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齐婉婧,孙奇,李媛,张雪,金美玉,何岩,郑志红.小鼠生殖细胞特异性转录因子SOHLH1调控Sox30 基因表达的机制[J].中国比较医学杂志,2019,29(7):36~41.
小鼠生殖细胞特异性转录因子SOHLH1调控Sox30 基因表达的机制
SOHLH1 is necessary for regulation of Sox30 expression during mouse spermatogenesis
投稿时间:2019-03-27  
DOI:10.3969/j. issn. 1671 -7856. 2019. 07. 006
中文关键词:  精子发生  Sox30  ChIP  SOHLH1  小鼠
英文关键词:spermatogenesis  Sox30  ChIP  SOHLH1  mouse
基金项目:
作者单位E-mail
齐婉婧 中国医科大学实验动物部,沈阳 110001 shirlyqi1007@ 163.com 
孙奇 中国医科大学实验动物部,沈阳 110001  
李媛 中国医科大学实验动物部,沈阳 110001  
张雪 中国医科大学实验动物部,沈阳 110001  
金美玉 中国医科大学实验动物部,沈阳 110001  
何岩 中国医科大学实验动物部,沈阳 110001  
郑志红 中国医科大学实验动物部,沈阳 110001 zhihongzheng@ 163.com 
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中文摘要:
      目的 SOHLH1 (Spermatogenesis- and oogenesis-specific bHLH transcription factor-1)和SOX30(SRYbox)是与精子发生相关的转录因子,Sohlh1 与Sox30 的基因敲除雄鼠均丧失生育能力?出生后7 天Sohlh1 基因敲除雄鼠DNA 芯片显示Sox30 表达显著下调,本文探究了早期发育相关转录因子SOHLH1 对精子发生后期的关键基因Sox30 基因的转录调控作用?方法 构建Sox30 启动子荧光素酶表达质粒,瞬时共同转染Sox30 荧光素酶表达质粒和Sohlh1 真核表达质粒并利用荧光素酶活性测定实验检测荧光值?通过染色质免疫共沉淀实验检测SOHLH1 与Sox30 启动子DNA 序列特异序列的结合情况筛选主要激活位点?结果 共转染Sohlh1 真核表达质粒和Sox30 启动子区域荧光素酶质粒的实验组荧光素酶活性高于对照组?SOHLH1 与Sox30 启动子上的特异性位点结合,在-489 bp 位点的结合作用最强?结论 精子发生早期重要转录因子SOHLH1 可以直接激活顶体形成相关基因Sox30 转录,-489 bp (CAGGTG)为主要特异性结合位点,丰富了精子发生中延时翻译表达调控的现象并进行了调控机制的初步探索?
英文摘要:
      Objective The spermatogenesis- and oogenesis-specific bHLH transcription factor-1 (SOHLH1) andSRY box (SOX30) are transcription factors related to spermatogenesis. Sohlh1 and Sox30 knockout male mice lose fertility.At 7 days after birth, the Sohlh1 knockout male mouse DNA chip exhibits significant down-regulation of Sox30 expression.This study explored the role of the early development-related transcription factor SOHLH1 in the transcriptional regulation ofthe key gene Sox30 during late spermatogenesis. Methods The Sox30 promoter luciferase expression plasmid wasconstructed, and then together with the Sohlh1 eukaryotic expression plasmid was transiently co-transfected. Thefluorescence value was then detected by a luciferase activity assay. The primary activation site was screened using achromatin immunoprecipitation assay to detect the binding of SOHLH1 to the Sox30 promoter DNA sequence. Results Theluciferase activity was higher in the experimental group co-transfected with the Sohlh1 eukaryotic expression plasmid and theSox30 promoter region luciferase plasmid than in the control group. SOHLH1 binding to specific sites was strongest on theSox30 promoter binding sites at -489 bp. Conclusions The early important transcription factor SOHLH1 can directlyactivate acrosome-forming gene Sox30 transcription, with -489 bp (CAGGTG) as the main specific binding site. Thisaction enriches the regulation of delayed translation expression during spermatogenesis. The study thus provides a preliminary exploration of the regulatory mechanism.
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