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2003(6).
摘要:第 1期比较医学———生命科学的重要前沿学科施新猷 1………………………………………………………………猕猴志贺菌感染状况及药物敏感性调查田浩 隋丽华 郑振峰等 5…………………………………………正加速度对大鼠肾功能和超微结构的影响王 戴雨 笪冀平等 10…………………………………………SD大鼠 30天喂养试验血液学指标和血清生化指标参考值探讨赵安莎 孙于兰 周蓉等 13………………灰旱獭感染HBV的传代研究赵素元 黄星 邹林樾等 16……………………………………………………HCMV感染动物胃肠组织损伤实验研究孟红 …
李华 , 刘维全 , 刘海鹏 , 王本旭 , 王吉贵 , 江禹
2003(6):321-324.
摘要:目的 研究人胰岛素基因在家蝇中的表达,建立家蝇生物反应器。方法 以家蝇作为实验动物,利用BAEKON6000型基因转移仪将胰岛素基因组基因导入家蝇进行实验研究。收集家蝇新产卵(1—1.5h内),将环状质粒pCMV—mINS、pCMV-ImINS、pEF1α—mINS、pEF1α—ImINS以10μg/ml浓度分别与新采集的家蝇卵混合后进行电转移。经人工孵化发育为成虫(R),G418(3.0mg/ml)筛选Fl代,待F1代发育至成虫并产卵后,采用PCR、Tricine-SDS-PAGE和Western-blot技术对F2代蝇蛆进行整合与表达水平检测。结果 四种质粒均能在家蝇中表达人胰岛素,表达量各占蝇蛆总蛋白0.207%、0.357%、0.473%和0.831%。结论 人胰岛素基因能够在蝇蛆中表达,即蝇蛆机体可对人胰岛素原进行翻译后加工。
2003(6):325-328.
摘要:目的 利用PCR—RFLP和PCR—SSCP技术分别检测犬MC1R基因中两个序列T105A和R306Ter的基因多态性,为遗传育种、培育出更加优良的实验用犬奠定基础。方法 以224只犬为实验材料,对犬MC1R基因T105A片段和R306Ter片段分别进行PCR-RFLP和PCR—SSCP分析,并且分别对具有RFLP和SSCP多态性的片段进行克隆测序,找出等位基因的差异位点。结果 经对犬MClR基因的PCR-RFLP分析,发现犬MC1R基因的T105A序列具有多态性,表现为三种基因型:AA、AB和BB。通过对具有RFLP多态性的片段进行克隆测序发现MC1R基因在编码第105位氨基酸的密码子处存在由G到A的单碱基突变,该突变导致第105位氨基酸发生由精氨酸向苏氨酸的改变,此外在第207位氨基酸的密码子处还发现由A到G的单碱基突变,并产生了一个HhαI限制性内切酶位点。同时,经过犬MC1R基因的PCR—SSCP分析,发现犬MC1R基因的R306Ter序列具有多态性,表现为三种基因型:CC、CD、DD.通过对具有SSCP多态性的片段进行了克隆测序发现,MC1R基因在编码第306位氨基酸的密码子处存在一个由CGA到TGA的终止突变,而使翻译终止。结论 利用PCR—RFLP和PCR—SSCP分析技术证实犬MC1R基因具有明显的多态性。
郑玉姝 , 智海东 , 王云峰 , 王玫 , 仇华吉 , 童光志
2003(6):329-331.
摘要:目的 分析传染性喉气管炎病毒 (ILTV)gC蛋白的免疫活性。方法 设计引物扩增编码gC蛋白主要免疫原性区域cDNA ,将其克隆到原核表达载体pGEX_6P_1的EcoRⅠ和SalⅠ位点之间 ,构建重组质粒r_pGEX_gC。将r_pGEX_gC转化到大肠埃希菌BL2 1(DE3)株中。结果 经IPTG诱导后 ,GST gC融合蛋白在重组菌株获得表达 ,表达产物相对分子质量为 6 5× 10 3,与预计相对分子质量大小一致。融合蛋白的表达含量占整个菌体含量的 2 7 8%。West ern_blot结果表明gC蛋白具有良好的反应活性。结论 本研究为传染性喉气管炎诊断抗原研制奠定基础。
2003(6):332-335.
