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王思齐,包凯帆,王晓钰,王霄彤,袁为远,姚露,许一凡,洪敏.抗生素呼吸道给药加重小鼠过敏性哮喘模型的建立[J].中国比较医学杂志,2019,29(8):37~43.
抗生素呼吸道给药加重小鼠过敏性哮喘模型的建立
Establishment of an allergic asthma model in mice using antibiotics administered via the respiratory tract
投稿时间:2019-03-01  
DOI:10.3969/j. issn. 1671 -7856. 2019. 08. 006
中文关键词:  过敏性哮喘  抗生素  屋尘螨  呼吸道菌群
英文关键词:asthma  antibiotics  house dust mite  respiratory microbiome  mice
基金项目:
作者单位E-mail
王思齐 南京中医药大学药学院,江苏省中药药效与安全性评价重点实验室,科技部国家规范化中药药理实验室,南京 210023 13260870088@ 163.com 
包凯帆 南京中医药大学药学院,江苏省中药药效与安全性评价重点实验室,科技部国家规范化中药药理实验室,南京 210023  
王晓钰 南京中医药大学药学院,江苏省中药药效与安全性评价重点实验室,科技部国家规范化中药药理实验室,南京 210023  
王霄彤 南京中医药大学药学院,江苏省中药药效与安全性评价重点实验室,科技部国家规范化中药药理实验室,南京 210023  
袁为远 南京中医药大学药学院,江苏省中药药效与安全性评价重点实验室,科技部国家规范化中药药理实验室,南京 210023  
姚露 南京中医药大学药学院,江苏省中药药效与安全性评价重点实验室,科技部国家规范化中药药理实验室,南京 210023  
许一凡 南京中医药大学药学院,江苏省中药药效与安全性评价重点实验室,科技部国家规范化中药药理实验室,南京 210023  
洪敏 南京中医药大学药学院,江苏省中药药效与安全性评价重点实验室,科技部国家规范化中药药理实验室,南京 210023 hongmin72@ 126.com 
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中文摘要:
      目的 中医药通过调节菌群治疗疾病的机制逐渐被发现,探索建立抗生素造成呼吸道菌群紊乱的哮喘模型,以期为研究中医药对呼吸道菌群及哮喘的作用提供合适的模型?方法 40 只SPF 级雄性BALB/ c 小鼠随机分为以下4 组:正常对照组?哮喘模型组?滴鼻抗生素哮喘模型组?腹腔注射给予抗生素哮喘模型组?采用屋尘螨(house dust mite, HDM)建立哮喘模型,分别通过滴鼻或腹腔注射给予抗生素头孢哌酮舒巴坦钠(cefoperazonesulbactam sodium, CFP),观察抗生素对HDM 诱导的小鼠哮喘的影响?24 d 后小鼠眼眦取血,对各组小鼠的哮喘指标:血中嗜酸性粒细胞(eosinophils, EOS)进行计数,检测血清中IgE 水平,小鼠肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavagefluid, BALF)及肺组织匀浆中TH2 型细胞因子IL-5 和IL-13 水平,小鼠肺组织进行HE?Masson?PAS 染色,观察病理组织学变化?结果 在哮喘模型组小鼠血中EOS?血清中IgE?BALF 及肺组织匀浆中IL-5 和IL-13 水平较空白组显著升高( P <0. 05),滴鼻给予抗生素组较哮喘模型组有更明显的上升( P <0. 05),病理组织学观察也发现滴鼻给予抗生素造模组的炎症浸润?细胞外基质沉积及粘液分泌都更为严重,而腹腔注射抗生素组的相关哮喘指标较模型组无显著变化?结论 利用抗生素头孢哌酮舒巴坦钠滴鼻给予小鼠能加重HDM 诱导的小鼠哮喘,提示呼吸道给予抗生素可能会导致呼吸道菌群紊乱进而加重哮喘的发生,此模型可以作为不具备饲养GF 小鼠的条件下研究中医药调节呼吸道菌群与哮喘的工具?
英文摘要:
      Objective The research of traditional Chinese medicine has gradually revealed a mechanism fortreating disease by regulating the microflora. The aim of this study is to establish an asthmatic mouse model with airwaymicrobial dysbiosis to provide a suitable model for studying the effects of Chinese medicine on respiratory flora and asthma.Methods Forty BALB/ c mice were randomly assigned into the control, house dust mite (HDM) asthma model, asthmamodel with intranasal administration of cefoperazone sulbactam sodium (CFP; i. n. CFP+HDM) and asthma model withintraperitoneal injection of CFP (i.p. CFP+HDM) groups. The i.n. CFP+HDM group and the i.p. CFP+HDM group wereestablished to observe the effect of antibiotics on HDM-induced asthma in mice. After 24 d of model establishment,eosinophils (EOS) in the peripheral blood ( PB) of the mice were counted. Serum IgE, TH2 cytokines in thebronchoalveolar lavage fluid (BALF) and in the lung homogenates were analyzed by ELISA. Pulmonary pathologicalchanges were observed using hematoxylin and eosin, periodic acid-Schiff and Masson staining. Results In contrast withthe control mice, EOS in the PB, serum IgE, TH2 cytokines in the BALF and lung homogenates in the HDM group weresignificantly increased ( P <0. 05), while these changes in the i. n. CFP+HDM and i. p. CFP+HDM groups were moresignificantly pronounced than those in the HDM group ( P <0. 05). Similarly, the pathological observation showed moresevere asthmatic changes in the i.n. CFP+HDM mice, but the pathology of the i.p. CFP+HDM group did not significantlydiffer from that of the model group. Conclusions Intranasally administered high-dose antibiotics, cefoperazone sulbactamsodium, aggravated HDM-induced asthma in mice, suggesting that administering antibiotics via the airway may disturb theairway microbiome and aggravate asthma occurrence. This model can be used to study Chinese medicine as a method of regulating airway microbiomes of asthma in germ-free mice.
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