分别为0.29、0.32,在假手术组兔心脏和肝脏内的相对表达量分别为0.53、0.51。结论兔心脏、肝脏内都有雌激素受体α分布;去势AS雌兔组织内雌激素受体表达量的减少可能与动脉硬化的形成有关。
包军胜 , 岳中瑾 , 秦大山 , 孙以方 , 钟甘平 , 左陵君 , 王家吉 , 史庭凯
2005(5):278-280.
摘要:目的建立符合正常生理特点的胰岛素门静脉回流胰液内引流式胰肾联合移植(SPK)动物模型。方法选用20头近交系甘南小型猪作为SPK的供受体。供胰肾原位灌注后整块切取。修整时行供体左肾静脉与脾静脉端端吻合。受体血管吻合采用供体门静脉与受体脾静脉端侧吻合,供体腹主动脉的远端与受体的腹主动脉斜侧吻合;供体十二指肠与受体空肠侧侧吻合,使胰液经节段十二指肠从肠道引流;供肾输尿管皮肤造瘘并置管体外引流用于监测尿量。全组均未作抗排斥处理。结果10头受体猪中除1头因严重的腹胀于术后1 d死亡外,其余9头平均存活(4.5±1.5)d,术后移植胰、肾均即可发挥功能。结论在小型猪建立门静脉回流胰液内引流式SPK模型是可行的,且该术式更符合生理特点,可望用于临床。
杨新跃 周银平 戴黎光 刘志勇 周明 刘琳 李启富 田泽敏 喻荣珍
2005(5):281-284.
摘要:目的建立高血脂动物模型,观察藤茶和荷叶提取物对高血脂模型大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、Lee's指数的影响.方法用高脂饲料喂养造模后,随机分为模型组、高剂量组20mg/kg、中剂量组10 mg/kg、低剂量组5 mg/kg及降脂药物组180 mg/kg,连续给药25 d.观察:①TC、TG、HDL-C;②体重变化;③肝重/体重比;④体脂湿重测定;⑤Lee's指数.结果各剂量实验组TC、TG和HDL值与模型组及降脂药物组比较差别无显著性(P>0.05);但中剂量和高剂量实验组与实验前比较TC值有显著降低(P<0.05),高剂量组与模型组比较,Lee's指数下降,差别有显著性(P<0.05).结论藤茶和荷叶提取物有降低血清胆固醇和减肥作用.
2005(5):284-284.
摘要:
2005(5):285-287.
摘要:目的探讨二月桂酸二丁基锡(DBTD)对雄性大鼠生殖系统的影响。方法将健康成年Wistar雄性大鼠28只,体重(260±10)g,随机分为4组,即0、5、102、0 mg/kg剂量组,每组7只。灌胃染毒5周,末次染毒后48 h处死动物。结果与对照组相比,各剂量组大鼠睾丸中锡含量差异无显著性(P>0.05),而乳酸脱氢酶(LDH),氧化氮(NO)各剂量组,一氧化氮合酶(NOS)及酸性磷酸酶(ACP)中高剂量组与对照组差异都有显著性。结论DBTD具有睾丸毒性,能干扰雄性大鼠睾丸组织中酶的活性。
2005(5):287-287.
摘要:CD3、CD4、CD8、CD20是重要的白细胞分化抗原,对于T细胞、B细胞的识别、黏附、分化具有重要作用.CD3^+、CD4^+、CD8^+、CD20^+细胞阳性率是基础免疫学和临床免疫学研究的重要指标.
2005(5):288-290.
摘要:目的探讨癫痫对机体红细胞免疫粘附功能、血清白细胞介素6(IL-6)与白细胞介素2受体(sIL-2R)水平的变化.方法将40只Wistar大鼠分成对照组(n=10)与模型组(n=30),通过注射氯化锂-匹罗卡品建立实验性大鼠癫痫模型,抽取实验组与模型组外周血并检测红细胞粘附功能、IL-6和sIL-2R水平.利用红细胞免疫复合物花环形成试验测定两组大鼠的红细胞免疫粘附功能;利用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测sIL-2R水平;利用放射免疫法检测IL-6水平.结果模型组红细胞花环率显著低于正常对照组(P<0.05),血清sIL-2R、IL-6水平显著高于正常对照组(P<0.01).结论癫痫可致机体免疫功能异常,免疫因素可能参与了癫痫的发病过程.
2005(5):291-294.
摘要:目的建立BALB/c近交系小鼠常规生物学特性指标.方法采用日本光电MEK-5126血球计数仪、荷兰半自动生化仪、流式细胞仪及常规的实验方法检测.结果血液细胞计数、血液生化指标、体重、脏器重量、脏器指数等常规生物学指标结果比较均一;清洁级BALB/c近交系小鼠的血液细胞计数和血液生化指标同普通级BALB/c近交系小鼠比较差异显著;普通级的CD4^+/CD8^+指标雌雄之间及普通级与清洁级的CD4^+/CD8^+差异显著.结论清洁级BALB/c近交系小鼠具有比较稳定的生物学特性.
2005(5):295-297.