摘要:含有产气荚膜梭菌α毒素基因序列的克隆载体pMD18TCα ,经BamHⅠ和HindⅢ内切酶双酶切后 ,将α毒素亚单位基因亚克隆到原核表达载体pET30b中 ,构建表达载体pET30bPα。经酶切和测序鉴定 ,α毒素基因中的90 0bp的片段正确插入到表达载体中。重组菌株BL2 1(DE3)pET30bPα经IPTG诱导的表达产物经SDS PAGE和Western_blot分析 ,表达出大小为 38× 10 3的重组蛋白具有和α毒素阳性血清发生特异性的免疫反应。
2003(6):336-340.
摘要:目的 观察松木、玉米秸、麦秸 3种垫料物质对大鼠血液生化指标和肝脏细胞色素P4 50 (CytP4 50 )酶系的影响。方法 将SD大鼠随机分为松木组、玉米秸组、麦秸组和对照组 ,于饲养 1、2、3、4周时测定血液中的丙氨酸转氨酶 (GPT)、白蛋白 (ALB)和总蛋白 (TP) ,测定肝脏细胞色素P4 50 酶 (CytP4 50 )、细胞色素b5酶 (Cytb5)和NADPH_细胞色素C还原酶。结果 3个实验组与对照组的GPT、ALB和TP值相比无统计学差异 (P >0 0 5 ) ,且均在正常范围之内。松木在 2~ 4周对CytP4 50 有显著诱导作用 (P <0 0 5 ) ,第 3周差异极显著 (P <0 0 1) ;在 1~ 4周对NADPH_细胞色素C还原酶有诱导作用 (P <0 0 5 ) ,其中 2~ 4周差异极显著 (P <0 0 1) ;在 2、3周对Cytb5有诱导作用 (P <0 0 5 )。麦秸在第 2、3周可以诱导CytP4 50 和Cytb5的活性增加 (P <0 0 5 ) ,在 3、4周可以诱导NADPH_细胞色素C还原酶的活性增加 (P <0 0 5 ) ;玉米秸在 2、3周时对CytP4 50 和NADPH_细胞色素C还原酶均有诱导作用 (P <0 0 5 ) ,而仅在第 3周表现对Cytb5的诱导 (P <0 0 5 )。将玉米秸组和麦秸组的酶诱导作用与松木组进行比较 ,2~ 4周 ,玉米秸组CytP4 50 的值低于松木组的值 (P <0 0 5 ) ;2、3周麦秸组CytP4 50 的值低于松木组的
2003(6):340-342.
摘要:目的 研究番茄红素 (lycopene ,LP)对四氧嘧啶所致糖尿病大鼠血糖的调节作用极其抗氧化能力的影响。方法 利用四氧嘧啶造成糖尿病大鼠模型 ,以葡萄糖氧化酶法测定空腹血糖 ,黄嘌呤氧化酶法测定血清和胰腺匀浆的超氧化物歧化酶 (SOD)活性 ,硫代巴比妥显色法测定丙二醛 (MDA)含量。结果 番茄红素能够明显降低糖尿病大鼠空腹血糖 ,提高血清和胰腺组织的SOD活性 ,降低MDA含量 ,与模型组相比 ,差异有显著性 (P <0 0 0 5 )。结论 番茄红素可以降低糖尿病大鼠空腹血糖并能够提高其抗氧化能力。
2003(6):346-349.
摘要:目的 通过免疫组织化学染色了解5-羟色胺(5-HT)免疫活性阳性细胞在家兔消化道内的分布位置及其形态。方法 取家兔消化道,冲洗、固定、石蜡切片,用ABC(avidin-biotin-peroxidase complex)免疫组织化学法检测5-HT阳性细胞。结果 食管和胃贲门部呈阴性反应,其他部位均有5-HT细胞分布,分布的密度近似呈字母“M”形。5-HT细胞形态以圆形或椭圆形为主,只有小肠段5-HT细胞呈梭形具有突起,直肠部5-HT细胞呈锥体形。5-HT细胞多分布于粘膜上皮或腺泡上,但直肠部的5-HT细胞位于固有膜内。结论 家兔的食性、消化特点对5-HT细胞分布型形成有一定影响,5-HT细胞形态与其内、外分泌功能是相适应的。
2003(6):349-352.
摘要:目的研究松木、麦秸、玉米秸、玉米芯和国外商品垫料5种垫料物质的细胞毒性作用.方法将五种垫料物质的丙酮提取物按1、3、5、10、20和40mg/ml的终浓度梯度加入到H22-H2D8细胞中,培养72h后用考马斯亮蓝法测定细胞的总蛋白量,计算细胞的半数致死量(LD50);用MTT法测定H22-H2D8细胞在492nm的吸光度值(A492),计算细胞的相对增值率,用6级毒性分类法进行毒性分级.结果松木的LD50<5mg/ml,麦秸、玉米秸、国外商品垫料的LD50<20mg/ml,玉米芯的LD50>40mg/ml.麦秸和商品垫料的细胞毒性为2~3级,松木的细胞毒性2~5级,玉米秸的细胞毒性为1~3级,玉米芯的细胞毒性为1~2级.在垫料提取物浓度为5mg/ml、10mg/ml时,麦秸组的A492值显著低于玉米秸组和商品垫料组的A492值(P<0.05),而玉米秸组和商品垫料组相比无显著差异(P>0.05);在浓度为20mg/ml、40mg/ml时,王米秸组的A492值大于麦秸组和商品垫料组的A492值(P<0.05),麦秸组和商品垫料组相比差异无显著性(P>0.05).结论松木的细胞毒性最大,玉米芯的细胞毒性作用最小,玉米秸、国外商品垫料、麦秸三种物质均显示有细胞毒性作用,但它们的毒性显著低于松木,高于玉米芯.
2003(6):356-358.
摘要:对实验小动物肠道中的主要病原性鞭毛虫类——鼠贾第鞭毛虫、鼠六丝原虫等、非病原性的毛滴虫属以及病原性不清的鞭毛虫类的属征进行了阐述,可作为实验动物寄生虫学检测的参考。
李涛 , 王海燕 , 刘丽玲 , 张新臣 , 郭守利 , 王海霞 , 林彦
2003(6):358-361.
摘要:目的 利用手术方法建立大鼠实验性急性胰腺炎动物模型。方法 56只Wistar大鼠,随机分为3组,实验组:结扎胆总管末端;对照组:按Nevalainen法,结扎胆总管开口远、近各1cm的十二指肠;正常组:正常Wistar大鼠。实验组与对照组分别于术后第10、24、48h采血测定血清淀粉酶、血清钙及血糖,观察胰腺大体病理变化并作组织学检查。结果 实验组及对照组大鼠的血清淀粉酶显高于正常组,血清钙显低于正常组,而血糖差异不显。结论 经生化分析及组织学检查提示急性胰腺炎(AP)动物模型建立。
2003(6):361-363.
摘要:目的 通过动物实验研究关木通对肾脏的毒性作用。方法 将SD大鼠随机分成 3组 ,即对照组及关木通S组和关木通B组 ,关木通两组每天灌胃不同浓度的水煎液 ,对照组灌胃自来水。 7d后测尿量、尿糖、尿蛋白及血肌酐并处死关木通B组大鼠 ,取肾脏做病理。于 30d、6 0d测对照组和关木通S组大鼠尿量、尿糖、尿蛋白及血肌酐、尿素氮 ,并处死 10只S组大鼠取肾脏做病理。 90d时重复上面的实验并处死对照组和关木通S组动物。结果 关木通B组大鼠死亡 2只 ,病理显示肾小管弥漫性坏死 ;关木通S组与对照组比较差异无显著性 ,P >0 0 5。结论 大剂量关木通中毒导致的肾损害为急性肾小管坏死 ,小剂量关木通也不宜长期应用。
2003(6):364-367.
摘要:本应用Grimelius嗜银法对黑斑蛙(Pelophylax nigromaculata)胃肠道的嗜银细胞进行了研究。结果发现,嗜银细胞见于胃肠道全长,多数分布于粘膜上皮和腺泡上皮之间;其分布密度为胃幽门部最高,十二指肠部最低;嗜银细胞的形态依所在位置不同而不同。嗜银细胞具有内、外、旁分泌三种作用途径;细胞形态可能与其所受挤压情况有关。
2003(6):367-370.
摘要:目的 为脑胶质瘤的基础理论、临床治疗和药效学研究提供简便、经济、实用的大鼠C6脑胶质瘤动物实验模型。方法 采用自制大鼠脑固定架,固定后,于脑靶点接种C6胶质瘤细胞。观察动物行为状态和生存期,并对脑肿瘤进行形态学,细胞学和分子生物学相关指标的检测。结果 接种C6胶质瘤细胞后,动物进食量减少,体重下降,有的动物出现眶周出血,眼球突出,自身旋转,癫痫发作,偏瘫等症状,大约在2至3周内,动物大多死亡,病理解剖显示颅内肿瘤形成。结论 该方法建立的脑胶质瘤具有与人脑胶质瘤相似的特性,肿瘤形成时间短,存活期较稳定,可供脑胶质瘤基础理论、实验治疗和药效学研究的需要。
张淑芹 , 温海霞 , 赵林山 , 郑继奎 , 吕春梅 , 张玮
2003(6):370-373.