摘要:目的探讨磷烧伤与肝细胞及其线粒体损伤之间的关系.方法健康wistar大鼠随机分为磷烧伤组、烫伤组、正常对照组.每致伤组每时相点6只,分别于伤后5、10和24 h放血活杀,取血测定丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH).同时取肝组织,检测肝组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)活性以及线粒体呼吸控制率(RCR)、线粒体氧化磷酸化效率(pi/O)、线粒体琥珀酸脱氢酶(SDH)活性变化.结果磷伤后血ALT、GOT、LDH不仅显著高于对照组,也显著高于烫烧伤组(P<0.05);磷烧伤组RCR、Pi/O及SDH活性显著低于对照组与烫伤组(P<0.05);磷烧伤组肝组织SOD,GSH低于烫伤组但显著高于对照组(P<0.05);MDA显著高于对照组但低于烫伤组(P<0.05).结论肝细胞及线粒体的损伤不仅有过氧化损伤因素起作用,还有磷转化为磷酸后对肝细胞及其亚结构的毒性作用.
2005(5):298-301.
摘要:目的建立健康成年实验恒河猴心脏血流动力学指标及左室收缩功能正常基础参考值.方法分别采用脉冲多普勒及M型超声Teichholtz公式对10只健康成年实验恒河猴(雌性4只,雄性6只)进行心脏血液动力学指标及左室收缩功能指标测量,并比较雌雄组间各参数的差异.结果健康成年实验恒河猴心脏血液动力学及左室收缩功能指标均类似于人类新生儿,雌、雄组间比较各指标间差异均无统计学意义(P>0.05).结论正常恒河猴心脏血液动力学及左室收缩功能测值可作为相关生理参数的基础正常值.
2005(5):301-301.
摘要:Saffan是新西兰Schenign-plouh动物健康有限公司生产的一种甾醇类麻醉药,主要用于羊、猫、小牛等小动物的手术麻醉.此麻醉剂未在中国注册,用于贵州黑山羊的麻醉尚属首例,其麻醉效果有待证实.
2005(5):302-304.
摘要:目的探索在猴免疫缺陷病毒(SIV)造模之前选择适宜于制作此模型的猕猴个体的方法,以减少感染后血浆病毒水平过低的几率,从而保证实验的质量.方法测定SIV感染前实验猴外周血单个核细胞(PBMC)在试管内感染SIV后的产毒水平,并与该个体在感染同一株SIV后血浆病毒载量的水平进行比较分析,判断此法能否用于选择适于造模的实验猴.结果根据14只食蟹猴的结果,体外与体内的病毒水平符合比为10/14,体内病毒载量偏低的猴6只(6/14),体外病毒水平偏低者4只,如把这4只猴排除,则余下10只猴体内病毒载量偏低的猴为3只(3/10).结论应用检测体外PBMC病毒产量水平的方法,选择病毒水平高的猴才用于体内感染SIV.这样能部分去除体内感染的病毒载量偏低的猴.但最终的解决方法仍是建立培育遗传背景清楚的SPF实验猴群.
2005(5):308-310.
摘要:目的选择一种快速、敏感和特异的方法来检测实验动物皮肤病原真菌.方法选取真菌CHS1基因中一段序列设计皮肤真菌通用引物和选取一种随机引物FM1,利用聚合酶链反应(PCR)扩增三种动物皮肤病原真菌标准株:须毛癣菌、石膏样小孢子菌、犬小孢子菌.结果两种引物扩增产物片段大小在三种真菌之间有明显不同.结论本实验方法可快速特异性检测实验动物皮肤病原真菌.
2005(5):311-314.
摘要:本文对大小鼠游泳实验的方法(强迫游泳、负重游泳、水迷宫等)、评价指标(不动时间、负重游泳时间、逃避潜伏期等)及模型大、小鼠生理生化的变化进行了综述,为进行抗抑郁、抗疲劳和益智药物的研究提供参考,本文还对计算机技术在大小鼠游泳实验中的应用作了简要的介绍.
2005(5):315-319.
摘要:动物线粒体是一种存在真核生物细胞质中的细胞器,根据已经测序的动物线粒体DNA,它可编码13种蛋白质,2种rRNA,22种tRNA,和非编码区(D-Loop),已有报道发现了新的R-Loop结构,呈现母性遗传特点,且其平均进化速度是核基因组的10倍,尤其是D-Loop区.同时在线粒体DNA控制区中发现的重复序列在种间甚至种内存在着差异可作为动物特异的分子标记.根据线粒体的结构和遗传特点,借助生物信息学手段和丰富的数据库资源,对动物种间及种内群体进行分子系统学的研究,并确定分类地位,亲缘关系.
2005(5):319-319.
摘要:2004年初,我院投资两百多万元新建了动物实验中心(以下简称为中心),已经通过有关部门的检查验收,达到省内实验动物设施的先进水平.
2005(5):320-320.
摘要:海南省有发展实验动物的良好条件,热带、亚热带独特的气候条件特别适合于动植物的生长发育,保存完整的生态多样性环境使得海南具有丰富的动植物品种资源,有许多野生动物具有开发成实验动物的潜在优势,例如五指山小型猪、海南猕猴等. 海南岛孤悬海外,四面环海形成天然屏障,减少了疾病侵袭和外来病原的影响。海南省优越的生态环境,是国家无规定动物疫病示范区,SARS期间更是全国不多的无病区之一。联合国有关组织评定“世界最佳人居地”中有2个就在海南。海南实验动物产业发展有良好的环境和独特的自然优势。海南省制定了建设“健康岛”的战略目标,加快制药工业和生物医学科学研究的发展,全省现有各类制药企业100余家,并且呈逐年增加趋势。以制药工业为支柱产业发展的政策必须建立在安全可靠的生物安全评价体系之上,而实验动物是必备的基础条件。这为海南省实验动物产业发展提供了良好的机遇。