摘要:目的 建立抗精子抗体 (AsAb)阳性大鼠动物模型。方法 同种Wistar大鼠精子抗原人工免疫法建立模型 ,通过ELISA法检测血清AsAb ;光镜HE染色观察大鼠附睾组织形态学改变 ;考马斯亮蓝顶体染色法检测精子的顶体反应率 ;化学比色法检测精子的ATP酶活性。结果 模型AsAb阳性大鼠血清样品的AsAb符合实验要求 ,其精子的顶体反应率、Na+ -K+ ATP酶、Ca2 + -ATP酶活性与对照组相比均显著降低 (P <0 0 1;P <0 0 5 ;P <0 0 5 )。结论 成功建立抗精子抗体阳性大鼠动物模型。
2003(6):377-380.
摘要:SPF种鸡群培育和管理对建立SPF种鸡群至关重要,但在培育过程中也要保持来源鸡群各项性能指标的相对稳定。在做好鸡群疫病净化和生物学敏感试验的同时,对培育鸡群定期进行遗传性能和生产性能(体增重、蛋增重、产蛋率、受精率、蛋料比、性比等)的跟踪测定,并与来源鸡群进行对比,发现没有明显的差异或差异不显。
2003(6):380-381.
摘要:由于小型猪的生理学和解剖学与人类有很大的相似性 ,因而广泛应用于下列生物医学和其他领域的科学研究。①心血管 :解剖学 ,室性功能 ,冠状动脉分布 ,电生理学 ,诱发动脉粥样坏死。②皮肤 :色素沉着 ,色素缺乏 ,无毛症、过敏反应 ,阳光爆晒和愈合过程中皮肤通透性反应。③胃肠道 :消化过程与人极为相似 ,可用于研究药物在口腔内的动力学变化。④肾脏 :在形态上与人极为相似 ,小猪胎肾和新生肾的成熟特性和新生儿相似。⑤免疫系统 :研究猪淋巴细胞抗原 (SLA抗原 )在调节细胞免疫反应和移植排斥反应中的作用。⑥牙 :乳牙和恒牙的长出情况和X…
2003(6):381-383.
摘要:目的 探求动物实验室行之有效的消毒灭菌方法。方法 用甲醛,过氧乙酸,新洁尔灭溶液对动物实验室进行空气消毒,用血琼脂培养基进行落下菌培养。结果 各消毒剂均可清除或杀灭环境中的有害微生物,但使用不当会使灭菌效果降低或给实验动物造成伤害。结论 日常工作中先采用物理消毒,再采用化学药物消毒可取得良好的消毒效果。
2003(6):383-385.
摘要:目的 探讨影响实验用兔繁育的因素及解决办法。方法 从引种、选种、配种、妊娠诊断、饲养管理、疾病防御、饮食卫生等几方面,总结了作在试验用家兔繁育过程中的经验和体会。结果 尽量避免和克服影响实验用家兔繁育的因素,使作单位的兔种群由引种时的60只发展到目前的枷只(限量生产),保留了国内仅有的长春大耳白(B:CRnR)兔种。结论 影响实验用家兔繁育的因素是能够发现并加以克服的,批量生产和计划生产是可以做到的。
2003(6):386-388.
摘要:我国近 2 0年实验动物事业得到了长足发展 ,取得了辉煌业绩。现发达地区和部门的实验动物无论是硬件设施、软件管理还是实验动物质量 ,都可与一些发达国家相媲美。这些成绩除源于国家重视给予巨资投入外 ,主要是培养和造就了一支具有较高业务素质和专业技术水平的实验动物人才队伍。在上个世纪 80年代初 ,我国实验动物科学刚刚得到重视 ,国家科委就把人员培训当成一件大事来抓 ,开展了多种渠道、多种形式的人员培训和教育工作。时至今天 ,实验动物从业人员的培训和教育工作仍是提高人员素质、增强专业知识和技能、贯彻落实政策法规和推进实…